Hepatitida je závažné onemocnění, které má mnoho příčin. Základem jejího vývoje je přímé nebo nepřímé poškození jater. Vzhledem k jeho důležitosti pro celý organismus je možné pouze odhadnout, jak obtížná je patologie. V tomto článku se budeme podrobněji zabývat charakteristikami průběhu a laboratorní diagnostiky hepatitidy C.
Příčinou onemocnění je virová látka, která se týká patogenů obsahujících RNA. Má výrazný rys - schopnost zmutovat, to znamená změnit jeho strukturu. Díky tomu infekce uniká útoku imunitního systému a ve většině případů vede k chronickému zánětu v játrech.
Vzhledem k existenci různých subtypů viru by měl být výběr léčiv založen na výsledcích genotypizace. Přes dlouhou studii onemocnění a rysy struktury HCV nebylo dosud možné vyvinout specifickou vakcínu pro toto onemocnění.
Problémy časné diagnózy spočívají v asymptomatickém průběhu hepatitidy, v důsledku čehož osoba navštěvuje lékaře ve stadiu cirhózy. K včasnému odhalení nákazy je nutné pravidelné lékařské vyšetření. Pouze pomocí laboratorního vyšetření krve je možné detekovat HCV a zabránit infekci lidí kolem vás. Faktem je, že dopravce infekce může po dlouhou dobu hádat o patologii a nadále přenášet virus na zdravé lidi.
Způsoby přenosu
Ve většině případů se virus šíří krví, protože obsahuje nejvyšší koncentraci patogenních agens. Infekce se tedy přenáší:
- s hemodialýzou;
- s infikovanou jehlou;
- v průběhu boje, při poranění kůže a kontaktu s krví;
- s transfuzí krve (krevní transfúze).
Pravděpodobnost infekce během intimity je zanedbatelná, protože sperma a vaginální výtok obsahují malé množství patogenů. Riziko infekce je významně zvýšeno v rozporu s integritou sliznice genitálií. To je pozorováno při agresivním a análním sexu.
Pokud jde o vertikální způsob přenosu, provádí se v procesu práce. V období březosti plodu nemůže patogen proniknout placentou do embrya. Při přirozeném porodu je patogenní látka přenášena na dítě traumatizací kůže, když je pozorován kontakt s matkou.
Po proniknutí patogenu do zdravého organismu začíná syntéza protilátek, které jsou chráněny před infekcí a patří k imunitním strukturám. Nacházejí se v úvodní studii osoby s použitím ELISA.
Pro potvrzení diagnózy je pacient podroben polymerázové řetězové reakci. Jedná se o analýzu genetického materiálu patogenního agens a stanovení virové zátěže.
Laboratorní diagnostika hepatitidy C
Laboratorní diagnostika začíná enzymovým imunotestem. Jeho hlavním úkolem je detekovat protilátky produkované proti patogenu. Jeho účinnost je téměř 95%. Díky tomuto výzkumu je možné identifikovat nosič viru v preklinickém stádiu a poslat jej k dalšímu vyšetření.
Kvalitativní analýza ELISA indikuje přítomnost nebo nepřítomnost imunoglobulinů v krvi pacienta. Jeho výsledek může být "pozitivní" nebo "negativní". Po obdržení první odpovědi je osoba odeslána k dalšímu vyšetření - PCR. Jeho cena závisí na kvalitě reagencií a laboratoři. Náklady na polymerázovou řetězovou reakci mohou dosáhnout 4 tisíc rublů.
Funkce PCR
Pomocí polymerázové řetězové reakce nám i malé množství biologického materiálu umožňuje odhadnout virovou zátěž v krvi, tj. Vypočítat koncentraci patogenů v jednom mililitru tekutiny.
S příchodem PCR se diagnóza hepatitidy stala mnohem snazší. Analýza umožňuje identifikovat HCV RNA, stanovit stadium infekčního procesu a infekci viru viru.
Existuje několik typů genetické diagnostiky:
- Kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C - potvrzuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v krvi subjektu:
- kvantitativní, pomocí které můžete vypočítat koncentraci virů a stanovit fázi onemocnění. Výsledek je uveden v IU / ml nebo kopií / ml (v závislosti na laboratoři);
- genotypování - nezbytné pro stanovení genotypu HCV. To je nutné pro přesný výběr léků, které budou v tomto případě nejúčinnější. Analýza nepřímo indikuje závažnost patologického procesu v játrech. Ve třetím genotypu patogenu je tedy nejčastěji pozorována steatóza, jejímž základem je akumulace tuku v hepatocytech (jeho buňkách). Kromě toho typ viru ovlivňuje výsledek a trvání terapeutického kurzu.
Kvalitativní analýza PCR pro hepatitidu C
Nejprve se v laboratoři vyšetřuje biologický materiál na přítomnost HCV RNA. Je důležité si uvědomit, že kvalitativní analýza hepatitidy C má určitou úroveň citlivosti, a proto nemusí vždy dát správnou odpověď. V tomto případě se doporučuje provést laboratorní diagnostiku pomocí jiných činidel.
Pro získání spolehlivých výsledků by měly být použity zkušební systémy s citlivostí nejméně 50 IU / ml.
Výsledek diagnostiky může být buď „pozitivní“ nebo „negativní“. Není-li patogen nalezen v krvi, studie je dokončena. Pokud je ve vzorku detekován patogenní agens, kvantifikuje se virová zátěž.
Falešně negativní odpověď se získá, když je proces porušen, například aktivní složky, které potlačují konstrukci kopií patogenu vstupujícího do média. Není tedy možné zobrazit pravdivý obraz krve, proto není diagnostikována infekce osoby.
Falešně pozitivní výsledek může být dosažen, jestliže trubice pro sběr biologického materiálu, stejně jako prostředí pro studii byly kontaminovány. Kromě toho je taková analýza možná i při smíšených infekcích, kdy játra jsou postižena několika viry, například hepatitidou C a D.
Indikace pro kvalitativní výzkum
Lékař může předepsat pacientovi kvalitativní studii identifikace RNA viru hepatitidy C:
- po obdržení pozitivní nebo pochybné reakce enzymového imunotestu;
- pro ověření diagnózy;
- stanovení virové zátěže;
- stanovení stadia nemoci;
- diagnóza smíšené infekce. Hepatitida C často infikuje játra současně virem „D“;
- stanovení terapeutické taktiky s ohledem na genotyp původce;
- hodnocení dynamiky změn během léčby antivirotiky.
Výhody polymerázové řetězové reakce zahrnují:
- vysoká citlivost techniky, která umožňuje stanovit skutečnost infekce v preklinickém stadiu;
- identifikace genetického materiálu patogenu, nikoli jeho protilátek;
- možnost stanovení subtypu patogenního agens;
- vysoká diagnostická rychlost, protože není vyžadováno žádné naočkování materiálu na živné médium a stačí použít specifické testovací systémy. Výsledek dostane člověk po 5 hodinách;
- univerzálnost. Analýza umožňuje identifikovat jakýkoliv genetický materiál (RNA, DNA). Díky tomu může lékař potvrdit hepatitidu C a další typy onemocnění (B);
- schopnost detekovat latentní infekci.
Kvantitativní výzkum
Při studiu krve pomocí polymerázové řetězové reakce lze vypočítat počet patogenů v pevném objemu biologického materiálu. Indikátor je uveden v IU / ml. Pomocí analýzy je možné určit míru nákazy pacienta, určit stadium infekčního procesu a také zhodnotit účinnost lékové terapie.
Na základě PCR odborník rozhodne, které dávky léků mohou blokovat reprodukci patogenů. Dále se stanoví doba trvání antivirové léčby a prognóza života. Je důležité si uvědomit, že testovací systémy mají vysokou citlivost, proto metoda umožňuje potvrdit infekci člověka v preklinickém stadiu.
Genotypizace
Vzhledem ke schopnosti mutovaného patogenu je jeho genotyp nezbytný k určení taktiky léčby a výběru antivirových léčiv. Například léčba HCV 1 trvá 48 týdnů, přičemž pozitivní trend byl pozorován pouze v 60% případů. Genotypy 2 a 3 mají příznivější prognózu. Antivirová léčiva jsou předepisována po dobu 8 měsíců a jejich účinnost dosahuje 85%.
Podle statistik jsou ve většině případů HCV 1, 2 a 3 registrovány v Ruské federaci.
Při dešifrování laboratorního testu může být tato odpověď uvedena - „není napsána“. To znamená, že virus cirkuluje v oběhovém systému pacienta a testovací systém jej nemůže rozpoznat. Výsledkem analýzy v tomto případě je, že patogen není pro danou zeměpisnou oblast typický.
Jak získat spolehlivé výsledky?
Pro kvalitativní studii PCR k detekci RNA původce hepatitidy C bylo prokázáno, že jsou správné výsledky, je nutné dodržet požadavky na přípravu laboratorní diagnostiky:
- odběr krve se provádí na prázdný žaludek a „hladová“ mezera by neměla být kratší než 8 hodin;
- dva dny před studiem se doporučuje přestat pít alkoholické nápoje a zanechávat kořeněná, mastná a uzená jídla;
- zrušit zavedení léků, které snižují srážení krve, například heparin. Pokud jsou tyto léky předepsány ze zdravotních důvodů, musíte to oznámit lékaři. Kromě toho by měl být odborník informován o přijímání jiných léků, které mohou ovlivnit výsledek laboratorního výzkumu;
- V předvečer odběru biologického materiálu by neměly být prováděny fyzioterapeutické postupy a měly by být vystaveny těžké fyzické námaze.
Výsledky analýzy mohou být ovlivněny nejen osobou, která daruje krev, ale i dalšími faktory, a to:
- nekvalitní odběr vzorků krve;
- nedodržování doporučení pro přepravu biologického materiálu;
- nedostatečná odborná příprava laboratorních pracovníků;
- nedodržování výzkumné techniky;
- zavedení antikoagulancií (heparin) v předvečer odběru krve. Tato skupina léků snižuje srážení, čímž zpomaluje práci činidel.
V různých laboratořích se může diagnostická odpověď mírně lišit, ale tyto chyby neovlivňují konečný výsledek studie.
Zvláštní pozornost je věnována typům zkušebních systémů používaných v laboratoři. Často se dává přednost činidlům s vysokou citlivostí. To je důležité pro pacienty s nízkou virovou zátěží, protože je těžké jej detekovat.
Jak často se provádí laboratorní test?
Primární polymerázová řetězová reakce se provádí u lidí, kteří byli detekováni imunoanalýzou protilátek proti patogenu hepatitidy. V tomto případě je určen k potvrzení skutečnosti infekce osoby a stanovení stadia onemocnění. Kromě toho analýza umožňuje určit podtyp viru, který je zvláště důležitý pro volbu léčiv.
Další období pro povinné laboratorní vyšetření je 3 měsíce od zahájení antivirové terapie. Diagnostika umožňuje vyhodnotit účinnost léčiv, upravit dávku nebo je nahradit.
Kromě základních testů lze PCR provádět dodatečně ve 4 a 24 týdnech od začátku léčby. Pozitivní prognóza onemocnění je potvrzena snížením virové zátěže po třech měsících léčby. Například by se měl snížit z 1 milionu IU / ml na několik set tisíc.
Pokud koncentrace patogenních agens v krvi zůstává na stejné úrovni nebo mírně roste, znamená to neúčinnost antivirotik a vyžaduje jejich nahrazení. Na konci léčby lze pomocí PCR potvrdit uzdravení pacienta.
Pro správnou interpretaci výsledků laboratorní diagnostiky je nutná konzultace s odborníkem na hepatologii nebo infekční nemoc. Vzhledem k vysoké četnosti falešných odpovědí v testu ELISA se analýza používá výhradně pro primární screening. Pro důkladnější vyšetření pacienta používali polymerázovou řetězovou reakci.
Pro analýza PCR pro virus hepatitidy C
Hepatitida C je závažné onemocnění jater pro všechny osoby. Patologie je způsobena flavivirus HCV, ve struktuře molekuly RNA je přítomný, který nese obecný genetický kód viru.
Patologie může být různých forem, vše přímo závisí na celkovém stavu osoby a vlastnostech každého jednotlivého organismu.
Tato struktura umožňuje analyzovat PCR na přítomnost viru kategorie hepatitidy C v těle.
To vám umožní včas identifikovat virus, který je nebezpečný pro člověka, podstoupit léčbu drog a obnovit zdraví, chrání tělo před zničením jater.
HCV virus se může projevit jak v akutně nebezpečné formě, tak i chronicky. Pokud byl tento virus zjištěn najednou nebo jinou osobou, musí být přiřazen k analýze PCR.
Proč se provádí analýza PCR?
Na základě výsledků analýzy bude lékař schopen sestavit léčebný režim
Laboratorní lékařská analýza PCR pro hepatitidu C je studie biologického materiálu odebraného k určení flavaviru. Studie představuje polymerázovou řetězovou reakci.
Ukazuje celkovou kvantitativní hodnotu virové léze, její kvalitativní vlastnosti a je také možné určit genotyp viru, který obsahuje RNA.
Je to důležité! Na základě této analýzy lékař určí metodu, typ terapie a její trvání. Pomocí analýzy je také možné určit celkový epidemiologický faktor, tj. Míru rizika přenosu onemocnění na jiné nosiče.
Analýza v moderní medicíně se také nazývá analýza RNA. Důvodem je to, že invazivní pro flavavirus hepatitidy C je složena z částice RNA, jejíž velikost je přibližně 30-60 nm. Jedním z charakteristických rysů tohoto viru je určitá tendence k mutaci.
Každý poddruh nebo přítomný genotyp má různou odolnost. Tato okolnost se stává základem pro různé metody výzkumu a léčby onemocnění, jakož i další prognózu s dobře provedenou terapií.
Jak
Analýza se provádí striktně na prázdný žaludek, to znamená, že před snídaní se podává žilní krev. Testovací metoda se provádí pomocí Real-Time PCR nebo vysoce citlivou diagnostikou moderních standardů, která se provádí v reálném čase.
Dolní mez detekce je v tomto případě 15 IU / ml. Analýza se provádí přísně za použití uzavřených automatizovaných systémů. Hepatitida C může být stanovena pomocí testů, jako je COBAS AMPLICOR s celkovou citlivostí 50-100 IU / ml.
Je to důležité! Všechny typy podobného moderního laboratorního výzkumu jsou prováděny na základě zohlednění určité hranice citlivosti.
Mluvíme o schopnosti činidla použitého k detekci minimální úrovně schopnosti činidla určit virus ve zkoumaném biologickém materiálu. Pokud v těle není žádná choroba, výsledek studie bude vypadat jako „nenalezeno“.
Na obrázku je znázorněn obvod analýzy PCR:
Typy PCR analýzy a její výsledky
Pokud máte nejmenší nemoci a bolest v oblasti cookies, měli byste okamžitě konzultovat s lékařem, který provede důkladnou studii. PCR analýza hepatitidy C je založena na třech hlavních bodech:
- Kvantitativní analýza.
- Kvalitativní analýza.
- Genotypizace
Provedené testy poskytují příležitost k určení a identifikaci přesné povahy virémie a různých symptomů genetického plánu přítomnosti patogenu. V přímém poměru k citlivosti z provedeného diagnostického systému může být lékařský výzkum proveden jednou, stejně jako určité potvrzení.
To by mělo být provedeno za účelem objasnění dříve získaných výsledků a v tomto případě je použito citlivějším činidlem.
Vysoce kvalitní PCR
Kvalitativní analýza pro PCR je další název pro studii, jako je polymerázová řetězová reakce. Se standardní citlivostí testu, která umožňuje stanovit přítomnost virového mikrobu, budou ukazatele v rozsahu 10-500 IU / ml.
Při negativní analýze nemoci analýza ukáže, že celková koncentrace v krvi pacienta bude řádově nižší než obecná prahová hodnota citlivosti pro diagnostický systém.
Pokud byla získána „nezjistená“ odpověď v průběhu kvalitního PCR, budete muset pro následnou léčbu znát práh celkové citlivosti činidla. Co se týče pozitivní reakce, během analýzy PCR může být získána již 4. den po infekci. Standardní proteinové frakce k zavedeným flavavirům se mohou objevit mnohem později.
Obecné schéma analýz PCR lze znázornit následovně:
Kvantitativní PCR
Kvantitativní PCR je speciální indikátor produkované virové zátěže, který odráží celkovou úroveň koncentrace RNA viru v lidském těle. Tento indikátor ukazuje množství virových RNA enzymů, které jsou přítomny na kubický centimetr odebraný z krevní žíly.
Výsledky této studie v systému lékařského výzkumu jsou označeny v jednotkách jednoho mililitru. U certifikátů vydaných v rukou může tento indikátor vypadat jako 1,7 milionu nebo 1,700 000 IU / ml.
Před provedením protivirové terapie je těmto pacientům přiřazena kvantitativní analýza PCR. Podruhé se koná 12. týden léčby, který umožňuje správně vyhodnotit výsledky léčby hepatitidou C. Jinými slovy, analýza umožňuje stanovit takové důležité parametry jako:
- Je stanovena míra infektivity, tj. Stupeň rizika mikrobiálního přenosu z infikované osoby na zdravého člověka. Čím vyšší je koncentrace flavavirové RNA, tím vyšší je pravděpodobnost infekce jiné osoby, což je důležité v sexuálních vztazích.
- Celková úroveň účinnosti a zvolený způsob léčby.
- To je ideální příležitost k určení trvání a prognózy antivirové terapie. Čím vyšší je zátěž, tím déle bude ošetření trvat.
Stojí za to vědět, že kvantitativní PCR závisí na specifickém typu laboratorního testu a prahu citlivosti. Nejnižším limitem stanovené normy je, že ukazatel nedosahuje 600 000 IU / ml.
Průměr je v rozmezí 600 000 až 700 000 IU / ml. Pokud byly výsledky získány nad 800 000 IU / ml, lékař okamžitě určí vysokou koncentraci látky, jako je RNA, s virem přítomným v prostředku.
Je to důležité! Přímý vztah mezi hladinou HCV RNA a závažností onemocnění naznačuje, že tento virus je přítomen v celkovém složení krve a také si všímá složitosti patologie. Pacient může mít dostatečně vysokou virovou zátěž. Tento vztah navíc naznačuje, že dochází k vážnému poškození buněk.
Genotypizace
Vzhledem k relativně vysoké mutační aktivitě HCV v přírodě je v průběhu prováděného testování možné určit, jak je typ viru přítomen v krvi nemocného. V moderní medicíně je známo 11 genotypů viru, jako je například hepatitida C. Zahrnuje poměrně velký počet různých poddruhů nebo subtypů.
Typy 1, 2 a 3 jsou v Rusku známé a běžné, genotypování je velmi důležitým prvkem provedené analýzy. Lékař s ním chápe úroveň rezistence nebo rezistence patologie vůči vybraným lékům.
Téměř vždy, na základě této analýzy, se buduje budoucí léčba. To je důležité, protože existují pravidla léčby, jako jsou:
Kvalitativní analýza hepatitidy C
8. března 2017, 12:29 Odborné články: Nová Vladislavovna Izvchikova 0 10,547
Kvalitativní analýza polymerázové řetězové reakce - PCR pro hepatitidu C určuje přítomnost nebo nepřítomnost HCV v těle. V laboratorních podmínkách se zkoumá struktura RNA, která bude zahrnovat virus. V případě detekce viru C je nutné podstoupit léčbu, protože zanedbaný stav jater bude mít závažné následky. Vysoce kvalitní PCR se provádí po zotavení, aby se potvrdila nepřítomnost protilátek. Jmenován a pro rutinní kontrolu. Při nízké koncentraci původce v krvi nemusí PCR (kvalitativní) nic detekovat, protože diagnostický systém má své vlastní prahy citlivosti. V případě počátečního stadia onemocnění nebo mírné formy se PCR provádí ultradiagnostikou na ultracitlivém zařízení.
Co je to RNA virus?
Termín RNA viru hepatitidy C (nebo RNA viru hepatitidy C) je samotné onemocnění jater. Virus C se váže na zdravou buňku těla tím, že proniká dovnitř. V průběhu času, se šíří po celém těle, je nutné se dostat do krve. V důsledku toho patogen proniká do jater, fúzuje se s buňkami a tvrdě pracuje. Jaterní buňky (hepatocyty) pracují pod svým vlivem, procházejí změnami a odumírají. Čím déle je virus C v játrech, tím větší je počet buněk. Postupem času se vyvíjejí nebezpečná onemocnění vedoucí k maligní degeneraci a smrti.
Infekce jater tímto typem viru se nemusí projevovat externě. Po mnoho let nebo desetiletí se infikovaný člověk cítí zcela zdravý a pouze náhodné vyšetření nejčastěji odhaluje patologii. Při darování krve pro hepatitidu se zkoumá část řetězce RNA (ribonukleová kyselina), který je součástí lidského genu (DNA). Výsledky laboratorních testů by neměly být použity pro samoléčbu, protože se jedná pouze o indikátor. Přesný obraz a další diagnóza jsou lépe určeny lékařem.
Po dokončení: indikace pro výzkum
Při potvrzení HCV se provádí PCR analýza (polymerázová řetězová reakce). Studie PCR pomáhají nalézt kauzativní agens ve struktuře RNA a předepisují účinnou terapii. Jmenován v následujících případech:
- detekce příznaků zánětu jater;
- screeningové studie prevence;
- zkoumání osob v kontaktu;
- diagnostika hepatitidy smíšeného původu (stanovení hlavního patogenu);
- stanovení úrovně reprodukční aktivity viru v chronické formě;
- cirhóza jater;
- stanovení předepsané léčby.
K dispozici je kvalitativní i kvantitativní analýza PCR. Kvantitativní PCR ukazuje procento RNA s nosiči viru v krvi a kvalitativní indikuje virovou přítomnost nebo nepřítomnost. Pozitivní indikátor kvality (přítomnost RNA hepatitidy C) také vyžaduje kvantitativní výzkum. Vysoká úroveň koncentrace původce hepatitidy C je spojena s rizikem jejího přenosu, tj. Infekce jiných. Nízká čísla jsou lépe léčitelná. Množství virů RNA v krvi nesouvisí s intenzitou onemocnění. PCR analýza se také provádí v případě terapie interferonem, aby se předepsalo trvání a složitost léčebného cyklu.
Vlastnosti vysoce kvalitní PCR analýzy pro hepatitidu C
Kvalitativní analýza je přiřazena ukazateli polymerázové řetězové reakce pro všechny pacienty, kteří mají ve své krvi protilátky proti hepatitidě C. Ti, kteří byli nemocní a zotaveni, musí znovu podstoupit test. Doporučuje se provést analýzu hepatitidy B, pak v případě pozitivního závěru a hepatitidy D. Také kvalitativně analyzovaná reakce by měla být prováděna ve spojení s dalšími krevními testy. Analýzy ukazují úplný obraz šíření viru.
Z výsledků testu bude viditelný nebo negativní pouze pozitivní test na hepatitidu C, tj. Přítomnost nebo nepřítomnost viru. Pokud je výstup "detekován", pak je virus aktivní a zůstává aktivní. Označení "nedetekováno" označuje nepřítomnost viru nebo jeho malého množství. S tímto ukazatelem je třeba mít na paměti, že analytická citlivost diagnostických systémů je odlišná a že RNA hepatitida C může být stále v krvi, ale v analýze se neprojevuje.
Zvláště citlivá metoda PCR odhaluje ultra hepatitidu C i v malých množstvích. Použije se fluorescenční hybridizační studie, která je mnohonásobně vyšší než standardní PCR systémy. Metoda se používá v několika případech:
- podezření na skryté formy hepatitidy C;
- PCR diagnostika nepotvrdila patogen, ale existují protilátky;
- v případě využití;
- odhalit časnou infekci.
Dekódovací analýza
PCR dekódování HCV ovlivňuje konečné rozhodnutí při stanovení diagnózy, zejména pomocí ultrametodové metody. Hlavní nevýhodou této studie je přísné dodržování sterilních podmínek pro vzorek a materiály. Mírná odchylka někdy ukazuje nepřesné analytické závěry, komplikuje diagnózu a následnou léčbu. Analýza PCR pro stanovení hepatitidy RNA ne vždy s jistotou ukazuje obraz onemocnění, někdy jsou přípustné nepřesnosti, a to v obou směrech.
Při diagnostice viru hepatitidy se doporučuje provést komplexní vyšetření.
Norma ukazatelů
Absence JgM protilátek proti virové hepatitidě C ve výsledcích studie je považována za normu v analýze polymerázové řetězové reakce. Současně nálezy sérologické analýzy ukazují na přítomnost protilátek proti viru C, což je také v normálním rozmezí. Kvalitativní definice neukazuje intenzitu onemocnění, pouze odhaluje původce hepatitidy C v RNA. Tato analýza se po zpracování opakuje, aby se potvrdilo skutečné zotavení.
Odchylky
Pokud jsou přítomny JgM protilátky proti HCV RNA, znamená to, že se vyvíjí infekce. Onemocnění zároveň probíhá akutně nebo chronicky, projevuje se v různých fázích. Pokud je zaznamenán pokles počtu protilátek, analýza ukáže, že výsledky léčby byly dosaženy během zotavení. Existují extrémně vzácné případy falešně pozitivních nálezů v diagnostice. Oni jsou nalezeni u žen během těhotenství au lidí s jinými infekčními chorobami.
PCR analýza pro hepatitidu C
Pro diagnózu "chronické virové hepatitidy C (CVHS)" vyžaduje komplexní vyšetření osoby, která zahrnuje klinické, laboratorní a instrumentální studie. Z hlediska diagnostiky pro správnou diagnózu je důležitá metoda PCR - polymerázová řetězová reakce.
Co tato analýza ukazuje a proč je potřeba?
Tato laboratorní metoda detekuje RNA viru hepatitidy C v lidské krvi. Spolu s testem ELISA (ELISA) na protilátky proti viru se používá PCR pro stanovení diagnózy CVHC a jeho genotypu patogenu. Tento výzkum je jednou z nejnovějších metod laboratorní diagnostiky. Jeho spolehlivost na CVHS přesahuje 97%, což je považováno za velmi dobrý ukazatel pro výzkum.
Existují tři PCR krevní testy na CVHS: kvalitativní, kvantitativní a virové genotypování. První studie (kvalitativní analýza) viru ji detekuje v krvi, a proto se používá pouze pro diagnózu.
Druhá (kvantitativní) studie určuje míru virové zátěže na těle, proto se používá ke sledování účinnosti léčby.
Třetí PCR (genotypizace) objasňuje diagnózu a stanovuje genotyp viru, což je velmi důležité pro určení správné antivirové léčby.
Podstatou techniky polymerázové řetězové reakce je použití enzymů, které násobí genetický materiál patogenu v biomateriálu. V procesu takové replikace se trubice s krví několikrát zahřívá a ochladí na teplotu potřebnou pro urychlení enzymatické reakce. V důsledku těchto manipulací se množství virového genomu mnohokrát zvyšuje, což umožňuje jeho detekci i při minimálním množství.
PCR diagnostika má mnoho výhod oproti jiným laboratorním testům:
- vysoká citlivost - 97-98%;
- garantovaná analytická specificita (odhaluje přesně patogen, který chcete najít, a ne jeho příbuzný kmen);
- rychlost vedení (trvá déle než 2 dny, než se dospěje k závěru).
Tři typy PCR testů
Vysoce kvalitní PCR analýza je přiřazena všem pacientům, u kterých analýza ELISA detekovala protilátky proti viru HVGS. Po provedení vysoce kvalitní PCR mohou být získány dvě možnosti odpovědi: "RNA je detekována" nebo "RNA není detekována." Pro detekci minimálního množství viru v krvi jsou potřebné testovací systémy s citlivostí nejméně 50 IU / ml. Pokud je koncentrace viru v krvi pacienta nižší, než může diagnostik určit, může být výsledek studie falešně negativní. Aby se předešlo takové diagnostické chybě, měly by být laboratoře provádějící diagnostiku PCR vybaveny vysoce citlivými testovacími systémy. V laboratoři "Invitro" se používají například testy s citlivostí 15 IU / ml. Laboratorní pracovníci jsou povinni poskytnout pacientům a lékařům informace o citlivosti testů na jejich první žádost.
Kvantitativní analýza PCR určuje stupeň virémie, tj. Koncentraci patogenu v krvi, virovou zátěž. Výsledek této studie, na rozdíl od vysoce kvalitní PCR, je vyjádřen v počtech, například 2 × 10 * 6 IU / ml, což znamená 2 miliony mezinárodních jednotek v 1 ml krve. Některé laboratoře používají jiný indikátor - počet kopií / ml. Tyto dva ukazatele lze snadno převést: 1 mezinárodní jednotka se rovná 4 kopiím RNA. 2 × 10 x 6 IU / ml bude tedy znamenat, že 8 x 10 x 6 kopií virové RNA v 1 ml, tj. 8 milionů kopií v 1 ml krve.
Genotypizace je definicí jednoho ze šesti genotypů viru. Klinický obraz, rychlost vývoje komplikací jater a prognóza budoucího života pacienta závisí na genotypu původce. Genotyp viru je velmi důležitý již ve stadiu diagnózy, protože kombinace léčiv a doba trvání terapeutického kurzu, který má být pacientovi přiřazen, závisí na jeho správném stanovení.
Nicméně i tento zdánlivě „dokonalý“ laboratorní výzkum má své nevýhody:
- studie replikuje genetický materiál všech patogenů, dokonce i neživých, které mohou zkreslit výsledek. Aby bylo možné sledovat účinnost pomocí PCR, provádí se re-analýza nejdříve 2 měsíce po předchozím, takže mrtvé viry mohou „opustit“ organismus pacienta;
- část virového genomu, která je určena testovacími systémy, může být teoreticky přítomna v jiných virech nebo mikroorganismech, takže existuje možnost falešně pozitivní reakce;
- viry rychle mutují. Někdy je rychlost a rozsah mutace viru tak vysoká, že testovací systém přestane zachytávat svůj genom. V důsledku toho je možný falešně negativní výsledek.
Pro vyrovnání těchto nedostatků výrobci laboratorních testovacích systémů pro diagnostiku PCR neustále provádějí testy, včetně zkřížených reakcí a citlivosti na konkrétní genotyp viru.
Jak provést PCR test na hepatitidu C?
Aby byl závěr PCR vyšetření spolehlivý, je nutné striktně dodržovat pravidla přípravy na jeho provádění:
- studie se provádí nalačno (glukóza, tuky, minerály, které se dostávají do krve z potravin, mohou ovlivnit rychlost a kvalitu enzymové reakce);
- mezera mezi posledním jídlem a odběrem krve pro analýzu by měla být nejméně 8 hodin;
- v předvečer studie je zakázáno užívat alkohol a konzumovat tučné potraviny, jejichž doba odstranění je dlouhá;
- den před odjezdem do laboratoře se vyvarujte silného fyzického a emocionálního stresu;
- do doby odběru krve se nedoporučuje kouřit.
Aby se předešlo vzniku falešných závěrů, musí údajný pacient přijít do laboratoře o něco dříve než krev. Trvá 15-20 minut, aby člověk zachytil dech, uklidnil se. Výsledek vyšetření může ovlivnit adrenalin, který je po rychlé procházce přítomen v krvi.
Pokud pacient požádá o analýzu, vezme si o tom lékaře. Je možné, že některé z nich budou muset být po určitou dobu odmítnuty (pokud je to možné).
Výsledek analýzy PCR pro hepatitidu C
Dekódování výsledků laboratorního lékaře laboratoře, která provedla analýzu. Dekódování je stanovení odchylky výsledku získaného z normy. Rychlost ukazatelů je stanovena přímo výrobcem zkušebního systému, který laboratoř používá pro diagnostiku. Není proto překvapující, že v některých laboratořích je virová zátěž stanovena v IU / ml a v jiných v kopiích / ml.
Po obdržení závěru je nutné, aby byl schopen jej správně interpretovat. Léčba výsledků studie by měla být prováděna ošetřujícím lékařem pacienta s hepatitidou C. Pouze po objektivním, instrumentálním a laboratorním vyšetření pacienta může lékař získat dostatečné množství dat pro správnou interpretaci získaných výsledků PCR.
Vyhodnocení kvalitativní analýzy zpravidla nezpůsobuje potíže ani u pacientů. Výsledkem může být pouze jeden: "detekován" nebo "nebyl detekován." V tomto případě je druhá z nich normou.
Indikátory kvantitativní analýzy je obtížnější interpretovat. Ukazuje míru virové zátěže pacienta. Dokonce ani mezi hepatology neexistuje shoda o tom, jak léčit detekovanou virémii. Většina lékařů má sklon věřit, že by mělo být zváženo vysoké zatížení více než 8 × 10 * 5 IU / ml. Zatížení více než 1 × 10 x 7 IU / ml se považuje za velmi vysoké, zatímco nízké zatížení je menší než 4 × 10 x 5 IU / ml.
Stupeň virové zátěže indikuje virulenci (agresivitu) viru: čím větší je jeho množství v krvi, tím rychleji se mohou vyvinout komplikace jater. Vysoká koncentrace viru v krvi těhotné ženy zvyšuje pravděpodobnost jejího proniknutí hemato-placentární bariérou k plodu. Virémie také ovlivňuje účinnost léčby: při nízkém počtu je účinnost léčby vyšší než u vysokých.
Abychom byli přesvědčeni o přesnosti analýzy PCR pro hepatitidu C, je nutné dát přednost pouze těm laboratořím, které jsou dobře ověřené. Cenová politika by v tomto případě neměla hrát primární úlohu.
Využití PCR diagnostiky
Polymerázová řetězová reakce (PCR) v molekulární biologii je experimentální metodou pro detekci virů. Umožňuje významně zvýšit koncentraci některých fragmentů nukleových kyselin (DNA) ve vzorcích biologického materiálu, což umožňuje určit (rozpoznat) a spočítat.
Analýza se provede následujícím způsobem. Genetický materiál (vzorek krve), který může potenciálně obsahovat požadovaný gen, se zavede do zkumavky. Tam jsou také umístěny primery - chemicky syntetizované segmenty malé délky požadovaného genu.
DNA nebo RNA polymeráza je také přidána do nádoby, je schopna uspořádat řetězec nukleové kyseliny, který je zcela identický s originálem. Výsledná kompozice se vstřikuje a sada čtyř volných nukleotidů - speciálního stavebního materiálu pro RNA nebo DNA, z nichž jeden obsahuje radioaktivní částice fosforu.
Výsledná směs se zahřeje na 95 až 96 ° C, což je důvod, proč jsou tkané dvě šroubovice DNA, které jsou normálně propleteny. Poté se léčivo zchladí, kdy se primery samy připojí k požadované oblasti virového genomu, čímž se zabrání tomu, aby RNA (nebo DNA) znovu vytvořila dvojitou šroubovici.
V procesu chlazení polymeráza hledá volný nukleotidový řetězec. Pro fungování tohoto enzymu je zapotřebí jeden řetězec nukleotidů. Protože polymeráza prochází podél řetězce DNA (jako prstenec na laně), není schopna pracovat na dvojité šroubovici.
Poté se provede opakovaný zahřívací cyklus, v důsledku čehož se oddělují řetězce nukleotidů. V každém z těchto cyklů PCR se množství požadovaného genu hepatitidy ve vzorku exponenciálně zvyšuje a zbytek genetického materiálu se produkuje (roste) lineárně.
Po purifikaci roztoku z nukleotidových zbytků a separace DNA řetězců pomocí parametru molekulové hmotnosti pomocí elektroforézy lze snadno určit, zda existuje požadovaný gen ve studovaném vzorku nebo ne.
Výhody PCR
Laboratorní testování pomocí PCR umožňuje získat více informací než přítomnost virové RNA. Stanovením parametru úrovně radioaktivního záření je možné určit, kolik genetického materiálu bylo původně obsaženo ve vzorku, který je předmětem studie. V případě hepatitidy určete ukazatel úrovně virové zátěže.
Další výhodou této metody je velmi vysoký stupeň citlivosti CR reakce. Je mnohem vyšší než klasické metody detekce virů. V ideálním případě je pro identifikaci požadovaného genu pro PCR postačující pouze jeden virus ve vzorku.
Kromě toho je PCR zcela specifická. Jeho primery jsou navrženy tak, aby plně odpovídaly jedinečným oblastem požadovaných genů, které nemají žádnou jinou sekvenci. Jako otisky prstů jsou jedinečné, každý gen má jedinečné sekvence nukleotidů.
Kvalitativní analýza PCR
Kvalitativní analýza odhaluje pouze přítomnost viru v krvi. Tento test by měl být proveden u všech pacientů, u kterých byly v krvi nalezeny protilátky proti hepatitidě C. Výsledkem může být pouze jedna ze dvou hodnot: „detekovaná“ nebo „nedetekovaná“. U zdravého člověka by měla být norma (referenční hodnota) „nedetekována“.
Je zde zvláštní interpretace těchto výsledků kvalitativního výzkumu:
- Výsledek je "detekován". To znamená, že v analyzovaném vzorku odebraného viru hepatitidy C byl nalezen fragment RNA, který je specifický pro virus hepatitidy C. V důsledku toho je pacient infikován virem hepatitidy C. Pokud je výsledek vysoce kvalitní PCR "detekován", znamená to, že se virus množí. a v této době infikuje nové jaterní buňky v těle.
- Výsledek je "nebyl detekován." Tento verdikt ukazuje, že v analyzovaném vzorku získaného biologického materiálu v této laboratoři nebyl nalezen fragment RNA, který je specifický pro virus hepatitidy C. Alternativně byla koncentrace RNA patogenní infekce v tomto vzorku pod mezí citlivosti testu.
V akutní fázi RNA viru hepatitidy C mohou být takové kvalitativní studie metodou PCR detekovány již po 1-2 týdnech bezprostředně po infekci těla, tedy dlouho před výskytem protilátek proti samotné hepatitidě.
Nespolehlivé výsledky této studie lze získat na adrese:
- kontaminovaný biomateriál;
- přítomnost heparinu v krvi pacienta;
- přítomnost chemických nebo proteinových látek (inhibitorů) ve vzorku, které ovlivňují různé složky PCR.
K provedení kvalitativní analýzy PCR není nutná žádná speciální příprava pacienta na studii. Použitým materiálem je žilní krev.
Vyhodnocení výsledků
Vysoce kvalitní PCR testy mají určitý stupeň citlivosti av závislosti na přesnosti výzkumu a na úrovni vybavení v laboratoři se mohou pohybovat od 10 do 500 IU / ml.
To znamená, že pokud je virus ve vzorku krve přítomen ve velmi nízké koncentraci (nižší než prahová hodnota citlivosti této laboratoře), může být výsledek pro nemocného pacienta „nedetekován“. Proto je při provádění kvalitativní analýzy PCR s nízkou hladinou virémie (nízká koncentrace viru), například u pacientů podstupujících antivirovou terapii, velmi důležité znát práh citlivosti tohoto diagnostického systému.
Varianty diagnostických systémů
Pro kontrolu virologické odpovědi se doporučuje používat diagnostické systémy s prahovou hodnotou citlivosti nejméně 50 IU / ml při provádění antivirové léčby. Tato kritéria jsou splněna například s analyzátory Cobas Ampicolor HCV-Test (s přesností na 50 IU / ml), stejně jako s RealBest HCV RNA (s citlivostí 15 IU / ml).
Podle doporučení Světové zdravotnické organizace (WHO) je pro stanovení definitivní diagnózy hepatitidy C nezbytné zakládat pouze na trojnásobné detekci RNA viru C ve vzorcích séra pacienta v nepřítomnosti jiných druhů markerů hepatitidy.
Kromě metod PCR se také pro detekci HCV RNA u pacientů používá TMA test (metoda transkripční amplifikace). Má nejlepší práh citlivosti (5–10 IU / ml), ale u nás tato zkušební metoda ještě není běžná.
Rozsah detekovaných virových modifikací
Takové kvalitativní stanovení přítomnosti RNA viru hepatitidy C v séru umožňuje určit několik genotypů tohoto viru. V současné době věda ví více než šest genotypů tohoto viru, stejně jako asi 10 subtypů tohoto onemocnění.
V naší zemi, běžné viry 1, 2, 3 genotypy. Laboratoře mohou detekovat následující genotypy: la a lb, 2a, 2b a 2c, stejně jako 3, 4, 5a a 6, bez ohledu na subtypy. Pro všechny modifikace viru je detekční specificita 100%.
Kvantitativní analýza PCR
Pomocí kvantitativního testu PCR se stanoví úroveň koncentrace viru hepatitidy ve vzorcích krve (virová zátěž). Tento test na virémii (koncentrace virů) vám umožňuje určit počet jednotek určitého genetického materiálu (samotnou virovou RNA), který je detekován v určitém množství. V tomto případě určete jeho koncentraci v 1 ml, což odpovídá 1 cu. viz
Kvantitativní parametry analýzy jsou pro tento účel vyjádřeny v číslech, mezinárodní jednotky (IU) na mililitr (ml), označované jako IU / ml, se používají jako jednotky měření. V některých laboratořích lze nyní stanovit množství viru v jiných jednotkách: počet kopií na ml je označen jako kopie / ml.
- Pro hepatitidu C se taková kvantitativní analýza PCR provádí bezprostředně před zahájením léčby. Pak v 1., 4., 12. a 24. týdnu. Hodnocení v 12. týdnu je indikativní, umožňuje určit účinnost terapie.
- Příprava na analýzu. K provedení kvantitativní analýzy PCR není nutná speciální příprava pacienta na studii. Půl hodiny před odběrem vzorků by neměl kouřit. Jako laboratorní materiál se používá žilní krev.
Vyhodnocení výsledků
Pro různé laboratorní zkušební systémy existují pro tento ukazatel různé konverzní faktory v IU / ml. V průměru užívají konverzní parametr, ve kterém 4 kopie / ml = 1 IU / ml. To je například, pokud laboratoř poskytne výsledek PCR analýzy 2,4 x 106 kopií / ml, pak by měl být tento parametr rozdělen do 4 a dostaneme 6 x 105 IU / ml.
Zatížení 800 000 IU / ml se považuje za vysoké, což zhruba odpovídá 3 000 000 kopií / ml. Nízká virémie, podle některých autorů, odpovídá parametrům kvantitativní PCR pod 400 000 IU / ml.
Výsledkem kvantitativního testu je, že konečné výsledky mohou být dodány nikoli ve formě digitální hodnoty, ale: „pod měřicím rozsahem“ nebo „nezjisteno“.
- Posouzení: "pod měřicím rozsahem." To ukazuje, že kvantitativní test nedokázal detekovat virovou RNA hepatitidy C, ale virus je přítomen v těle ve velmi nízkých koncentracích. Důkazem toho je dodatečný test kvality, který potvrzuje přítomnost viru.
- Hodnocení: nedetekováno. Tento výsledek ukazuje, že kvantitativní test nebyl nalezen ve vzorku RNA viru.
Parametr virové zátěže v první řadě určuje stupeň infekčnosti onemocnění, úroveň „infekčnosti“ pacienta. Čím vyšší je koncentrace viru u pacienta, tím větší je pravděpodobnost jeho přenosu na jiné osoby. Například při pohlavním styku s nemocnou osobou nebo vertikálně. Tento kvantitativní ukazatel také pomáhá určit účinnost léčby pacienta.
Provedení kvantitativní analýzy CCP je důležité pro antivirovou terapii, její úspěšnost a plánování trvání kurzu. S rychlou reakcí těla na léčbu a nízkým stupněm virémie může být doba léčby snížena.
Pokud se kvantitativní parametr PCR pomalu snižuje, antivirová terapie by měla být rozšířena nebo upravena. Pokud je hladina virové zátěže nízká, pak je to příznivý faktor v terapii, je-li zvýšená, pak je použitá metoda neúčinná a léky nebo metody jejich použití by měly být změněny.
Kvalitativní a kvantitativní analýza PCR pro hepatitidu C: negativní, pozitivní, transkript
Hepatitida C je virové onemocnění jater způsobené flavivirem HCV (z anglického viru hepatitidy C), jehož struktura obsahuje molekulu ribonukleové kyseliny (RNA). RNA nese genetický kód viru. Jeho přítomnost umožňuje analýzu PCR pro hepatitidu C.
Nebezpečí HCV pro člověka spočívá v tom, že tzv. Sérologické okno (doba mezi infekcí a vznikem reakce imunitního systému) může být poměrně dlouhé - od několika týdnů do šesti měsíců.
Nezjistí infekci a zahájí léčbu včas.
V závislosti na individuálních vlastnostech organismu se nosič HCV může projevit v akutní formě, stejně tak jako chronické onemocnění, které bude vyžadovat dlouhou a nákladnou léčbu. Při detekci protilátek proti HCV se provádí série laboratorních testů, včetně PCR pro hepatitidu C. Tento test se provádí u všech osob, u kterých byly zjištěny protilátky proti HCV v krvi.
Co je to PCR analýza?
Laboratorní analýza PCR pro hepatitidu C - studie biologického materiálu pro identifikaci přítomnosti flavavirů.
Polymerázová řetězová reakce (jako zkratka znamená) ukazuje kvantitativní hodnotu poškození těla virem, jeho kvalitativní charakteristiky, jakož i genotyp viru obsahujícího RNA.
Na jejich základě, stejně jako na základě dalších analýz, je stanovena metoda a doba trvání léčby, jakož i epidemiologický faktor (stupeň rizika přenosu na jiného nosiče).
Co je analýza RNA hepatitidy C?
PCR hepatitidy C se také nazývá analýza RNA (HCV RNA), protože Flavavirus obsahuje RNA částici s velikostí virionu 30-60 nm. Jednou z vlastností tohoto mikroorganismu je vysoká náchylnost k mutacím.
Každý z poddruhů (genotypů) viru má odlišnou rezistenci, což způsobuje různé metody léčby a povahu další prognózy pro pacienta.
Biologický materiál (žilní krev) se podává na prázdný žaludek a zpravidla se testuje metodou Real-Time PCR (vysoce citlivá diagnostika v reálném čase s nižším detekčním limitem 15 IU / ml pomocí uzavřených automatizovaných systémů).
Existují i další testy, například COBAS AMPLICOR s citlivostí 50-100 IU / ml. Pro každý laboratorní test je důležitý práh citlivosti, tj. schopnost činidla detekovat minimální koncentraci viru v biologickém materiálu.
Typy analýzy hepatitidy C pomocí PCR
PCR hepatitidy C zahrnuje tři důležité složky:
- kvalitativní analýza;
- kvantitativní analýza;
- genotypování.
Tyto testy mohou určit povahu virémie, stejně jako genetické rysy patogenu. V závislosti na citlivosti diagnostického systému se studie provádí jednou a někdy se provede druhý test s citlivějším činidlem pro potvrzení nebo zpřesnění výsledků.
Vysoce kvalitní PCR hepatitida C
Kvalitativní analýza PCR hepatitidy C je dalším běžným názvem pro analýzu polymerázové řetězové reakce. Standardní citlivost testu, která umožňuje detekci přítomnosti virových lézí, je v rozmezí 10-500 IU / ml.
Negativní analýza PCR pro hepatitidu C ukazuje, že koncentrace viru v krvi pacienta je pod prahem citlivosti diagnostického systému.
Pokud vysoce kvalitní PCR dala odpověď "nedetekována", pak je pro následnou léčbu důležité zjistit práh citlivosti činidla.
Proteinové frakce na flavavirus se objevují mnohem později.
Hepatitida C Kvantitativní PCR
Množství kvantitativní hepatitidy C PCR je indikátorem virové zátěže, která odráží úroveň koncentrace flavavirus RNA v těle. Jedná se o ukazatel, který ukazuje, kolik fragmentů virové RNA je obsaženo na jeden centimetr krve. Výsledky PCR RNA hepatitidy C v kvantitativním testu v konvenčním systému jsou uvedeny v mezinárodních jednotkách na mililitr (IU / ml) a mohou být zaznamenány různými způsoby, například 1,7 milionu nebo 1,700 000 IU / ml.
Kvantitativní PCR diagnostika hepatitidy C je předepisována pacientům před zahájením antivirové terapie a ve 12. týdnu léčby za účelem vyhodnocení výsledků zvolené metody léčby HCV. Virová zátěž umožňuje určit tři důležité ukazatele onemocnění:
- infekčnost, tj. stupeň rizika přenosu viru z jednoho nosiče na druhého (čím vyšší je koncentrace flavavirové RNA, tím vyšší je pravděpodobnost infikování jiné osoby, například pohlavním stykem);
- způsob a účinnost léčby;
- trvání a prognóza antivirové terapie (čím vyšší je virová zátěž, tím déle trvá léčba).
Kvantitativní PCR diagnostika hepatitidy C závisí na typu laboratorního testu a prahu jeho citlivosti. Dolní hranice normy je považována za ukazatel až 600 000 IU / ml, průměrná hodnota je 600 000-700 000 IU / ml. Výsledky 800 000 IU / ml a výše jsou považovány za vysoké hladiny viru obsahujícího RNA.
Genotypizace
Vzhledem k vysoké mutační aktivitě HCV v přírodě je při testování důležité zjistit, který genotyp viru je v krvi pacienta. Celkem bylo na planetě zaznamenáno 11 genotypů viru hepatitidy C, které zahrnují mnoho poddruhů (subtypů). Na území Ruské federace rozdělil 1,2 a 3.
Hepatitida C PCR RNA spolu s genotypizací je velmi důležitou složkou analýzy umožňuje lékaři určit rezistenci (rezistenci) viru, vybrat vhodné léky a předepsat průběh léčby.
Genotypování také umožňuje nepřímé stanovení stavu jater. Například 3 genotyp HCV je často doprovázen steatózou, ve které se tuk hromadí v buňkách orgánu.
Krevní test na PCR pro hepatitidu C by měl vytvořit číslo, které určuje genotyp. Laboratorní odezvy mohou říci „nezadané“ - to znamená, že virus je v lidské krvi, který není detekován testovacím systémem. To může znamenat, že genotyp není pro danou zeměpisnou oblast typický. V tomto případě je nutné provést opakovanou analýzu s vyšší citlivostí diagnostického systému.
Dekódování PCR analýzy pro hepatitidu C
Test kvantitativní dešifrování PCR hepatitidy C může být založen na výše uvedených údajích. Při získávání výsledků laboratorních testů se obvykle zapisují následující údaje:
- „Nalezeno“ / „nenalezeno“ (vysoce kvalitní PCR pro hepatitidu C);
- počet frakcí obsahujících RNA, například 831,680 ME / ml (kvantitativní analýza PCR);
- číslo, které určuje genotyp HCV, například - 1, 2, 3, 4;
- Název testu je nejčastěji v reálném čase.
Nejdůležitější věcí při dešifrování PCR analýzy hepatitidy C je druhá položka, která ukazuje virovou zátěž, která určuje prognózu, způsob a trvání léčby.
Pokud je PCR test na hepatitidu C negativní a ELISA je pozitivní - co to znamená?
Pro dešifrování laboratorních testů je důležité kontaktovat hepatologa nebo specialistu na infekční onemocnění, který vysvětlí informace získané v souladu s typem diagnostického systému a jeho prahem citlivosti. V lékařské praxi existuje mnoho údajů o krevních testech, které mohou zavádět osobu bez lékařského vzdělání.
Pokud je například test na PCR hepatitidy C negativní a test ELISA je pozitivní, může to znamenat, že v současné době není v krvi pacienta žádný HCV, ale dříve trpěl akutní formou hepatitidy C. existují protilátky v krvi, které byly vyrobeny po invazi viru v minulosti. V moderní lékařské praxi je však analýza ELISA považována za nedostatečně spolehlivou a často dává netypické výsledky, takže ji lékaři používají jako primární screening. Při diagnostice onemocnění se odborníci řídí přesně PCR testy.
Užitečné video
Následující video vypráví velmi podrobným a zajímavým způsobem, co je podstatou metody PCR, jak je analýza prováděna:
Závěr
Pro analýzu PCR hepatitidy C se obvykle užívá žilní krev. Nejčastěji dochází k dvojímu příjmu biologického materiálu - pro test ELISA a přímo pro test PCR. Pro správné výsledky testů je nutný soulad se základními pravidly pro laboratorní sběr biologického materiálu:
- krev pro analýzu se podává v první polovině dne na lačný žaludek;
- mezi jídlem a odběrem krve by mělo trvat nejméně 8 hodin;
- Alkohol a smažené potraviny by měly být vyloučeny ještě před zahájením testu.
- během dne před dárcovstvím krve je nutné se vyvarovat vysoké fyzické námahy.
Výsledky krevních testů jsou obvykle připraveny následující den.