Veterinární technika

Počet leukocytů
Výpočet vzorce leukocytů se provádí za použití systému imerzního mikroskopu. Vzhledem k tomu, že v nátěru jsou různé typy leukocytů nerovnoměrně rozděleny (monocyty a neutrofily - zejména podél horního a dolního podélného okraje léčiva a lymfocyty - blíže k jeho středu), počet leukocytů se vypočítá podle následujících pokynů. Pod malým zvětšením mikroskopu najděte okraj krevního nátěru poblíž výsledného kartáče. Na podélném okraji nátěru se nanese kapka imerzního oleje a pak se léková rovina zaostří a pozoruje do okuláru 2 - 3 zorné pole směrem ke středu nátěru. Pak pokračujte v propagaci léku ve stejném směru pro další 3-5 zorné pole, v každém z nich, počítáním dostupných leukocytů. Poté následuje stěr na 3 - 5 zorných polích podél podélné hrany, změna směru pohybu zdvihu v pravém úhlu, návrat k okraji zdvihu, posunutí zdvihu o další 3-5 zorných polí a tak dále. Cik-cak čára, na které je krevní nátěr pokročil, se nazývá Meanderova linie.
___ ___
| ___ | | ___ |

Počítání pokračuje, dokud se nepočítá 50% buněk. Pak pokračuje počítání na opačné straně nátěru. Jak je popsáno výše, při postupném stěrku se počítají všechny bílé krvinky nacházející se ve zorném poli. Počítání je dokončeno, když je součet bílých krvinek 100. V jiném přípravku pacienta se počítá dalších 100 leukocytů. Registrace bílých krvinek ve výpočtu se provádí za použití čítače 11 klíčů SL-1 a celkové množství a množství každého typu bílých krvinek se získá v procentech. V případě neexistence přepážky se registrace provede zápisem na list papíru. Svisle zaznamenejte počáteční písmena jmen leukocytů metamyelocytů (mtmts.), Band (p.), Segmentovaných (c), eosinofilních (e.), Basofilních granulocytů (b.), Lymfocytů (lymfy), monocytů (msp.), Plazmy buňky (pl.).
Procento různých typů leukocytů neodráží jejich skutečné číslo v 1 l krve, proto se vypočítá absolutní obsah leukocytů v 1 l krve. K tomu je třeba znát počet leukocytonů v 1 litru krve, procento jejich jednotlivých druhů, vypočtené v barveném přípravku.
Na začátku
Ukazatele leykoformuly zdravá zvířata

Průvodce praktickým výcvikem o metodách klinického klinického laboratorního výzkumu: Proc. Manuál -4th ed., Pererab. A další.-W. Ronin, G.M. Starobinets. -M.: Medicína, 1989.-320s.

Krevní obraz leukocytů

Procenta určitého typu leukocytů se změní se zvýšením nebo snížením obsahu jiných druhů. Při dešifrování vzorce leukocytů je třeba vzít v úvahu absolutní počet leukocytů.

5 hlavních typů leukocytů

Poměr pěti hlavních typů leukocytů se odráží ve vzorci leukocytů:

Leukocytární vzorec dospělého zdravého člověka (norma):

Odchylky od normy ve vzorci leukocytů se obvykle označují následujícími výrazy:

• se zvýšením hladiny specifického typu leukocytu se k jeho názvu přidají konce „oz“ („ez“) nebo „ia“. Například lymfocytóza, eosinofilie, monocytóza atd.
• s poklesem úrovně, konec “zpěvu” je přidán k názvu leukocytes. Například lymfopenie, neutropenie, eosinopenie atd.

Použijte také pojmy posunu vlevo a vpravo leukogram:

• Posun doleva od leukogramu ukazuje zvýšení počtu nezralých (bodných) neutrofilů, stejně jako výskyt metamyelocytů (mladých) a myelocytů.
• Posun k pravému leukogramu ukazuje pokles normálního počtu bodových neutrofilů, zvýšení počtu segmentovaných neutrofilů s hypersegmentovanými jádry.

Příklady řešení problémů na téma "leukocytární vzorec"

x (eosinofily) = N (eosinofily) • 100 / N (leukocyty)%

x (bazofily) = N (bazofily) • 100 / N (leukocyty)%

x (neutrofily) = N (neutrofily) • 100 / N (leukocyty)%

x (lymfocyty) = N (lymfocyty) • 100 / N (leukocyty)%

x (monocyty) = N (monocyty) • 100 / N (leukocyty)%

2) Zvýšení počtu bazofilů a zejména eozinofilů ukazuje na možnost parazitární infekce nebo alergického onemocnění. S ohledem na výsledky analýzy as ohledem na pacientovy stížnosti lze předpokládat vývoj bronchiálního astmatu.

Výpočet vzorce leukocytů

Počet leukocytů - 12,4 x 10 9 na 1 litr (12,4 g / l)

neutrofily: myelocyty - 0%

Polychromatofilie erytrocytů, jednotlivé normoblasty.

Na základě dostupných údajů docházíme k závěru:

Hypochromní anémie (počet hemoglobinu a počet červených krvinek se sníží, barevný index je 0,6); regenerativní (značená retikulocytóza, polychromatofilie erytrocytů a normoblastóza); normoblast; normocytární.

Změny v myeloidním výhonku jsou charakterizovány neutrofilní leukocytózou (absolutní neutrofilie) a regeneračním posunem neutrofilů doleva (absolutní a relativní četnost adolescentních a bandariálních neutrofilů je zvýšena).

Absolutní a relativní obsah bazofilů, eosinofilů a monocytů v normálním rozmezí; relativní lymfopenie je kombinována s normálním obsahem absolutních lymfocytů.

Anémie byla tedy detekována se známkami regenerace červené krve, neutrofilní leukocytózou, která je pravděpodobně projevem ochranné restorativní reakce hematopoetického systému. Funkční aktivita hematopoézy kostní dřeně se zvyšuje.

Jako jeden z příkladů patologie, ve kterém je takový krevní obraz možný, lze pojmenovat stav po akutní ztrátě krve ve fázi zvýšené hematopoézy kostní dřeně (krize retikulocytů), proto je v tomto případě anemie posthemoragická, akutní hematopoetická hemopoéza.

Poznámky laboratoř. Leukocytární vzorec

Informace o tom, co je leukocytární krevní vzorec, oplývají. Existují charakteristiky jednotlivých zástupců a jejich funkce, příklady v číslech normy a patologie. Chci mluvit o tom, jak příběh začíná, co se stane, než se čísla objeví v procentech (a v absolutních číslech) na formuláři.

Na sklíčku se nanese malá kapka krve s druhým sklem (s leštěným okrajem, aby nedošlo k poranění buněk) tak, že se získá „kartáč“ z jedné hrany - nejtenčí vrstva nátěru, kde se vypočítá stejný „vzorec“.

Poté, co krev vyschne, začíná proces barvení (má jméno podle autora, ale metody barvení léků (nejen krev, ale také močový sediment, sputum a spoustu věcí). Je třeba zdůraznit buněčné struktury nebo dokonce mikroby. Krevní preparáty pro výpočet vzorce jsou obarveny barvivy, z nichž jedno je dostatečně koncentrované, proto se ředí destilovanou vodou (a ne vodou z vodovodu, protože ve vodě z vodovodu má alkalické pH s ním abso buněk yutno ne přemalovat - zachytil na tomto perspektivních techniků).

V laboratoři se zpravidla všechna činidla ředí destilovanou vodou (doporučuje se mírně alkalizovat, protože D-voda má slabě kyselou reakci a pro barvení krevních produktů potřebujeme vodu s neutrálním médiem) zcela bez příměsí rozpuštěných látek a stopových prvků - čistota na ní závisí. a některá zařízení (analyzátory) obecně mohou selhat na vodovodní vodě.

Tam jsou super-moderní zařízení pro práci s analyzátory krve, ve kterém proces vzhledu leukoformuly je plně robotizovaný, osoba prostě stojí poblíž a následuje tento proces zvenčí. Srovnal bych to s dortem pečeným v rukou muže doma a koupil v obchodě :). Například láhev s barvou může mít nedokonalou intenzitu barviva v různých šaržích nebo od různých výrobců a osoba s ruční prací snadno dosáhne optimální doby barvení a bude prožívat poměr vody a barvy D-vody. Laboratorní asistent (častěji lékařský asistent laborantka) namaluje šmouhy budoucího Pappenheimova vzorce a má zájem, aby všechny buněčné struktury byly dokonale zbarveny, protože tyto „krajiny“ v mikroskopu mu později také vypadají a občas ukazují kolegům z jiných (lepších než referenčních) laboratoří, pokud něco pochybuje.

Hodnota vzorce leukocytů je velmi velká, a to nejen v hematologické patologii. Ačkoli 95% šmouh bude obyčejných a srozumitelných, ale zbývajících 5% může přinejmenším překvapit! Jak se říká, oh, těch 5%!

Po zbarvení se sklenice zcela vysuší, na plochu „štětce“ se nanese kapka imerzního oleje a člověk může obdivovat zvětšenou osobu 1000 krát! (Je-li to žádoucí, změňte okulár a 1500 krát!) Mimochodem, celkový nárůst mikroskopu je výsledkem zvýšení čočky pro zvýšení okuláru. Mikroskopy, které jsou připojeny k monitoru, mohou „ukázat“ těm, kteří kolem sebe vidí, co laboratorní technik vidí pro svátost. Můžete také fotografovat jednotlivá pole pohledu kliknutím myši. Myslím si, že je to logické v těch laboratořích, kde je příležitost pořídit si fotografii mikroskopie, připojit fotografie patologických buněk k formě - to poskytne další rady ošetřujícímu lékaři. Má smysl držet se v takových fotografiích a v historii nemoci, jako jsou rentgenové snímky. Toto i z hlediska pojišťovací medicíny má své výhody.

Lékař počítá a „třídí“ všechny leukocyty v zorném poli pomocí počtu leukocytů. Obvykle se počítá 100 leukocytů. S komplexními patologiemi je však možné spočítat jak 200, tak 400 buněk, aby bylo možné odvodit velmi přesné číslo. Hemanalyzéry počítají mnohonásobně více leukocytů, ale bezdušový přístroj bere v úvahu pouze velikost buněk, přítomnost jader a ne morfologii (strukturu a vzhled). Nejjednodušší příklad: nerozlišuje lymfocyt od normocytů (erytrocyt s jádrem).

Ve středu - normocyte.

Normcyt (v 9 hodin) a lymfocyt (ve 3 hodiny) pro srovnání. Ve 12 hodin - segmentovaný neutrofil.

Ale je to taková závažná patologie, že vám mohu pouze poradit, abyste hledali laboratoř, kde se kromě výsledku hemaanalyzeru provádí ruční výpočet vzorce.

Další příklad „slabého spojení“ hemanalyzátorů: počítání počtu krevních destiček, které „železný robot“ „vyčkával“ (počítá velké krevní destičky, mikrobunky, fragmenty červených krvinek a bílých krvinek). Nespolehlivý výsledek KLA v hemianisareru může být s přebytkem eosinofilů, přítomností blastů, virocytů... Co můžeme říci o parazitech malárie v erytrocytech (ale toto je úplně samostatný příběh). A čím jednodušší je přístroj, tím důležitější je dostupnost laboratorních lékařů, které se bohužel snaží ušetřit mnoho laboratoří.

Mimochodem, v hemosanalyzátorech je takový indikátor jako ICSU (častěji se používá jako indikátor chyby), - z něj můžete posoudit, jak je přístroj kalibrován. Pokud překročí 38 g / dl, pak byste neměli důvěřovat takové analýze, lépe retake krev v jiné laboratoři.

Hemanalyzer produkuje mnoho, mnoho parametrů (obvykle 20–31), ale zpravidla v 80% případů v pediatrii je pro lékaře dostačující tzv. „Troechki“ (hemoglobin, leukocyty, ESR) s leukoformulou, pokud máte také CRP. O zbytek se zajímají hematologové.

Chtěl bych upozornit čtenáře na skutečnost, že pokud je v KLA nízký hemoglobin (což bylo několikrát potvrzeno), neznamená to vůbec, že ​​by se ukázaly přípravky železa. Nejprve musíte projít testem na "sérové ​​železo" (můžete s transferinem a OZHSS v jednom pádu, pokud to finanční prostředky dovolí), vyloučit jiné typy anémie (i když jsou velmi vzácné) a pak (pokud je potvrzena anémie z nedostatku železa) - "žvýkat na železo". Proč hlodáš? Protože železo musí: 1) být v perorální formě, 2) být sulfát (a nikoli fumarát, glukonát, hydrochlorid nebo jednoduše chlorid), 3) být dvojmocné (a nikoli trojmocné). No, pokud se přidá k léku vitamin C (ke zlepšení absorpce). Zajímavé je, co si mysleli výrobci léků obsahujících železo, jejichž složení je úplným opakem těchto vlastností. Tak co? Duch rozporů? Navíc takovéto zbytečné drogy, které lékaři předepisují dodnes.

Při pohledu skrz leukoformu lékař dodatečně kontroluje hemoglobin, počet leukocytů, hodnotí "červenou krev" - všechny údaje, které jsou již ve formě, protože elementární během vzorkování krve, sestra mohla dostat rozptýlenou a, omluvte mě, dal někoho jiného číslo na zkumavce (nikdo zrušil lidský faktor).

Na levé straně - vzorec, vyrobený přímo "od muže", okamžitě na sklo. Vpravo je vzorec vyrobený z EDTA zkumavky.

No, ve vzorci, který byl vyroben z krve, která byla v zkumavce s antikoagulantem (sotva znatelný postřik bílého prášku na stěnách uvnitř zkumavky - soli EDTA), spočítejte krevní destičky (aby zkontrolovaly, co hemanalyzer rozdával), nefunguje dobře a leukocyty s erytrocyty speciální "krása a fotogenicity" se neliší. Proto se domnívám, že UAC, vyrobený manuálními technikami, je nesrovnatelně lepší.

Co je to leukocytární vzorec a jak se vypočítá

Jednou ze složek krevního testu je leukocytární vzorec. Lékaři doporučují jeho definici pro jakoukoliv patologii, protože je citlivá na mnoho patologií. V článku budeme analyzovat všechny možné změny v počtu leukocytů a co znamenají.

Typy bílých krvinek

Kompletní krevní obraz se skládá z několika ukazatelů. Všechny se odrážejí ve vlastních jednotkách měření se symboly v latinských písmenech.

Proto, když obdržíte krevní test (leukogram) na rukou, dešifrování hodnot je užitečné pro každou osobu:

Samostatně zaznamenaný vzorec leukocytů. Odráží poměr počtu bílých krvinek k sobě. To je důležité pro klinickou diagnózu, protože všechny leukocyty nejsou stejné.

Existuje několik druhů, které se liší ve svých funkcích v lidském těle:

Neutrofily

Jedna z nejvšestrannějších buněk. Aktivován jakýmkoliv zánětem, ať bakteriálním nebo virovým. Neutrofily zničí jakékoliv cizí tělesné látky a zdůrazní chemické složky, které přitahují další buňky zánětu. Proto je jakákoliv zánětlivá reakce v podstatě spouštěna neutrofily.

Neutrofilní buňky jsou také rozděleny podle stupně zralosti:

• Myelocyty a metamyelocyty jsou velmi mladé, mladé buňky, které neplní žádné funkce. Zdravý člověk je nemá v krvi.
• Stab buňky - dozrávající buňky, které se vždy nacházejí v krvi. Jejich počet se dramaticky zvyšuje během nástupu infekce.
• Segmentální - nejzralejší, zralé buňky. Plní všechny funkce ochrany těla, které je vlastní neutrofilům. Segmentální neutrofily jsou nejnovějším stadiem vývoje myelocytů.

Lymfocyty

Jedná se o buňky, které provádějí druhou fázi imunitní reakce. Přicházejí na místo zánětu, reagují na chemikálie vylučované neutrofily.

Lymfocyty vylučují několik typů:

• B-lymfocyty - vytvářejí protilátky proti virovým a bakteriálním infekcím.
• Pomocníci a zabijáci T-lymfocytů - začínají pracovat s B-lymfocyty a nezávisle zničí virové buňky.
• Přirození zabijáci jsou schopni zabít buňky, které infikovaly virus nebo které prošly změnou nádoru.

Monocyty

Podobná funkce jako neutrofily. Hlavní činností monocytů je zničit cizí materiál. Své úkoly plní pomocí fagocytózy.

Jedná se o proces absorpce monocytů bakterií, virů nebo jiných patogenů. Uvnitř buňky tento prvek umírá a dává monocytům informace o jeho struktuře. V budoucnu pomůže B-lymfocytům vyvinout protilátky proti tomuto patogenu.

Eosinofily a bazofily

Jedná se o buňky zapojené do alergických reakcí. Jejich počet se dramaticky zvyšuje, pokud se u člověka vyvine alergie na jakoukoliv látku.

Je to díky chemickým prvkům, které uvolňují eosinofily, že člověk vyvíjí příznaky akutní alergické reakce:

• Obličej se zvětší;
• Tam je kašel nebo rýma;
• Zčervenání kůže;
• Tam je vyrážka.

Kromě alergií reagují eozinofily na parazity. Bylo prokázáno, že počet eosinofilů se zvyšuje, pokud je v těle parazitární infekce, jako je Giardia nebo opisthorchiasis. To je způsobeno reakcí eosinofilů na parazitární antigeny, které vstupují do krve.

Funkce leukocytů

Leykoformula ne pro nic se skládá z několika složek. Každá z těchto buněk je důležitá pro poskytnutí zdravé imunity. Všechno to začíná vniknutím bakterií nebo viru do lidského těla. Patogenní mikrob je absorbován neutrofilem, který provádí jeho trávení - fagocytózu.

Po fagocytóze si neutrofil zachovává mikrobiální částici, což ukazuje na lymfocyty. T-lymfocyty a B-lymfocyty společně organizují napadení patogenem. B lymfocyty tvoří množství protilátek, které jsou ideální pro tuto bakterii. Pouze takové společné akce poskytují imunitní reakci během jakékoli infekce. Proto je poměr leukogramových buněk tak důležitý.

Normální hodnoty leukogramu

V každé laboratoři mohou být normální hodnoty v závislosti na technologii a činidle používaném technikem. Analýza v dynamickém pozorování by proto měla být prováděna v jedné laboratoři. To zachová správné hodnoty a jasně sleduje dynamiku.

Existují však zprůměrovaná kritéria, která lze použít, pokud laboratoř neposkytla svá data.

Míra počtu buněk silně závisí na pohlaví a věku osoby.

Jak je analýza

Krev pro stanovení počtu leukocytů lze provést dvěma způsoby:

• Kapilára - z prstu.
• Venózní - z periferní žíly.

Ukazatele analýzy provedené různými způsoby se mohou lišit i od jedné osoby. Tyto změny však obvykle nepřesahují běžné hodnoty. Jako způsob počítání byl vždy použit krevní mikroskopický test. Provádí jej laboratorní technik, počítá počet buněk v zorných polích pod mikroskopem.

Výpočet se provádí na 100 buňkách, takže konečný výsledek je vhodný pro stanovení procenta. Před počítáním neutrofilů nebo jiných buněk je zorné pole mentálně rozděleno na 3 oblasti od jednoho okraje k druhému.

Dnes mnoho laboratoří používá automatický analyzátor. Toto je přístroj, který počítá všechny možné buňky, které splňuje.

Pokud používáte hematologický analyzátor, můžete v krátké době zobrazit více buněk. V kontroverzních případech se však upřednostňuje sledování pod mikroskopem laboratorním technikem. Osoba může identifikovat menší rozdíly ve vzhledu buněk, které mohou hovořit o patologii.

Proč určovat leykoformulyu

Velký počet indikátorů leykoformuly umožňuje reagovat na mnoho nemocí. Správně vypočítaná analýza zdraví a nemoci bude pro lékaře velkou pomocí.

Když lékař pošle k určení počtu leukocytů, má několik cílů:

• Pomoc při diagnostice;
• Stanovení závažnosti nebo aktivity procesu;
• Dynamika regenerace;
• Reakce nebo její nedostatek k lékům;
• Včasné odhalení komplikací.

Změny v počtu a poměru v leukogramu

Při výpočtu procenta neutrofilních buněk se zobrazuje poměr zralých a mladých forem leukocytů. To vám umožní pochopit stupeň ostrosti procesu a jeho závažnost.

S nárůstem počtu bodných a jaderných buněk v analýze hovoří o posunu vzorce leukocytů doleva, protože tyto buňky jsou umístěny vlevo ve formě. To hovoří o aktivní imunitní reakci. V některých případech může výskyt nejzralejších buněk v periferní krvi hovořit o onkologickém onemocnění.

Tabulka poměru forem neutrofilů v procentech z celkového počtu bílých krvinek.

V sporných případech nebo při provádění klinických studií lze použít definici indexu intoxikace leukocytů (LII). To je poměr nezralých forem neutrofilů, které se objevují při akutním zánětu k jiným buňkám - lymfocytům, monocytům, eosinofilům.

Indexové hodnoty jsou vypočteny na základě věku a pohlaví. Přibližné číslo indexu je 0,6.

Důvody pro zvýšení nebo snížení počtu leukocytů

K nárůstu počtu neutrofilů dochází, když:

• Bakteriální infekce - angina pectoris, pyelonefritida, pneumonie;
• Intoxikace jakékoliv povahy;
• Užívání glukokortikosteroidů - prednison;
• Onemocnění popálenin;
• Gangrene, srdeční infarkt.

Snížení počtu neutrofilů doprovází:

• Závažné bakteriální infekce - brucelóza, tuberkulóza;
• Virové infekce - spalničky, zarděnka;
• Vliv toxinů na kostní dřeň;
• Radiační nemoc;
• Autoimunitní onemocnění.

Hlavním důvodem změny počtu lymfocytů je jiný druh infekce. B-lymfocyty zrají v kostní dřeni a T-lymfocyty v brzlíku. Toto rozlišení zdůrazňuje, že jejich funkce se liší. Ale v analýzách nezáleží na tom, která frakce je zvýšena. Laboratoř zkoumá celkový počet lymfocytů.

Lymfocytóza nebo zvýšený počet lymfocytů nastává, když:

• Chronické bakteriální infekce - tuberkulóza, syfilis, brucelóza;
• Akutní virová onemocnění - chřipka, plané neštovice, spalničky;
• Nádory krevního systému - lymfomy;
• Hormonální dysfunkce - hypotyreóza;
• Anémie makrocytů - nedostatek folikulu;
• Autoimunitní patologie - systémový lupus erythematosus.

Snížený počet lymfocytů nebo lymfocytózy doprovází:

• Primární imunodeficience - syndrom Di Georgie;
• Sekundární imunodeficience - infekce HIV;
• Užívání glukokortikosteroidů - prednison;
• Akutní bakteriální infekce - streptokoková pneumonie;
• Toxické účinky na kostní dřeň - záření, těžké kovy.

Monocyty nemají téměř žádnou klinickou hodnotu, pokud jsou zvažovány individuálně. Jejich změny jsou proto obvykle vyhodnoceny v kombinaci s jinými ukazateli leukocytů.

Monocyty obvykle stoupají, když:

• Bakteriální infekce;
• Parazitní invaze;
• Nádory krevního systému.

Snížení počtu monocytů se prakticky nepozoruje bez celkové leukocytopenie. Proto nemá žádnou diagnostickou hodnotu. Za zmínku stojí i infekční mononukleóza. Jedná se o virovou infekci, jejíž hlavním kritériem je detekce mononukleárů v krvi.

Jedná se o buňky, které vypadají jako monocyty, ale jsou patologické. U zdravého člověka je detekce mononukleárů v krvi nepřijatelná.

Eosinofily a bazofily jsou kritériem alergických reakcí a některých infekčních onemocnění. Odhad jejich počtu také silně závisí na celkovém počtu leukocytů v krevním testu.

K nejčastějšímu zvýšení počtu eosinofilů dochází, když:

• Eozinofilní granulom;
• Eozinofilní leukémie;
• Parazitní invaze;
• Šarlatová horečka;
• Alergické reakce;
• Chronická dermatóza: lupénka, ekzém.

Nízké eosinofily doprovázejí:

• Užívání kortikosteroidů;
• Některé závažné infekce, jako je tyfus.

Co může říct leukocytární krevní obraz?

Krevní parametry charakterizují stav lidského zdraví a mohou značně usnadnit diagnózu. Díky definici vzorce leukocytů můžeme předpokládat typ onemocnění, posuzovat jeho průběh, přítomnost komplikací a dokonce předpovídat jeho výsledek. A pochopení změn v těle pomůže dešifrovat leukogramy.

Co ukazuje krevní obraz leukocytů?

Vzorec pro krevní leukocyty je poměr různých typů bílých krvinek, obvykle vyjádřený jako procento. Studie se provádí jako součást celkového krevního testu.

Bílé krvinky se nazývají bílé krvinky, které představují imunitní systém těla. Jejich hlavní funkce jsou:

• ochrana před mikroorganismy, které mohou způsobit zdravotní problémy;
• účast na procesech, které se vyskytují v těle, když jsou vystaveny různým patogenním faktorům a způsobují narušení normálního života (různá onemocnění, účinky škodlivých látek, stres).

Rozlišují se tyto typy leukocytů:

1. Eosinofily. Manifest u alergických, parazitárních, infekčních, autoimunitních a onkologických onemocnění.
2. Neutrofily. Chraňte před infekcemi, které jsou schopny zničit viry a bakterie. Zařazeno do:
   • myelocyty (vznikající) a metamyelocyty (mladé - odvozené z myelocytů) chybí v krvi zdravého člověka, jsou tvořeny pouze v extrémních případech, s nejzávažnějšími onemocněními;
   • choke-coder (young) - jejich počet se zvyšuje s bakteriálními chorobami, pokud se segmentované neutrofily nedokáží vyrovnat s infekcí;
   • segmentovaný (zralý) - reprezentovaný v největším počtu, poskytuje imunitní obranu těla ve zdravém stavu.
3. Lymfocyty. Jsou to zvláštní čističe: jsou schopny detekovat, rozpoznávat a ničit antigeny a také se podílet na syntéze protilátek (sloučeniny schopné stimulovat lymfoidní buňky, tvořit a regulovat imunitní reakci těla), poskytovat imunitní paměť.
4. Monocyty. Jejich hlavním úkolem je absorbovat a trávit mrtvé (odumírání nebo zbytky zničených) buněk, bakterií a jiných cizích částic.
5. Basofily. Funkce těchto buněk nejsou zcela objasněny. Je známo, že se účastní alergických reakcí, v procesech srážení krve, jsou aktivovány během zánětu.

Plazmatické buňky (plazmatické buňky) se podílejí na tvorbě protilátek a jsou obvykle přítomny ve velmi nízkém množství pouze v krvi dětí, u dospělých jsou nepřítomné a mohou se objevit pouze v případě patologií.

Studium kvalitativních a kvantitativních charakteristik leukocytů může pomoci při stanovení diagnózy, stejně jako u všech změn v těle se procento některých typů krevních buněk zvyšuje nebo snižuje v důsledku zvýšení nebo poklesu v některých stupních jiných.

Lékař tento test předepíše:

• získat představu o závažnosti stavu pacienta, posoudit průběh onemocnění nebo patologický proces, dozvědět se o přítomnosti komplikací;
• stanovit příčinu choroby;
• vyhodnotit účinnost předepsané léčby;
• předvídat výsledek nemoci;
• v některých případech vyhodnotit klinickou diagnózu.

Technika vedení, počítání a dekódovací analýzy

Pro výpočet vzorce leukocytů s krevním nátěrem se provádějí určité manipulace, suší se, ošetřují se speciálními barvivy a vyšetřují se pod mikroskopem. Laboratorní asistent označí ty krevní buňky, které spadají do jeho zorného pole, a to až do doby, kdy je celkem 100 (někdy 200) buněk.

Distribuce leukocytů přes povrch stěr je nerovnoměrná: těžší (eozinofily, bazofily a monocyty) jsou umístěny blíže k okrajům a lehčí (lymfocyty) jsou blíže středu.

Při výpočtu lze použít 2 způsoby:

• Schillingova metoda. Spočívá ve stanovení počtu leukocytů ve čtyřech oblastech nátěru.
• Metoda Filipchenko. V tomto případě je zdvih mentálně rozdělen na 3 části a počítán v přímém příčném směru od jedné hrany k druhé.

Na listu papíru v odpovídajících sloupcích označte číslo. Poté se vypočítá každý typ počtu leukocytů - kolik buněk bylo nalezeno.

Je třeba mít na paměti, že počítání buněk v krevním nátěru při určování vzorce leukocytů je velmi nepřesnou metodou, protože existuje mnoho těžko odstranitelných faktorů, které zavádějí chybu: chyby při odběru krve, příprava a barvení stěrů, lidská subjektivita při interpretaci buněk. U některých typů buněk (monocytů, bazofilů, eozinofilů) se jedná o to, že jsou v nátěru nerovnoměrně rozloženy.

V případě potřeby se počítají indexy leukocytů, které představují poměr různých forem leukocytů obsažených v pacientově krvi a někdy se ve vzorci používá indikátor ESR (míra sedimentace erytrocytů).

Indexy leukocytů ukazují stupeň intoxikace a charakterizují stav adaptačního potenciálu organismu - schopnost přizpůsobit se účinkům toxických faktorů a vyrovnat se s nimi. Umožňují také:

Leukocytární vzorec

Leukocytární vzorec - indikátor, který zahrnuje definici pěti hlavních typů leukocytů (neutrofilů, eozinofilů, bazofilů, lymfocytů, monocytů), vykonávající různé funkce v těle a představující jejich procentuální poměr (vyjádřený v procentech a změny ve vzorci leukocytů jsou často nespecifické).

Metody stanovení:
• mikroskopii krevního nátěru laboratorním lékařem s počtem leukocytů na 100 buněk
• průtoková cytometrie s laserovou detekcí (automatický hematologický analyzátor) - automatický analyzátor poskytuje výsledky jako procento neutrofilů, lymfocytů, monocytů, eozinofilů (za přítomnosti abnormalit, krevní nátěr je vyšetřován pod mikroskopem hematologem s dodatečnou specifikací vzorce leukocytů a popisem morfologie buňka)

Výhody počítání leukocytového vzorce na hematologickém analyzátoru laboratorním lékařem:
• vysoká přesnost (analýza více než 2000 buněk; lékař analyzuje 100-200 buněk)
• objektivita
• vysoká reprodukovatelnost výsledků výzkumu díky analýze velkého počtu buněk, homogenitě studovaného materiálu, vyloučení subjektivního faktoru

Nevýhody počítání leukocytárního vzorce na hematologickém analyzátoru:
• automatický čítač nerozděluje subpopulaci neutrofilů na bodnou a segmentovanou, ale s velkým počtem mladých forem neutrofilů (bodnutí, juvenilní, myelocyty) vytváří zprávu „levého posunu“, která je povinným požadavkem pro výpočet vzorce leukocytů pod mikroskopem.

Účel studijního vzorce leukocytů:
• posoudit stav imunity
• diagnostika a diferenciální diagnostika leukémie
• určit stupeň a závažnost infekčního onemocnění
• diagnostika alergických reakcí a parazitárních invazí a posouzení jejich závažnosti (počet eozinofilů)
• diferenciální diagnostika virových a bakteriálních infekcí

. diagnostickou hodnotou vzorce leukocytů je, že poskytuje představu o závažnosti onemocnění a účinnosti léčby.

. leukocytární vzorec má věkové zvláštnosti, proto by jeho změny měly být hodnoceny z pozice věkové normy (to je důležité zejména při zkoumání dětí)

Při stanovení krevního vzorce se hodnotí poměr různých typů leukocytů a jejich morfologie; Tato studie poskytuje přesnější informace o imunitním systému pacienta než stanovení pouze počtu leukocytů. Celkem existuje 5 hlavních typů leukocytů - neutrofilů, eozinofilů, bazofilů, lymfocytů a monocytů. Při výpočtu krevního obrazu je stanoveno procento leukocytů každého typu. Vzorec pro krevní obraz odráží relativní množství každého typu leukocytů v krvi. Pro stanovení absolutního počtu leukocytů každého typu vynásobte jejich procento celkovým počtem leukocytů.

Zobecněné výsledky ukazatelů vzorce leukocytů u dospělých, které jsou nejblíže pozorování Hematologického výzkumného střediska Ruské akademie lékařských věd:
• bodné neutrofily 2-4% (0,080-0,350 x 109 / l)
• segmentované neutrofily 47 - 67% (2000 - 5 900 x 109 / l)
• eosinofily 0,5–5,0% (0,020– 0,440 x 109 / l)
• basofily 0 - 1% (0 - 0,088 x 109 / l)
• lymfocyty 25 - 35% (1 000 - 3 000 x 109 / l)
• monocyty 2 - 6% (0,080-0,530x 109 / l)

U dětí je počet neutrofilů poněkud nižší a lymfocyty a monocyty jsou vyšší než u dospělých. Navíc u dětí mladších 1 roku jsou v krvi detekovány mladší neurotrofilní buňky - metamyelocyty, které tvoří 4% u novorozenců a 0,5% u dětí od prvního měsíce života. U dětí mladších než 1 rok jsou v krvi přítomny plazmatické buňky vylučující imunoglobuliny v množství 0,5%.

. se změnami celkového počtu leukocytů může zaměření na procento buněk ve vzorci leukocytů vést k chybným závěrům; v takových případech se posouzení provádí na základě absolutního počtu každého typu buněk (B109 / l).

Informace o fyziologické úloze určitých typů leukocytů:
• neutrofily - hlavní funkce neutrofilů - pronikání tělesných tkání z krve a destrukce cizích patogenních mikroorganismů fagocytózou (záchvaty a trávení); v závislosti na stupni zralosti a tvaru jádra se periferní krev používá k přidělení bodných (mladších) a segmentovaných (zralých) neutrofilů; mladší neutrofilní buňky - mladí (metamyelocyty), myelocyty, promyelocyty - se vyskytují v periferní krvi v případě patologie a jsou důkazem stimulace tvorby buněk tohoto druhu.
• eosinofily - hlavní funkcí eosinofilů je chránit tělo proti invazi mikroorganismů větších než bakterie (na rozdíl od neutrofilů), například parazitických červů; eosinofily jsou přítomny v místě zánětu způsobeného a alergickými onemocněními
• bazofily - typ bílých krvinek zapojených do alergických reakcí; zvýšení počtu těchto buněk se vyskytuje u různých alergických reakcí, chronických a virových infekcí a spolu s eosinofilií může být známkou chronické myeloidní leukémie; obsahují biologicky aktivní látky, jako je heparin a histamin (podobně jako žírné buňky pojivové tkáně), basofilní leukocyty během degranulace iniciují rozvoj anafylaktické reakce přecitlivělosti s okamžitým typem
• lymfocyty - jsou hlavními buňkami imunitního systému pro tvorbu buněčné imunity; tvoří protilátky, které vážou cizí látky a vedou k destrukci buněk infikovaných mikroorganismy; jsou schopny "rozpoznat" a "zabít" rakovinné buňky; poskytnout získanou imunitu (opozice vůči onemocnění během sekundárního kontaktu s patogenem)
• monocyty - největší buňky mezi leukocyty, neobsahují granule; podílí se na tvorbě a regulaci imunitní reakce, plní funkci prezentace antigenu lymfocytům a je zdrojem biologicky aktivních látek, včetně regulačních cytokinů; mají schopnost lokální diferenciace - jsou prekurzory makrofágů (které se po odchodu z krevního oběhu proměňují) - makrofágy jsou schopny absorbovat až 100 mikrobů, zatímco neutrofily - pouze 20-30; objevují se v ohnisku zánětu po neutrofilech a vykazují maximální aktivitu v kyselém prostředí, ve kterém neutrofily ztrácejí svou aktivitu; ohnisko zánětu, makrofágy fagocytární mikroby, stejně jako mrtvé leukocyty, poškozené buňky zanícené tkáně, odstranění zánětu zánětu a jeho příprava k regeneraci (monocyty jsou lapači těla, absorbují mikroby a bakterie, stejně jako mrtvé leukocyty, poškozené buňky zanícené tkáně, očistí krbu zánět a připravit jej na regeneraci)

Změny v úrovni jednotlivých populací leukocytů:
• neutrofilie - zvýšení celkového počtu leukocytů v důsledku neutrofilů
• neutropenie - snížení obsahu neutrofilů
• lymfocytóza - zvýšení obsahu lymfocytů
• lymfopenie - snížení obsahu lymfocytů
• eosinofilie - zvýšení obsahu eosinofilů
• eosinopenie - snížení obsahu eosinofilů
• monocytóza - zvýšení obsahu monocytů
• monopenie (monocytopenie) - snížení obsahu monocytů

Změna počtu neutrofilů
zvýšení:
• infekce (způsobené bakteriemi, houbami, prvoky, rickettsií, některými viry, spirochétami)
• zánětlivé procesy (revmatismus, revmatoidní artritida, pankreatitida, dermatitida, peritonitida, tyreoiditida)
• stav po operaci
Ischemická nekróza tkáně (infarkty vnitřních orgánů - myokard, ledviny atd.)
• endogenní intoxikace (diabetes mellitus, urémie, eklampsie, nekróza hepatocytů)
• fyzický stres a emocionální stres a stresové situace: účinky tepla, chladu, bolesti, popálenin a porodu, během těhotenství, se strachem, hněvem, radostí
• onkologická onemocnění (tumory různých orgánů)
• užívání určitých léků, jako jsou kortikosteroidy, digitalis, heparin, acetylcholin
• otrava olovem, rtutí, ethylenglykolem, insekticidy
snížení:
• některé infekce způsobené bakteriemi (břišní tyfus a paratyfidní horečka, brucelóza), viry (chřipka, spalničky, plané neštovice, virová hepatitida, zarděnka), protozoa (malárie), rickettsiae (tyfus), dlouhodobé infekce u starších a oslabených osob
• onemocnění krevního systému (hypoplastická a aplastická, megaloblastická a anémie s nedostatkem železa, paroxysmální noční hemoglobinurie, akutní leukémie, hypersplenismus)
• vrozené neutropenie (dědičná agranulocytóza)
• anafylaktický šok
• tyreotoxikóza
• vystavení cytostatikům, protinádorovým léčivům
• léčebná neutropenie spojená se zvýšenou citlivostí jedinců na působení některých léků (nesteroidní protizánětlivé léky, antikonvulziva, antihistaminika, antibiotika, antivirotika, psychotropní léčiva, léky ovlivňující kardiovaskulární systém, diuretika, antidiabetika)

Změna počtu EOSINOPHIL s
zvýšení:
• alergická senzibilizace těla (astma astma, alergická rýma, pollinóza, atopická dermatitida, ekzém, eozinofilní granulomatózní vaskulitida, alergie na potraviny)
• alergie na léky (často u následujících léků - aspirin, aminofylin, prednison, karbamazepin, peniciliny, chloramfenikol, sulfonamidy, tetracykliny, léky proti tuberkulóze)
• kožní onemocnění (ekzém, dermatitis herpetiformis)
• parazitické - helmintické a protozoální invaze (giardiasis, echinokokóza, ascariasis, trichinóza, silyloidóza, opisthorchóza, toxokaróza atd.)
Akutní období infekčních onemocnění (šarlatová horečka, plané neštovice, tuberkulóza, infekční mononukleóza, kapavka)
Maligní nádory (zejména metastatické a nekróza)
• proliferativní onemocnění hematopoetického systému (lymfogranulomatóza, akutní a chronická leukémie, lymfom, polycytémie, myeloproliferativní onemocnění, stav po splenektomii, hypereosinofilní syndrom)
• zánětlivé procesy pojivové tkáně (periarteritis nodosa, revmatoidní artritida, systémová sklerodermie)
• plicní onemocnění - sarkoidóza, plicní eozinofilní pneumonie, histiocytóza z Langerhansových buněk, eosinofilní pleuróza, plicní eozinofilní infiltrace (Lefflerova choroba)
• infarkt myokardu (nežádoucí příznaky)
snížení:
• počáteční fáze zánětlivého procesu
• těžké hnisavé infekce
• šok, stres
• intoxikace různými chemickými sloučeninami, těžkými kovy.

Změna počtu BASOFILů
zvýšení:
• chronická myeloidní leukémie (eozinofilní-bazofilní asociace)
Myxedém (hypotyreóza)
• plané neštovice
• přecitlivělost na potraviny nebo léky;
• reakce na zavedení cizího proteinu
• nefróza
• chronická hemolytická anémie
• stav po splenektomii
• Hodgkinova choroba
• léčba estrogenem, antithyroidními léky
• ulcerózní kolitida

Změna počtu lymfocytů
zvýšení:
• infekční onemocnění: infekční mononukleóza, virová hepatitida, infekce cytomegalovirem, černý kašel, ARVI, toxoplazmóza, herpes, rubeola, infekce HIV
• onemocnění krevního systému: akutní a chronická lymfocytární leukémie; Lymfosarkom, nemoc těžkého řetězce - Franklinova choroba
• otrava tetrachlorethanem, olovem, arsenem, sirouhlíkem
• léčba léky, jako je levodopa, fenytoin, kyselina valproová, narkotická analgetika
snížení
• akutní infekce a nemoci
• Miliární tuberkulóza
• ztráta lymfy přes střeva
• lymfogranulomatóza
• systémový lupus erythematosus
• aplastická anémie
• selhání ledvin
• terminální stadium onkologických onemocnění
• imunodeficience (s nedostatkem T-buněk)
• radioterapii
• podávání léků s cytostatickým účinkem (chlorambucil, asparagináza), glukokortikoidy, podávání anti-lymfocytového séra

Změna počtu MONOCITES
zvýšení:
• infekce (virová, plísňová, protozoální a rickettsiální etiologie), stejně jako doba zotavení po akutních infekcích
• granulomatóza: tuberkulóza, syfilis, brucelóza, sarkoidóza, ulcerózní kolitida (nespecifická)
• systémová kolagenóza (systémový lupus erythematosus), revmatoidní artritida, periarteritis nodosa
• onemocnění krve (akutní monocytární a myelomonocytární leukémie, myeloproliferativní onemocnění, myelom, lymfom)
• otrava tetrachlorethanem fosforem
snížení:
• aplastická anémie (poškození kostní dřeně)
• leukémie chlupatých buněk
• pyogenní infekce
• porod
• operativní zákroky
• šokové podmínky
• užívání glukokortikoidů.

Jaderný posun fóra leukocytů je změna normálního procentního poměru různých skupin neutrofilních leukocytů.

NUCLEAR NEUTROPHILS SHIFT LEFT TALKS O VZHLEDU MLADÝCH FORMŮ NEUTROFILŮ V KRVI, KTERÉ SE NAJÍT:
• infekční onemocnění
• zánětlivé procesy
• hrábě
• intoxikace

Podle typu jaderného posunu se rozlišují:
• regenerační posun - počet bodných a mladých neutrofilů je zvýšen na pozadí celkového nárůstu leukocytů - to je ukazatel zvýšené účinnosti kostní dřeně, který je pozorován u zánětlivých a hnisavých septických onemocnění
• degenerativní posun - zvýšení počtu bodných neutrofilů, výskyt degenerativních změn v buňkách - takový posun naznačuje funkční inhibici kostní dřeně, která může nastat jak se zvýšením leukocytů, tak s poklesem leukocytů

Degenerativní posun:
• v případě obecné leukocytózy se může objevit: salmonelóza, toxická dyzenterie, akutní peritonitida, uremická a diabetická kóma
• na pozadí poklesu leukocytů se to děje v případě: virových infekcí, tyfusových paratyphoidních onemocnění

Leukemoidní reakce jsou charakterizovány výskytem nezralých forem: myelocytů, promyelocytů a dokonce myeloblastů na pozadí výrazné leukocytózy; Leukemoidní reakce se vyskytují u: infekcí, tuberkulózy, rakoviny žaludku, prsu, tlustého střeva.

Poměr všech nesegmentovaných forem leukocytů k segmentovaným se nazývá "index posunu" neutrofilů a je určen následujícím počtem krevních buněk leukocytů:

SHIFT INDEX = (M + S + P) / C = normální 0,05-0,08

kde:
• M - myelocyty
• Yu - mladí neutrofily
• P - pásmo
• neutrofily v segmentech C

Závažnost onemocnění na směnovém indexu:
• silný stupeň - index od 1,0 a vyšší
• průměrný stupeň - index 0,3-1,0
• mírný - index ne více než 0,3

NUCLEAR NEUTROPHILS SHIFT PRAVDA - NEŽ NEPROFILY PŘECHÁZEJTE Zralé FORMY S 5-6 SEGMENTY INSTRUKTORŮ TŘETÍ (index posunu - méně než 0,04)

Neutrofilní nukleární posun nastává vpravo:
• Normálně 20% zdravých lidí
• s anemií adisonobirmeru
• polycytémie
• s radiační nemocí

Přechod jaderných neutrofilů při infekčních a zánětlivých onemocněních naznačuje příznivý průběh.

VÝZNAMNÉ ZRUŠENÍ BUNKŮ:
• „blastová krize“ - přítomnost pouze regionálních buněk: akutní leukémie, metastázy maligních nádorů, exacerbace chronické leukémie
• „selhání“ vzorce leukocytů - blastových buněk, promyelocytů a zralých buněk, žádné intermediální formy: charakteristika debutu akutní leukémie

referenční informace

Leukocytopoiesis (leukopoiesis) zahrnuje:
• na myeloidní linii
- granulocytopoéza (granulopoéza)
- monocytopoiesis (monopoiesis)
• na lymfoidní linii
- lymfocytóza (lymfopoéza)

Diferenciace v myeloidní linii:
• myeloblast - v řadě granulocytů je první morfologicky rozlišitelná buňka; má jemné strukturní jádro, jednotlivé nukleoly; tvar jádra je kulatý, rozměry jsou o něco menší než rozměry erytroblastu; myeloblast se liší od nediferencovatelných blastů z třídy prekurzorových buněk přítomností granulity v cytoplazmě; tvar buňky je často kulatý, plochý
• promyelocyt (neutrofilní, eozinofilní a bazofilní) - další stadium zrání granulocytů - kulaté nebo fazolové jádro promyelocytu je téměř dvakrát větší než jádro myeloblastu, i když tato buňka není polyploidní; to je často lokalizováno výstřední, a v tom vy můžete vidět zbytky nukleolu; struktura chromatinu již ztrácí jemnou vláknitou strukturu blastových buněk, i když nemá strukturu hrubého úsměvu; plocha cytoplazmy je přibližně stejná jako plocha jádra; cytoplazma je hojně nasycena zrny s charakteristickými rysy pro každou řadu
• „mateřský myelocyt“ - podle všech indikací odpovídá popsanému promyelocytu, ale liší se od něj v hrubším jádru (v praxi se tato forma nebere v úvahu, nevstoupila do myelogramu) - je přechodná forma z promyelocytu do dalšího stadia zrání buněk
• myelocyt - je buňka s kulatým nebo oválným, často excentricky umístěným jádrem, které ztratilo jakékoli známky výbuchů; cytoplazma je zbarvena do šedavě modravého tónu, její granularita v neutrofilním myelocytu je menší než u promyelocytů; relativní plocha cytoplazmy se zvyšuje; eozinofilní myelocyt má charakteristickou oranžovo-červenou zrnitost stejného typu, bazofilní myelocyt - velká polymorfní basofilní granularita
• metamyelocyt - je charakterizován jádrem ve tvaru velké fazole, obvykle umístěným excentricky; oblast jeho cytoplazmy je větší než oblast jádra a cytoplazma obsahuje stejnou granularitu jako myelocyt, ale u neutrofilních metamyelocytů je vzácnější než u myelocytů.

Diferenciace v lymfoidní linii:
Populace T lymfocytů
• lymfoblast - v lymfocytové sérii (velký lymfocyt) má všechny znaky nediferencovaného blastu, ale někdy je charakterizován jedním velkým nukleolem; detekce v nátěru z lymfatické uzliny nebo sleziny bez otřepů umožňuje připsat ji lymfoblastům; pokus rozlišovat lymfoblast, monoblast a nediferencovaný výbuch velikostí a tvarem jádra, šířkou okraje cytoplazmy nemá žádný úspěch, protože lymfoblast pod vlivem antigenní stimulace může podstoupit řadu změn
• Prolymfocyt - má relativně homogenní strukturu jádra, často zbytky nukleolu, ale nemá velkou hrubost chromatinu charakteristickou pro zralý lymfocyt.
Populace B lymfocytů
• plasmablast - má blastové jádro, zrnitou fialově modrou cytoplazmu
• protoplazmocyt - ve srovnání s plazmatickými buňkami má hustší jádro, obvykle umístěné excentricky, s relativně větší cytoplazmou modro-fialové barvy.
• plazmová buňka - charakterizovaná hustým jádrem ve tvaru kola, ležícím excentricky; cytoplazma - modrofialová, někdy s několika azurofilními načervenalými granulemi; a v normě a v patologii to může být vícejádrové

Fáze analýzy krve pro výpočet vzorce leukocytů:
1. Krevní nátěr na sklíčku. Pečlivě umyté a odtučněné sklo (jeho okraj) se dotýká kapky krve v místě vpichu injekce. Skvrnu tvoří brusné sklo tak, že je pod úhlem 45 ° k skluzu před kapkou. Poté, co do této kapky přinesli sklenici, čekají, až se krev rozšíří podél jejího okraje, a rychle rychlým pohybem provádějí brousicí sklo dopředu, aniž by ho odnášeli od předmětu předtím, než vyschne celou kapku. Správně zhotovený nátěr má nažloutlou barvu (tenkou), nedosahuje okrajů skla a končí stopou (knírkem).
2. Fixace. Nejlepší fixace se dosáhne v absolutním methylenalkoholu (3-5 minut) nebo ve směsi Nikiforova o stejných podílech absolutního ethanolu a etheru (30 minut).
3. Zbarvení. Mezi hlavní hematologické barvy patří methylenová modř a její derivát - azurový I (methylen azurový) a azurový II (směs stejných částí azurové I a methylenové modři) až kyselý eozin rozpustný ve vodě.
- Barva Romanovsky-Giemsa (z výroby) má následující složení: Azur II - 3 g, ve vodě rozpustný žlutý eosin - 0,8 g, methylalkohol - 250 ml a glycerin - 250 ml. Pracovní nátěrový roztok se připraví rychlostí 1,5-2 kapek hotové barvy na 1 ml destilované vody. Barva se nalije na nátěr s nejvyšší možnou vrstvou, doba zbarvení je 30-35 minut. Po této době se tampony promyjí vodou a suší na vzduchu. Tímto způsobem může být jádro dobře diferencované, ale neutrofilní granularita cytoplazmy je mnohem horší, takže je široce používána pro barvení periferního krevního nátěru.
- Hotové barvivo, fixační přípravek May-Grunwald, který je roztokem eosinmethylenové modři v methylenalkoholu, se pipetuje na fixovaný nátěr po dobu 3 minut. Po 3 minutách se do barvy, která pokrývá roztok, přidá stejné množství destilované vody a zbarvení pokračuje další 1 minutu. Poté se barva vymyje a nátěr se vysuší na vzduchu. Poté se vysušený nátěr znovu natírá čerstvě připraveným vodným roztokem Romanovského barvy po dobu 8-15 minut. Tato metoda je považována za nejlepší, zejména u nátěrů punkcí kostní dřeně.