Dostupnost moderních léčiv proti hepatitidě B (HBV) s jasnými indikacemi pro jejich podávání vyžaduje přesné a rychlé ověření diagnózy. Vzhledem k omezeným klinickým údajům v prvních týdnech onemocnění a omezeným analytickým metodám imunoanalýzy se však rychlost diagnózy snižuje.
Přítomnost markerů anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe vám umožní potvrdit HBV nebo zjistit skutečnost předchozí nemoci. Je však možné stanovit přítomnost aktivních virových částic v krvi a spočítat jejich počet v době studie pomocí PCR - kvantitativní real-time test pro detekci hepatitidy B. Metoda, ve srovnání s diagnostickými metodami ELISA, řeší diagnostické problémy a umožňuje předvídat průběh onemocnění při příjmu. antivirotika.
Základy diagnostiky nemocí
Diagnóza hepatitidy B je založena na hodnocení klinických projevů, enzymatických imunoanalýz a instrumentálních metod výzkumu. K onemocnění dochází v akutní fázi po inkubační době a v závislosti na dávce infekce a účinnosti léčby vstupuje do chronického stadia. Hlavním cílem léčby je zabránit chronizaci, tj. Eliminaci všech virových částic z krve. Klinický průběh onemocnění je lék bez následné virémie.
Skutečnost eliminace infekce musí být prokázána kvantitativní metodou výzkumu.
Vzhledem k tomu, že jakýkoli kvalitativní enzymový imunoanalýz umožňuje diagnostikovat HBV nepřímo, to znamená, že neprokazuje přítomnost patogenu ve vnitřním prostředí těla, ale charakterizuje imunitní reakci na infekci, sledování účinnosti léčby a skutečnost, že léčba je obtížně prokázatelná. Proto by pacient s hepatitidou B nebo s přítomností diagnostických kritérií v jeho prospěch měl být proveden polymerázovou řetězovou reakcí, aby se kvantifikoval počet virových částic v krvi. Diagnostická rychlost je nedostatek kopií DNA infekce.
Popis diagnostické metody
Vysoce citlivá metoda PCR diagnostiky hepatitidy B patří do kategorie geneticky inženýrských molekulárně biologických studií. Přes to je určeno množstvím virové DNA v biologickém materiálu pacienta a přípustné rychlosti. Podle získaných výsledků se stanoví počet virových částic na jednotku objemu. Materiál pro diagnostický test je venózní krev pacienta. Příjem je žádoucí na prázdný žaludek kvůli možnému účinku chyle séra na výsledek studie.
Získané výsledky musí být poskytnuty lékaři k interpretaci a stanovení další taktiky. Nezávislé dekódování nepředstavuje diagnostickou hodnotu.
Význam výsledku počtu virových částic získaných metodou PCR přesahuje hodnotu enzymových imunoanalýz. Protože analýza v reálném čase ukazuje přítomnost původce onemocnění v krvi, jeho informační obsah je vyšší než ostatní. Pokud ELISA indikuje pouze přítomnost protilátek, která je pozorována od 4 týdnů inkubační doby a trvá déle než 8 týdnů po eliminaci viru z krve, pak polymerázová řetězová reakce jasně potvrzuje aktivní průběh onemocnění nebo jeho vyléčení, charakterizuje dynamiku předepsané terapie.
Polymerázová řetězová reakce s kvantitativním stanovením částic patogenu řeší diagnostické otázky ve prospěch zastavení léčby z důvodu zotavení nebo pokračující terapie z důvodu její nedostatečné účinnosti. Metoda je co nejvíce specifická pro virus HBV a vyznačuje se přijatelnou chybou.
Indikace a výkonnostní cíle
Kvantitativní analýza hepatitidy B je nejspolehlivější a umožňuje potvrdit data získaná metodami ELISA. Je jmenován, když:
- získání pozitivního diagnostického výsledku testu ELISA;
- léčení pacienta s prokázanou diagnózou poškození virových jater;
- v diagnostice smíšené etiologie hepatitidy;
- v případě potřeby stanovte virovou zátěž u pacienta.
Vzhledem k tomu, že enzymová imunoanalytická metoda se v praxi specialisty na infekční onemocnění používá ve větší míře, mohou být někteří pacienti s mírným onemocněním léčeni bez nutnosti počítat virovou zátěž. PCR je však obecně považována za „zlatý standard“ diagnostiky v hepatologii, protože díky jedinečnosti jejího výsledku odstraňuje řadu organizačních problémů. Směr pacienta pro kvantitativní analýzu má tedy tyto cíle:
- získání údajů o počtu virových částic v krvi pacienta;
- potvrzení akutního průběhu hepatitidy a včasné ověření chronického onemocnění;
- stálá detekce nositelů latentního viru s pozitivními testy ELISA, sledování jejich virémie;
- rozhodování o jmenování antivirové léčby, její kombinaci a ukončení.
Nejdůležitějším cílem použití kvantitativního PCR testu pro detekci HBV je identifikace možných kombinací léčby. V případě vysoké virové zátěže dává výsledek analýzy specialistovi možnost pokračovat v kombinaci léků. V průběhu léčby je snadné stanovit účinnost předepsané farmakologické léčby na základě výsledků PCR. Pouze na základě údajů o imunoanalytických metodách není možné včas určit, jaká je léčba a její současná účinnost. Před zahájením léčby akutní hepatitidy, latentní virové infekce s vysokou virémií a chronickou HBV je proto nutná kvantitativní analýza v reálném čase.
Interpretace výsledků kvantitativních testů PCR
Interpretaci výsledků kvantitativního testu PCR by měl provádět ošetřující lékař pacienta. Je nutné vyhodnotit diagnostický ukazatel a určit terapeutickou taktiku.
Standardní analyzátor je schopen produkovat kvantitativní indikátor, který odráží počet kopií virové DNA přítomné ve studované žilní krvi. Měrné jednotky - kopie / ml, IU / ml (kopie na mililitr, mezinárodní jednotky na mililitr). Interpretace výsledků je uvedena v tabulce s uvedením různých jednotek měření.
Podstata analýzy PCR pro hepatitidu B a její výsledky
Virová hepatitida B je úspěšně léčena, pokud je včas detekována a je správně stanoven počet protilátek a antigenů v krvi pacienta. Pomocí enzymové imunoanalýzy hepatitidy je možné detekovat přítomnost virových markerů, ale nemohou určit přesný stupeň procesu.
Pro kvantitativní vyhodnocení byla použita PCR diagnostika. Pomocí testu je možné pomocí antivirových léků spočítat počet markerů, předpovědět průběh onemocnění a pravděpodobnost vyléčení.
Hlavní výhodou této studie je schopnost detekovat i minimální koncentrace viru, identifikovat patogen ve stadiu druhu.
Diagnostika hepatitidy B
Virus hepatitidy B je vysoce nakažlivý a odolný vůči vnějším vlivům. Zůstává aktivní v krvi pacienta po dobu několika týdnů. Proto je každá osoba ohrožena infekcí, i když je pozorována profylaxe.
Pro diagnostiku nemoci předepište následující studie:
Podstata metody PCR
Americký chemik K.Mullis obdržel Nobelovu cenu a jeho diagnostická metoda se stále používá.
Předchůdce metody PCR (polymerázová řetězová reakce) je považován za vědce z Norska H. Kleppeho. Nejprve začal provádět amplifikaci (obnovu) DNA pomocí krátkého řetězce DNA, tj. Syntetického primeru (druh kopie).
Nicméně, vědec nedokázal realizovat jeho nápad. Podobná studia byla dělána americkou chemik K.Mullis, kdo v roce 1993 získal Nobelovu cenu za jeho vynález. Od té doby, PCR byla používána založit otcovství, diagnostikovat genetická onemocnění a detekovat viry.
Podstatou reakce je, že pomocí enzymů se zkopíruje určitý kus DNA. Můžete kopírovat pouze oblast, která odpovídá zadaným parametrům a pokud je v prezentovaném vzorku. K zahájení reakce se používají následující složky:
- Matrix DNA s místem, které má být zkopírováno.
- Primery podobné struktuře DNA.
- Polymeráza, tj. Enzym, který vyvolává reakci. Mělo by být termostabilní, tj. Odolávat teplotním extrémům.
- Řešení s určitými parametry, zajištění průchodu reakce.
Reakce se provádí v několika stupních:
Pro detekci hepatitidy B se používají dva typy reakcí: kvantitativní a kvalitativní.
Kvantitativní PCR
Kvantitativní metoda určuje množství genomu HBV
Kvantitativní PCR zahrnuje současné vytváření kopií fragmentů DNA a stanovení počtu molekul. Měření se provádí po každé fázi, to znamená v reálném čase. Toho je dosaženo použitím fluorescenčních sond, které jsou zahrnuty v řetězci molekul a záře v určitém období studie.
Tato metoda se používá k detekci fragmentů DNA, které jsou markery viru hepatitidy. Pomocí kvantitativní metody je možné přesně izolovat genotyp viru. Jinými slovy se vypočítá počet kopií genomu HBV na počet buněk pacienta.
Kvantitativní analýza poskytuje odpovědi na následující otázky:
- S jakou intenzitou onemocnění postupuje.
- Jak účinná je léčba.
- Vyvinula se rezistence na léky?
Kvantitativní měření je také nezbytné pro diagnostiku chronického stadia infekce. Pokud je množství DNA nižší než 100 ks / ml na normální úrovni transaminázy, pak je osoba nositelem viru.
V akutní fázi je množství protilátek mnohem vyšší, při antivirové terapii zvýšení počtu protilátek indikuje vývoj rezistence na léčivo, což je signál pro úpravu léčby.
Vysoce kvalitní PCR
Vysoce kvalitní PCR poskytuje méně informací, ale může eliminovat infekci.
Vysoce kvalitní PCR může pouze prokázat přítomnost patogenu v krvi. Pokud jsou nepřítomni, pacient není infikován, pokud patogen vstoupí do krve, výsledek bude pozitivní.
S pomocí kvalitativní reakce však není možné objasnit genom viru, stadium nemoci. Pro diagnostiku HBV proto bylo provedeno kvantitativní i kvalitativní měření.
Příprava na průzkum
Pro analýzu PCR je nutná žilní krev. To musí být provedeno ráno nalačno.
Pacient by se měl na studii řádně připravit:
- Po dobu 10 hodin odmítnout jídlo, můžete pít pouze čistou vodu.
- V předvečer přestat užívat alkohol, po dobu 4 hodin nekouřit.
- Před vyšetřením se vyvarujte fyzického a emocionálního stresu.
- Přestat užívat léky po dobu 2 dnů, pokud to není možné, je nutné informovat laboratorního technika. Některé drogy mají vliv na konečný výsledek.
Interpretace údajů
V kvantitativní reakci jsou získané indikátory vyhodnoceny v závislosti na počtu kopií DNA.
Je snadné interpretovat data měření kvality. On dává buď pozitivní nebo negativní odpověď.
V kvantitativní reakci lze získané indikátory odhadnout v závislosti na počtu kopií DNA. Měrnou jednotkou jsou kopie / ml.
Data se dekódují následovně:
- Pokud je množství DNA HBV menší než 90, pak infekce chybí. U pacienta se vyvinula imunita po očkování, nebo byl vyléčen z nemoci.
- Když se počet kopií 2x100 hovoří o nosiči viru.
- Počet 2x106 označuje chronické stadium onemocnění.
- U DNA více než 2x109 má pacient akutní stadium hepatitidy.
Chybné výsledky
Výhody diagnostické metody využívající polymerázové reakce jsou následující: t
- Přímá detekce patogenů. Naproti tomu ELISA poskytuje informace o přítomnosti protilátek proti viru.
- Specifičnost. To znamená, že je to DNA oblast, která je přítomna ve vzorku biomateriálu, který je kopírován.
- Přecitlivělost. Metoda může dokonce detekovat fragmenty jednotlivých buněk.
- Diagnostika onemocnění v akutních a latentních stadiích. To znamená, že onemocnění je možné diagnostikovat ve stadiu preklinických projevů.
Metoda má nedostatky, které vedou k falešným výsledkům. Nejvýznamnější nevýhodou je pravděpodobnost kontaminace materiálu. Hlavním zdrojem kontaminace jsou špatně zpracované zkumavky, laboratorní ruce, reagencie.
Část DNA z předchozí reakce může vstoupit do krve. Laboratoře proto kladou zvýšené hygienické požadavky: oddělené místnosti, plastové trubky, ultrafialové zpracování laboratoří atd.
Falešně negativní výsledky mohou být způsobeny sníženou citlivostí reakce. To se děje v následujících situacích:
- pacient užívá léky, například antikoagulancia;
- člověk před analýzou utrpěl fyzickou zátěž (sport, tvrdá práce);
- v nedávné době.
Pokud má pacient vysokou pravděpodobnost infekce a výsledek studie je negativní, musí být znovu vyšetřen.
Viz také:
Závěr
Metoda polymerázové řetězové reakce je hlavní a nejinformativnější pro diagnostiku HBV. To umožňuje nejen stanovit stav nositele infekce, ale také objasnit stadium onemocnění, vyhodnotit výsledky léčby.
Pro přesnější diagnostiku se používá kvalitativní a kvantitativní měření. Nevýhodou metody je pravděpodobnost kontaminace, snížená citlivost a poměrně vysoká cena.
Aby výsledky byly nejspolehlivější, je třeba se na studii řádně připravit a provádět ji na klinice s příslušnou licencí a dobrou pověstí.
Rozluštění krevního testu na hepatitidu B
Hepatitida B je jednou z nejnebezpečnějších onemocnění naší doby.
To je způsobeno virem, který vstupuje do těla, když krev přichází do styku s infikovaným biologickým materiálem, včetně těch, které zůstávají na manikúru, lékařských přístrojích, tetovacích strojích, které nebyly řádně vydezinfikovány. Virus může být také přenášen pohlavním stykem.
Hepatitida B je analyzována za účelem diagnostiky onemocnění odebráním pacientovy krve.
K infekci dochází prostřednictvím pohlavních a domácích cest, typem šíření je hematogenní (skrze krev). Když je infikován, virus vstupuje do hepatocytů (jaterních buněk), které jsou produkovány v budoucnu. Prostřednictvím krevního oběhu se nemoc rychle šíří po celém těle. Virus B (HBV) se vyznačuje vysokou odolností vůči účinkům teploty a kyseliny a je schopen udržet své škodlivé vlastnosti po dobu šesti měsíců.
Jaké máte krevní testy na hepatitidu B?
Pokud hepatitida B vykazuje první příznaky, je nutné před zahájením léčby a léčby provést testy. Krevní test je spolehlivým způsobem instalace infekce hepatitidy. Vedeno v laboratoři. Testovací materiál proti hepatitidě B se podává na prázdný žaludek: z posledního jídla by mělo uplynout minimálně 8 hodin.
Pro detekci viru hepatitidy B v krvi se používají testy tří typů, které charakterizují přítomnost viru v krvi:
- analýza přítomnosti HBV DNA v materiálu studiem polymerázové řetězové reakce;
- kvalitativní studie přítomnosti anti-HBc IgG proteinu a HBsAg antigenu (nalezeného u zdravých, infikovaných a nemocných);
- analýza pro detekci proteinů HBeAg a anti-HBc IgM (charakterizují zhoršení onemocnění).
Pro úplnost se doporučuje provádět současně výzkum na několika markerech.
Imunologické testy na hepatitidu B
Nejběžnější testy hepatitidy B jsou imunologické. Jejich podstatou je detekovat protilátky v krvi produkované tělem nebo játry. Vzorky jsou kvalitativní a kvantitativní. Testy a transkripty hepatitidy B obvykle obsahují informace o několika charakteristických proteinech. Během testu se testují následující protilátky:
Vyskytuje se v raných stadiích infekce před nástupem klinických příznaků.
Pozitivní marker indikuje přítomnost viru, ale nachází se také u zcela zdravých lidí. Pokud je v krvi přítomno méně než 0,05 IU / ml, výsledek se považuje za negativní. Pokud je koncentrace protilátky vyšší, analýza se považuje za pozitivní.
Nachází se prakticky u každého infikovaného pacienta. Udržování ukazatelů na vysoké úrovni může znamenat přechod onemocnění do chronické formy kurzu. Pozitivní marker indikuje přítomnost onemocnění v období exacerbace, prodloužené zotavení. HBeAg je velmi špatné znamení. Pacient je velmi nakažlivý. Normálně není protein detekován v krvi.
Existují dva typy protilátek anti-HBc: IgG a IgM. Přítomnost IgM v krvi je známkou průběhu akutní formy, vysoké infekčnosti pacienta a možnosti onemocnění pererohody v chronické formě. Normálně není přítomnost IgM povolena. IgG je příznivým ukazatelem. Marker indikuje, že tělo vytvořilo imunitu proti hepatitidě B.
Je-li v krvi detekován marker, lze vyvodit závěr o příznivém průběhu onemocnění a vytvoření ochranné imunity u pacienta.
- Anti-HBs.
Marker signalizuje obnovu a tvorbu imunity.
Detekce HBV DNA pomocí PCR
Pro laboratorní vyšetření a zjištění přítomnosti diagnózy hepatitidy B v krvi se používá metoda PCR. Způsob polymerázové řetězové reakce je nejaktuálnější v oblasti detekce onemocnění.
Konečné dekódování ukazuje, zda existují stopy genové přítomnosti patogenu v jaterních buňkách.
Jsou-li během výzkumu dodržovány všechny zásady, je výsledek naprosto přesný. Metoda se používá pro diagnostiku, používá se v procesu léčby av antivirové terapii.
- Vysoce kvalitní PCR má celkem dva významy: „detekováno“ a „nezjisteno“. Tento postup se provádí u každého pacienta s podezřením na hepatitidu. S průměrnou citlivostí testu PCR v rozmezí 10 až 500 IU / ml, s nízkou hladinou DNA viru v krvi, nebude detekován žádný genový materiál.
- Kvantitativní PCR. Na rozdíl od kvalitativního indikuje nejen hepatitidu B. Kvantitativní analýza ukazuje, jak daleko je norma zdravého člověka v číselných termínech daleko od ukazatelů pacienta. Metoda umožňuje vyhodnotit stadium onemocnění a předepsat léčbu. Citlivost testu PCR v kvantitativním sledování je vyšší než v kvalitativní metodě. Základem je počet detekované DNA, který je vyjádřen v kopiích na mililitr nebo IU / ml.
Kvantitativní PCR navíc poskytuje přehled o účincích léčby a správnosti zvolené terapie. V závislosti na množství virového genového materiálu může být učiněno rozhodnutí zkrátit dobu trvání léčby nebo ji naopak rozšířit a posílit.
Biochemický krevní test na hepatitidu B
Metoda biochemické analýzy je nutná k získání úplného klinického obrazu průběhu onemocnění. Tato diagnostická metoda umožňuje pochopení práce vnitřních orgánů (jater, ledvin, žlučníku, štítné žlázy a dalších). Dekódování dává pochopení metabolismu v těle, možných patologií metabolismu. Podrobné ukazatele indikují nedostatek vitamínů, makroživin a minerálů nezbytných pro lidské zdraví a život.
Test na hepatitidu můžete provést v jakémkoli jiném diagnostickém centru (Invitro, Gemotest atd.). Biochemický krevní test pro detekci hepatitidy B zahrnuje následující složky.
Kvantitativní analýza enzymu ALT (AlAt)
Tento enzym se nejčastěji vyskytuje ve zvýšených koncentracích při akutní a chronické hepatitidě. Látka je obsažena v jaterních buňkách a s lézemi orgánů přes krevní oběh vstupuje do krevních cév.
Množství a koncentrace v krvi během virové nemoci se neustále mění, takže výzkum je prováděn alespoň jednou za čtvrtletí. ALT neodráží pouze aktivitu viru hepatitidy, ale také stupeň poškození jater. Hladina ALT se zvyšuje s rostoucím množstvím toxických látek jaterního původu a v přítomnosti viru.
Kvantitativní analýza AST-enzymu
Protein je součástí nejdůležitějších orgánů člověka: jater, nervové tkáně, tkáně ledvin, kostry a svalů. Enzym se podílí na budování nejdůležitějšího svalu - srdce. Vysoká AST u pacienta s hepatitidou B může signalizovat fibrózu jater. Podobná situace nastává, když alkoholické, lékové nebo jiné toxické poškození jaterních buněk.
Indikátory přehřátí jsou známkou poškození jater na buněčné úrovni. Při stanovení diagnózy je třeba vzít v úvahu poměr AST a ALT (de Rytisův koeficient). Současné zvýšení koncentrace obou enzymů je známkou nekrózy jater.
Bilirubin
Látka je tvořena ve slezině a játrech v důsledku rozpadu hemoglobinu v jejich tkáních. Tato součást je součástí žluči. Existují dvě proteinové frakce: přímý bilirubin (vázaný) a nepřímý bilirubin (volný). S nárůstem hladiny bilirubinu v krvi má smysl podezření na hepatitidu nebo jiné poškození jater. To přímo souvisí s cytolýzou jaterních buněk.
Zvyšuje-li se množství nepřímého bilirubinu, je s největší pravděpodobností léze parenchymální tkáně nebo Gilbertova syndromu. Vysoká hladina bilirubinu podle výsledků analýzy může být způsobena obstrukcí žlučových cest. Když je hladina bilirubinu více než 30 mikromolů na litr, pacient vykazuje ikterický odstín kůže, moč se ztmaví a bílé oči mění barvu.
Albumin
Syntéza tohoto proteinu se vyskytuje v játrech. Pokud je jeho množství sníženo, znamená to pokles syntézy enzymů v těle v důsledku výskytu závažných lézí jaterních buněk.
Celkový protein
Pokud se množství celkového proteinu stane významně nižší než přijatá norma, pak to znamená zpomalení fungování jater.
GGT (GGTP)
Enzym používaný při detekci obstrukční žloutenky a cholecystitidy. Zvýšení hladiny GGT je signálem toxického poškození jater. Může být provokován chronickým alkoholismem a nekontrolovaným užíváním drog. Protein je zvláště citlivý na toxiny a alkohol, pod jejich vlivem jeho aktivita rychle roste. Udržování vysoké koncentrace GGT v krvi po dlouhou dobu hovoří o závažném poškození jater.
Kreatinin
Je produktem metabolismu bílkovin, který se vyskytuje v játrech. Prudký pokles hladiny je signál, že orgán zpomaluje.
Proteinové frakce
Snížení hladiny proteinových frakcí je známkou patologie jater.
Dekódovací analýza pro hepatitidu B a hodnoty jsou normální
Diagnostika hepatitidy B je souhrnná studie ukazatelů. Pouze jejich komplexní analýza umožňuje vyvodit závěry o infekci pacienta. Zvažte dekódovací analýzu pro hepatitidu B. Pro srovnání, rychlost látek v krvi.
Co kvantitativní analýza hepatitidy B pomocí PCR a normy studie
Hepatitida je zánětlivá jaterní patologie, ke které dochází v důsledku pronikání virů do orgánu nebo působení jedů, toxinů vedoucích k destrukci hepatocytů (funkční buňky orgánu). V jiné než závažné formě se nemoc vyléčí sama. V závažných případech vede k závažným komplikacím: fibróze, cirhóze nebo onkologii. Je identifikováno pět typů virové hepatitidy: A, B, C, D a E. Je možné pochopit, zda má osoba nemoc, a v jaké formě, podle výsledků speciálních studií.
Druhy viru
Kauzální agens hepatitidy jsou hepatotropní viry. Vstupují do jaterních buněk, integrují se do svého genomu, narušují strukturu, vedou k nekróze tkání. V jiných orgánech zřídka kořen. Viry neporušují jaterní buňku, ale používají ji k reprodukci.
Lidská imunita silně bojuje s viry, snaží se vést k jejich oslabení a zastavení reprodukce. Čím silnější je boj, tím více hepatocytů umírá. To vede k rozvoji zánětu (hepatitida) a zhoršené funkci jater.
S dobrou imunitou se mohou játra sama zbavit viru a porazit nemoc. To se děje s onemocněním typu A, E a B. Pokud imunitní systém ztrácí v boji, hepatitida se stává chronickou (zejména u typů C, D a méně často u B).
Existuje pět typů onemocnění:
- Hepatitida A (původce HAV). Přenosová cesta je fekálně-orální. Nečistoty, nemyté produkty a špinavá voda jsou příčinou infekce. Někdy přenášené během intimity. Často má mírnou formu a vede k úplnému uzdravení, následuje vznik imunity. Vzácné těžké druhy jsou smrtelné. Očkování se provádí.
- Hepatitida B (HBV). Vstupuje do těla skrze tekutý biologický materiál (krev, semenná tekutina) a dítě v době narození. Při použití použité injekční stříkačky se zavedením injekčních drog (rizikových drogově závislých). Prostřednictvím nesterilních a opakovaně použitelných nástrojů v nemocnicích (nedbalostí personálu). Infuzí dárcovské krve bez předchozího ověření. Existuje vakcína.
- Hepatitida C (HCV). Infikované, stejně jako u hepatitidy B. Vakcíny ještě neexistují.
- Hepatitida D (HDV) postihuje pouze ty infikované HBV. Vzhledem k dvojnásobnému náporu jater se zvyšuje závažnost onemocnění. Očkování proti B také chrání proti HDV.
Pokud virová hepatitida trvá dlouho a skrytě, vede to k nebezpečným a nevratným následkům. Znalost této skutečnosti je pobídkou k tomu, aby si neměli nechat ujít nemoc a podniknout včasné kroky.
Hepatitida B
Hepatitida B je zánětlivá jaterní patologie, která se vyskytuje v důsledku vstupu viru B do organismu a je nebezpečná pro cirhózu jater nebo onkologii orgánu.
Způsoby pronikání choroby:
- použití použité injekční stříkačky pro injekce;
- prostřednictvím nesterilních a opakovaně použitelných nástrojů ve zdravotnických zařízeních (nedbalostí personálu);
- použití bez předchozího testování dárcovské krve;
- praxe nechráněného pohlaví;
- vertikální přenos z trpícího dítěte na matku.
Včas rozpoznat nemoc a zahájit léčbu pomůže poznat příznaky onemocnění:
- Útoky na nevolnost a nutkání zvracet.
- Ztráta chuti k jídlu
- Pocit nepohodlí pod žebry vpravo.
- Bolest v kloubech.
- Porušení frekvence a konzistence výkalů (bezbarvé výkaly, tmavá moč).
- Vzhled žloutlé kůže.
- Ospalost a rychlá únava.
V současné době neexistují žádné léky, které by virus zcela vyloučily z těla a zcela se hojily. Je-li však lékařská opatření přijata v pravý čas, je možné zajistit bezpečnost jater.
Co je DNA hepatitidy B? Kvantitativní definice
K detekci DNA viru hepatitidy B lze použít PCR (polymerázová řetězová reakce). Podezření na nemoc - na klinice, s pomocí laboratorních a instrumentálních metod. Zpočátku je patologie skrytá (doba inkubace), pak jde do akutního stadia.
Postupem času se stává chronickým onemocněním, ale ovlivňuje počet virů a kvalitu terapie. Je velmi důležité zabránit poslední fázi.
Pro přítomnost virové DNA existuje vysoce kvalitní enzymová imunoanalýza. Ale není úplně objektivní. Nedetekuje přítomnost patogenu uvnitř orgánů.
Pomáhá identifikovat:
- jak reaguje imunita vůči infekci;
- zda jsou v krvi antigeny a protilátky.
Proto je kontrola terapie komplikovaná. Prokázat, že osoba má zpět, na základě této metody je nemožné. Detekci a identifikaci nepotvrzenou kvalitativní analýzou DNA viru hepatitidy B pomocí kvantitativní analýzy.
Tato analýza je spolehlivá a je přiřazena v následujících případech:
- Enzymová imunosorbentní analýza (ELISA) pro protilátky je pozitivní.
- Byla prokázána přítomnost virového onemocnění jater.
- Existuje šance na několik typů hepatitidy.
- Pokud potřebujete vědět, jaké zatížení viry na těle.
Pokud nemoc postupuje snadno a bez komplikací, není třeba určit zatížení viry. Pacient je léčen na základě svědectví ELISA.
Lékařská věda vyvinula metodu polymerázové řetězové reakce (PCR), pomocí které je stanovena přítomnost virové DNA a její množství v krvi.
Detekce DNA HBV pomocí PCR
Pro detekci DNA viru hepatitidy B se provede PCR pro výpočet počtu částic HBV na jednotku objemu krevního séra. Počty virů hepatitidy jsou považovány za normální v nepřítomnosti dvojče DNA infekce.
Tato diagnostika má cíl:
- Vypočtěte počet částic viru na jednotku objemu séra.
- Potvrďte akutní hepatitidu.
- Včasné zabránění přechodu onemocnění v chronickém stavu.
- Identifikujte nosiče viru s pozitivními výsledky ELISA.
- Sledujte návrat virů po léčbě.
- Udělejte správné rozhodnutí o jmenování terapie, její kombinaci nebo ukončení.
Po inkubační době je akutní hepatitida pozitivní na PCR po sedmi až čtrnácti dnech.
Před přiřazením krve k analýze zjistí lékař historii pacienta:
- zda byly drogy injikovány do žíly;
- zda krev někoho jiného přitékala nebo se vzdávala jako dárcovská krev;
- byly tam nějaké operace;
- zda byly kožní léze;
- zda existovaly pochybné sexuální vztahy;
- byly kontakty s lidmi infikovanými hepatitidou B?
Krev se odebírá pro analýzu z žíly na lačný žaludek ráno od 7 do 9 hodin, takže výsledky jsou spolehlivé.
Připravte se na odběr krve, dodržujte pravidla:
- nejezte tučné potraviny po dobu 12 hodin, neberte alkoholické nápoje, nekuřte;
- vyhnout se fyzickému a sportovnímu zatížení;
- Upozorněte v laboratoři, zda byla provedena medikace (pokud je to možné);
- dětem mladším pěti let, půl hodiny před odběrem krve, vypijte dvě stě gramů vařené vody v desetiminutových intervalech.
Koncentrace DNA HBV se měří v kopiích / ml nebo mě / ml.
Při hodnocení výsledků studie se řídí následujícími ukazateli:
- 2x10 ^ 6 - v devadesáti pěti procentech případů se stane chronickým.
Kvantitativní PCR je hlavní metodou pro diagnostiku exacerbací hepatitidy B, identifikující latentní nosič infekce s vysokou virózou HBV.
Ve kterých onemocněních je DNA viru hepatitidy B kvantifikována
Pro detekci infekce (HBV DNA) se provádí PCR hepatitidy. Tento typ diagnostické detekce škodlivých mikroorganismů napomáhá nejen v hepatitidě B. Abychom našli patogeny, které jsou sekreční a obtížně se nacházejí v orgánech, PCR se často používá k potvrzení nebo vyvrácení infekce v gynekologické a urologické praxi.
Prozkoumejte krev a zjistěte:
- hepatitida A, B, C, D a TT;
- HIV infekce;
- onemocnění jater;
- herpes všeho druhu;
- cytomegalovirus;
- enterovirová infekce;
- toxoplazmóza;
- rubeola
- jiných chorob způsobených viry.
Pro diagnostiku onemocnění touto metodou je vhodné nejen krevní sérum. Jiné biomateriály jsou také pro analýzu. To jsou sliny, šmouhy z genitálií, ejakulát.
Seznam nemocí, pro které je diagnostika PCR prokázána, se proto rozšiřuje:
- Tuberkulóza.
- Salmonelóza.
- Záškrt.
- Cévní nemoci.
- Virové papilomy
PCR je součástí série povinných testů pro ženu, která má dítě. Aby se zabránilo patologickému průběhu těhotenství a abnormalitám ve vývoji dítěte, je nutné vyloučit pravděpodobnost infikování matky nebezpečnými nemocemi.
Termín analýzy DNA kvantitativního způsobu viru hepatitidy B
PCR bez chyb s vysokou přesností detekuje přítomnost viru v rané fázi. Ve studii ELISA se antigen vyskytuje pouze dva měsíce po infekci. S PCR - za třicet dnů. Není detekován pouze běžný virus, ale také mutované kmeny, které žádná jiná analýza nedokáže detekovat.
Existují standardní čísla pro kvantifikaci viru. Porovnávají se s hodnotami získanými ve studii a vyvodí závěry o stupni vývoje onemocnění nebo jeho nepřítomnosti. Datová analýza PCR se vydává za dva týdny.
Často lidé nevědí, že měli hepatitidu B. Mají to s chladem nebo chřipkou. Vzhledem k nemoci se riziko zvyšuje v průběhu života a získává závažné komplikace z jater. Proto je lepší hrát ji bezpečně a kontaktovat specialistu na infekční onemocnění.
Kteří lékaři by měli být konzultováni
Pacient, který obdržel výsledky testů, se pokouší vyvodit závěry o přítomnosti hepatitidy a určit stav vývoje onemocnění. V tomto případě se při posuzování skutečného stavu často vyskytuje chyba. Aby se tomu vyhnuli, přicházejí k lékařům k radám.
Lékařští specialisté v této oblasti:
Ošetřující lékař analyzuje kvantitativní PCR test, dešifruje povahu průběhu hepatitidy B a indikace pro další diagnózu.
Pomáhá vybrat nezbytnou léčbu nebo ji zrušit v nepřítomnosti pacientovy nemoci.
Lékař po infekci objektivně vyhodnotí zdravotní stav pacienta po dešifrování, předepíše správnou léčbu a poradí.
Aby nedošlo k problémům spojeným s tímto onemocněním, hepatologové důrazně doporučují, aby vakcíny proti hepatitidě B. Zavedení vakcíny poskytuje stoprocentní záruku, že osoba bude chráněna před touto nemocí.
- všechny děti ihned po narození;
- zaměstnanci zdravotnických zařízení;
- ti, kteří jsou naplněni krví někoho jiného.
Jak dlouho bude zavedená vakcína působit, závisí na imunitě každého jednotlivce (od 10 do 20 let). Pokud je to nutné, proveďte očkování znovu.
Léčíme játra
Léčba, symptomy, léky
Množstevní analýza kvantitativní analýzy hepatitidy B
Hepatitida B je jednou z nejnebezpečnějších onemocnění naší doby.
To je způsobeno virem, který vstupuje do těla, když krev přichází do styku s infikovaným biologickým materiálem, včetně těch, které zůstávají na manikúru, lékařských přístrojích, tetovacích strojích, které nebyly řádně vydezinfikovány. Virus může být také přenášen pohlavním stykem.
Hepatitida B je analyzována za účelem diagnostiky onemocnění odebráním pacientovy krve.
K infekci dochází prostřednictvím pohlavních a domácích cest, typem šíření je hematogenní (skrze krev). Když je infikován, virus vstupuje do hepatocytů (jaterních buněk), které jsou produkovány v budoucnu. Prostřednictvím krevního oběhu se nemoc rychle šíří po celém těle. Virus B (HBV) se vyznačuje vysokou odolností vůči účinkům teploty a kyseliny a je schopen udržet své škodlivé vlastnosti po dobu šesti měsíců.
Jaké máte krevní testy na hepatitidu B?
Pokud hepatitida B vykazuje první příznaky, je nutné před zahájením léčby a léčby provést testy. Krevní test je spolehlivým způsobem instalace infekce hepatitidy. Vedeno v laboratoři. Testovací materiál proti hepatitidě B se podává na prázdný žaludek: z posledního jídla by mělo uplynout minimálně 8 hodin.
Pro detekci viru hepatitidy B v krvi se používají testy tří typů, které charakterizují přítomnost viru v krvi:
- analýza přítomnosti HBV DNA v materiálu studiem polymerázové řetězové reakce;
- kvalitativní studie přítomnosti anti-HBc IgG proteinu a HBsAg antigenu (nalezeného u zdravých, infikovaných a nemocných);
- analýza pro detekci proteinů HBeAg a anti-HBc IgM (charakterizují zhoršení onemocnění).
Pro úplnost se doporučuje provádět současně výzkum na několika markerech.
Imunologické testy na hepatitidu B
Nejběžnější testy hepatitidy B jsou imunologické. Jejich podstatou je detekovat protilátky v krvi produkované tělem nebo játry. Vzorky jsou kvalitativní a kvantitativní. Testy a transkripty hepatitidy B obvykle obsahují informace o několika charakteristických proteinech. Během testu se testují následující protilátky:
Vyskytuje se v raných stadiích infekce před nástupem klinických příznaků.
Pozitivní marker indikuje přítomnost viru, ale nachází se také u zcela zdravých lidí. Pokud je v krvi přítomno méně než 0,05 IU / ml, výsledek se považuje za negativní. Pokud je koncentrace protilátky vyšší, analýza se považuje za pozitivní.
Nachází se prakticky u každého infikovaného pacienta. Udržování ukazatelů na vysoké úrovni může znamenat přechod onemocnění do chronické formy kurzu. Pozitivní marker indikuje přítomnost onemocnění v období exacerbace, prodloužené zotavení. HBeAg je velmi špatné znamení. Pacient je velmi nakažlivý. Normálně není protein detekován v krvi.
Existují dva typy protilátek anti-HBc: IgG a IgM. Přítomnost IgM v krvi je známkou průběhu akutní formy, vysoké infekčnosti pacienta a možnosti onemocnění pererohody v chronické formě. Normálně není přítomnost IgM povolena. IgG je příznivým ukazatelem. Marker indikuje, že tělo vytvořilo imunitu proti hepatitidě B.
Je-li v krvi detekován marker, lze vyvodit závěr o příznivém průběhu onemocnění a vytvoření ochranné imunity u pacienta.
Marker signalizuje obnovu a tvorbu imunity.
Detekce HBV DNA pomocí PCR
Pro laboratorní vyšetření a zjištění přítomnosti diagnózy hepatitidy B v krvi se používá metoda PCR. Způsob polymerázové řetězové reakce je nejaktuálnější v oblasti detekce onemocnění.
Konečné dekódování ukazuje, zda existují stopy genové přítomnosti patogenu v jaterních buňkách.
Jsou-li během výzkumu dodržovány všechny zásady, je výsledek naprosto přesný. Metoda se používá pro diagnostiku, používá se v procesu léčby av antivirové terapii.
- Vysoce kvalitní PCR má celkem dva významy: „detekováno“ a „nezjisteno“. Tento postup se provádí u každého pacienta s podezřením na hepatitidu. S průměrnou citlivostí testu PCR v rozmezí 10 až 500 IU / ml, s nízkou hladinou DNA viru v krvi, nebude detekován žádný genový materiál.
- Kvantitativní PCR. Na rozdíl od kvalitativního indikuje nejen hepatitidu B. Kvantitativní analýza ukazuje, jak daleko je norma zdravého člověka v číselných termínech daleko od ukazatelů pacienta. Metoda umožňuje vyhodnotit stadium onemocnění a předepsat léčbu. Citlivost testu PCR v kvantitativním sledování je vyšší než v kvalitativní metodě. Základem je počet detekované DNA, který je vyjádřen v kopiích na mililitr nebo IU / ml.
Krevní test na hepatitidu B ve formě kvantitativní PCR dává pochopení stupně infekčnosti pacienta. Čím vyšší je skóre, tím vyšší je riziko šíření viru.
Kvantitativní PCR navíc poskytuje přehled o účincích léčby a správnosti zvolené terapie. V závislosti na množství virového genového materiálu může být učiněno rozhodnutí zkrátit dobu trvání léčby nebo ji naopak rozšířit a posílit.
Biochemický krevní test na hepatitidu B
Metoda biochemické analýzy je nutná k získání úplného klinického obrazu průběhu onemocnění. Tato diagnostická metoda umožňuje pochopení práce vnitřních orgánů (jater, ledvin, žlučníku, štítné žlázy a dalších). Dekódování dává pochopení metabolismu v těle, možných patologií metabolismu. Podrobné ukazatele indikují nedostatek vitamínů, makroživin a minerálů nezbytných pro lidské zdraví a život.
Pokud je podezření na hepatitidu B, testy nutně zahrnují biochemickou studii založenou na žilní krvi. V tomto případě věnujte zvláštní pozornost ukazatelům charakterizujícím práci jater a jejich možnému poškození.
Test na hepatitidu můžete provést v jakémkoli jiném diagnostickém centru (Invitro, Gemotest atd.). Biochemický krevní test pro detekci hepatitidy B zahrnuje následující složky.
Kvantitativní analýza enzymu ALT (AlAt)
Tento enzym se nejčastěji vyskytuje ve zvýšených koncentracích při akutní a chronické hepatitidě. Látka je obsažena v jaterních buňkách a s lézemi orgánů přes krevní oběh vstupuje do krevních cév.
Množství a koncentrace v krvi během virové nemoci se neustále mění, takže výzkum je prováděn alespoň jednou za čtvrtletí. ALT neodráží pouze aktivitu viru hepatitidy, ale také stupeň poškození jater. Hladina ALT se zvyšuje s rostoucím množstvím toxických látek jaterního původu a v přítomnosti viru.
Kvantitativní analýza AST-enzymu
Protein je součástí nejdůležitějších orgánů člověka: jater, nervové tkáně, tkáně ledvin, kostry a svalů. Enzym se podílí na budování nejdůležitějšího svalu - srdce. Vysoká AST u pacienta s hepatitidou B může signalizovat fibrózu jater. Podobná situace nastává, když alkoholické, lékové nebo jiné toxické poškození jaterních buněk.
Indikátory přehřátí jsou známkou poškození jater na buněčné úrovni. Při stanovení diagnózy je třeba vzít v úvahu poměr AST a ALT (de Rytisův koeficient). Současné zvýšení koncentrace obou enzymů je známkou nekrózy jater.
Bilirubin
Látka je tvořena ve slezině a játrech v důsledku rozpadu hemoglobinu v jejich tkáních. Tato součást je součástí žluči. Existují dvě proteinové frakce: přímý bilirubin (vázaný) a nepřímý bilirubin (volný). S nárůstem hladiny bilirubinu v krvi má smysl podezření na hepatitidu nebo jiné poškození jater. To přímo souvisí s cytolýzou jaterních buněk.
Bilirubin u lidí
Zvyšuje-li se množství nepřímého bilirubinu, je s největší pravděpodobností léze parenchymální tkáně nebo Gilbertova syndromu. Vysoká hladina bilirubinu podle výsledků analýzy může být způsobena obstrukcí žlučových cest. Když je hladina bilirubinu více než 30 mikromolů na litr, pacient vykazuje ikterický odstín kůže, moč se ztmaví a bílé oči mění barvu.
Albumin
Syntéza tohoto proteinu se vyskytuje v játrech. Pokud je jeho množství sníženo, znamená to pokles syntézy enzymů v těle v důsledku výskytu závažných lézí jaterních buněk.
Celkový protein
Pokud se množství celkového proteinu stane významně nižší než přijatá norma, pak to znamená zpomalení fungování jater.
Zvýšení hladiny bílkovin signalizuje zánětlivý proces v těle.
GGT (GGTP)
Enzym používaný při detekci obstrukční žloutenky a cholecystitidy. Zvýšení hladiny GGT je signálem toxického poškození jater. Může být provokován chronickým alkoholismem a nekontrolovaným užíváním drog. Protein je zvláště citlivý na toxiny a alkohol, pod jejich vlivem jeho aktivita rychle roste. Udržování vysoké koncentrace GGT v krvi po dlouhou dobu hovoří o závažném poškození jater.
Kreatinin
Je produktem metabolismu bílkovin, který se vyskytuje v játrech. Prudký pokles hladiny je signál, že orgán zpomaluje.
Proteinové frakce
Snížení hladiny proteinových frakcí je známkou patologie jater.
Dekódovací analýza pro hepatitidu B a hodnoty jsou normální
Diagnostika hepatitidy B je souhrnná studie ukazatelů. Pouze jejich komplexní analýza umožňuje vyvodit závěry o infekci pacienta. Zvažte dekódovací analýzu pro hepatitidu B. Pro srovnání, rychlost látek v krvi.
Míra kvantitativní analýzy hepatitidy B
DNA viru hepatitidy B, kvantitativní stanovení
Co je to kvantifikace DNA viru hepatitidy B?
HBV je komplexní virus obsahující DNA a patří do rodu Hepadnaviridae rodu Orthoepadnavirus.
Hepatitida B je antroponotická infekce, zejména s parenterálním mechanismem infekce, která se může vyskytovat ve formě virového transportu, akutních a chronických forem a je charakterizována poškozením jater s možným rozvojem akutního selhání jater, chronickou hepatitidou, cirhózou jater a primárním karcinomem jater (hepatocelulárním karcinomem).
K infekci lidského těla dochází přímým pronikáním HBV do krve (při jakýchkoli invazivních zákrocích a při transfuzi krve a jejích přípravcích), nebo prostřednictvím sliznic a kůže během porodu, během sexuálních a blízkých kontaktů v domácnosti. Jakmile je HBV v játrech, proniká hepatocytem, kde se rychle množí.
Vývoj infekčního procesu může probíhat dvěma způsoby: replikativní a integrativní. Replikativní forma infekce vede k rozvoji akutní nebo chronické hepatitidy a cirhózy jater, zatímco integrační forma vede k rozvoji zdravé virové infekce, neaktivní chronické hepatitidy, cirhózy jater a primárního hepatokarcinomu.
Sérologická diagnóza a prognóza infekce HBV je založena na detekci antigenů viru a protilátek proti němu. Jak se však ukázalo, dostatek mutantních kmenů (HBeAg-negativní) se nachází v populaci viru hepatitidy B, které nejsou detekovány konvenčními sérologickými testy. Proto je velmi důležitá metoda PCR pro diagnózu infekce HBV.
Kvantitativní stanovení DNA viru hepatitidy B pomocí PCR.
Analytické ukazatele: Detekce DNA viru hepatitidy B (virus hepatitidy B) metodou polymerázové řetězové reakce (PCR) a stanovení virové zátěže v krevní plazmě.
Identifikovaný fragment je jedinečná DNA sekvence genu strukturního proteinu viru hepatitidy B. Specifičnost stanovení je 98%. Citlivost detekce je od 2x105 IU / ml 5x103 kopií / ml virových částic séra.
Kvantitativní charakterizace obsahu DNA viru hepatitidy je důležitá pro hodnocení účinnosti antivirové terapie a má prognostickou hodnotu pro stanovení chronicity hepatitidy B: s počáteční nízkou hladinou virémie (HBV DNA je menší než 2x105 kopií / ml (2x105 IU / ml)) na nulu. Při koncentraci DNA HBV od 2x105 kopií / ml (2x105 IU / ml) do 2 x 10 kopií / ml (8x105 IU / ml) je proces pozorován u 25-30% pacientů a u pacientů s vysokou hladinou viramu (více než 2x10 kopií / ml). (8x105 IU / ml)) akutní hepatitida B se nejčastěji stává chronickou. 85% snížení koncentrace DNA viru hepatitidy B do třetího dne od zahájení léčby je rychlým a přesným parametrem k předpovědi účinnosti léčby.
Obtěžuje vás něco? Chcete znát podrobnější informace o DNA viru hepatitidy B, kvantifikaci nebo jiné testy? Nebo potřebujete navštívit lékaře? Můžete se domluvit s lékařem - klinika Eurolab je vám vždy k dispozici! Nejlepší lékaři vás prozkoumají, poradí, poskytnou nezbytnou pomoc a učiní diagnózu. Můžete také zavolat lékaře doma. Klinika Eurolab je otevřena nepřetržitě.
Jak kontaktovat kliniku:
Telefonní číslo naší kliniky v Kyjevě: (+38 044) 206-20-00 (multikanálové). Tajemník kliniky si vybere vhodný den a čas návštěvy u lékaře. Zde jsou uvedeny naše souřadnice a směry. Podívejte se podrobněji na všechny služby kliniky na své osobní stránce.
Pokud jste již dříve provedli nějaké studie, ujistěte se, že jste jejich výsledky konzultovali s lékařem. Pokud studie nebyly provedeny, uděláme vše potřebné na naší klinice nebo s našimi kolegy na jiných klinikách.
Musíte být velmi opatrní na své celkové zdraví. Existuje mnoho nemocí, které se zpočátku neprojevují v našem těle, ale nakonec se ukazuje, že jsou bohužel už příliš pozdě na léčení. Chcete-li to provést, musíte být vyšetřeni lékařem několikrát za rok. nejen proto, aby se zabránilo strašné nemoci, ale také udržet zdravou mysl v těle a těle jako celku.
Pokud se chcete zeptat lékaře, použijte sekci online konzultace. Možná tam najdete odpovědi na vaše otázky a přečtěte si tipy na péči o sebe. Máte-li zájem o recenze o klinikách a lékařech - zkuste najít potřebné informace na fóru. Zaregistrujte se také na zdravotním portálu Eurolab. držet krok s nejnovějšími novinkami a aktualizacemi na webu o DNA viru hepatitidy B, kvantifikaci a další analýzy na webu, které budou automaticky zaslány na váš e-mail.
Máte-li zájem o další testy, diagnostiku a služby klinik obecně, nebo máte další dotazy a náměty - napište nám. pokusíme se vám pomoci.
Znalostní báze: HBV, kvantifikovaná DNA [real-time PCR]
HBV, kvantifikovaná DNA [real-time PCR]
Studie k identifikaci původce hepatitidy B (HBV), během které je přítomnost genetického materiálu (DNA) viru a jeho množství (virová zátěž) ve vzorku krve stanovena metodou polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RT-PCR).
DNA HBV může být detekována při koncentraci mimo dolní hranici rozsahu lineární koncentrace. Rozsah lineární koncentrace je rozsah, ve kterém můžete přesně vypočítat počet kopií patogenu. Pro tuto analýzu je lineární rozmezí koncentrací HBV DNA stanovené detekčním zesilovačem 7,5 x 102 - 1,0 x 108 kopií / ml vzorku.
Virus hepatitidy B (HBV), kvantifikace DNA.
DNA viru hepatitidy B, kvantitativní PCR v reálném čase, krev; HBV Virová zátěž; DNA viru hepatitidy B Quant.
Řetězová reakce v reálném čase.
Kopie / ml (kopie na mililitr).
Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?
Jak se připravit na studium?
Nekuřte 30 minut před darováním krve.
Obecné informace o studii
Virová hepatitida B (HBV) je infekční onemocnění jater způsobené virem hepatitidy B obsahujícím DNA (HBV). Mezi všemi příčinami akutní hepatitidy a chronické virové infekce je virus hepatitidy B považován za jeden z nejběžnějších na světě. Skutečný počet infikovaných není znám, protože mnoho lidí má infekci bez specifických symptomů a nehledá lékařskou pomoc. Virus je často detekován během preventivních laboratorních testů. Podle hrubých odhadů je na světě asi 350 milionů lidí postižených virem hepatitidy B a 620 000 lidí zemře na jeho účinky každý rok. V Rusku přesahuje počet nosičů HBV 5 milionů lidí.
Zdrojem infekce je HBV pacient nebo asymptomatický nosič viru. HBV se přenáší krví a jinými tělními tekutinami. Můžete se nakazit nechráněným pohlavním stykem, použitím nesterilních injekčních stříkaček, transfuzí krve a transplantací dárcovských orgánů, dítě může být infikováno matkou během porodu nebo po porodu (praskliny v bradavkách). Riziková skupina zahrnuje: zdravotnické pracovníky, kteří mohou být v kontaktu s krví pacienta, pacienti, kteří dostávají hemodialýzu, injekční uživatele drog, osoby s promiskuitními sexuálními aktivitami, děti narozené matkám s HBV.
Inkubační doba onemocnění je od 4 týdnů do 6 měsíců. Virová hepatitida B se může vyskytovat ve formě mírných forem trvajících několik týdnů, stejně jako ve formě chronické chronické infekce. Hlavními příznaky hepatitidy jsou: žloutnutí kůže, horečka, nevolnost, únava, laboratorní testy - abnormální funkce jater a specifické antigeny viru hepatitidy B. Akutní onemocnění může rychle vést k smrti, jít do chronické infekce nebo ukončit úplné uzdravení. Předpokládá se, že po utrpení HBV vytvořila silnou imunitu. Chronická virová hepatitida B je spojena s rozvojem cirhózy a rakoviny jater.
Existuje několik specifických testů pro identifikaci existující nebo minulé virové hepatitidy B. Pro potvrzení přítomnosti infekce a pro objasnění doby onemocnění se používá definice virových antigenů, protilátek proti nim a virové DNA.
Polymerázová řetězová reakce je vysoce citlivá a specifická. PCR může být použita pro stanovení DNA viru kvalitativně nebo kvantitativně. Díky kvalitativní metodě je potvrzena přítomnost viru hepatitidy B v těle a jeho aktivní reprodukce. Kvantifikace virové zátěže vám umožní posoudit intenzitu vývoje onemocnění, účinnost léčby nebo rozvoj rezistence na antivirotika.
Existuje vztah mezi koncentrací viru v krvi a výsledkem akutní virové hepatitidy B. Při nízké úrovni virémie je pravděpodobnost, že se infekce stane chronickou, téměř nulová a infikovaná osoba je pro ostatní neškodná. Při vysoké virové zátěži (5 kopií / ml) dochází často k výskytu a pacient je potenciálním zdrojem infekce. Prokázaný vztah mezi množstvím virové DNA v séru, přítomností HBeAg, zvýšenou ALT a rozvojem cirhózy a hepatocelulárního karcinomu (rakovina jater).
Účinnost antivirové terapie se hodnotí snížením množství virové DNA v krvi. 3-6 měsíců po zahájení léčby by měla být virová zátěž s odpovídající terapeutickou odpovědí snížena o 1-2 řády. Absence snížení počtu virů nebo jeho zvýšení na pozadí požadované léčby vyžaduje přehodnocení a změnu terapie.
Kvantitativní stanovení DNA viru hepatitidy B spolu s klinickým obrazem onemocnění a biochemických ukazatelů, markerů infekce a výsledku jaterní biopsie umožňuje předvídat onemocnění a vyhodnotit potřebu antivirové terapie.
Na co se používá výzkum?
- Předikce průběhu virové hepatitidy B.
- Potvrdit chronickou formu virové hepatitidy B.
- Identifikovat nosiče virové hepatitidy B a sledovat reprodukční aktivitu viru.
- Identifikace skrytých a mutantních kmenů hepatitidy B.
- Posoudit účinnost antivirové léčby hepatitidy B a rozhodnout o další taktice léčby.
Kdy je naplánována studie?
- S vysoce kvalitní DNA detekcí viru hepatitidy B.
- U akutní a chronické virové hepatitidy B.
- Při smíšené hepatitidě.
- Před a během antivirové terapie.
Co znamenají výsledky?
- Nebyla zjištěna - nebyla detekována žádná DNA viru hepatitidy B nebo hodnota je pod mezí citlivosti metody (200 kopií / ml = 90 IU / ml).
- 10 ^ 5 kopií / ml (2x10 ^ 4 IU / ml) - vysoká virová zátěž, aktivní infekční proces (je nutná antivirová léčba).
- 1,0 x 108 kopií / ml (4,8 x 10 7 IU / ml) - DNA viru hepatitidy B byla detekována při koncentraci nad rozsahem lineární koncentrace.
Lineární rozmezí koncentrací DNA viru hepatitidy B stanovené detekčním zesilovačem je 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kopií / ml (3,6 x 106 - 4,8 x 10 7 IU / ml).
Co může ovlivnit výsledek?
- Kvantitativní stanovení DNA viru hepatitidy B je povinná studie před jmenováním antivirové terapie. V průběhu léčby musí být analýza opakována po 3-6 měsících.
- Virová hepatitida B je často kombinována s virovou hepatitidou D.
Kdo studuje?
- Zh.I. Vozianova Infekční a parazitární nemoci: ve 3 tunách - K. Health, 2000 - T.1. 601-654.
- Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling a další. DNA virus hepatitidy B Reagencie hepatitidy B Hepatitida B Říjen 2003; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
- Harrisonovy principy vnitřního lékařství. 16. vydání. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
- Řízení hepatitidy B. Konference o vývoji konsenzu NIH. Program a souhrny. 20. - 22. října 2008.
Jaké jsou normy pro kvantifikaci hepatitidy C?
Virus hepatitidy C je schopen se množit v krevních buňkách a způsobovat lymfoproliferativní onemocnění. Vzhledem k vícenásobným mutacím oslabuje imunitní obrana těla, objevují se genotypy a podtypy viru. Při správném a včasném určení konkrétního typu závisí účinnost antivirové terapie. Nebezpečí infekce je, že nemoc je asymptomatická. Pouze 15 procent ze 100 může zažít nevolnost a zvracení, ztrátu hmotnosti a horečku.
Detekce viru hepatitidy C
Standardní rychlost hepatitidy C je ve velikostech od 40 do 60 nm, s většinou lipidů, poškození jater v důsledku akutního nebo chronického průběhu onemocnění. Hepatitida C, totiž RNA virus rodiny Togaviridae, je extrémně rezistentní, je přenášena transfuzí krve nebo použitím nesterilních předmětů, nesprávných hygienických potřeb atd. Kvantitativní analýza vám umožňuje vyšetřovat krev a identifikovat genetickou strukturu infikovaného viru.
Pro stanovení hepatitidy C a jejích genotypů proveďte kvantitativní analýzu. V závislosti na analyzátoru lze určit tři úrovně výskytu viru RNA.
Subtypy mohou produkovat různé modifikace, takže specifičnost a citlivost analyzátoru musí být sto procent. Kromě detekce onemocnění u pacienta je nutné určit stupeň jeho závažnosti. Některé laboratoře nemají všechna data o dekódování viru RNA, existuje možnost falešně pozitivní reakce.
Výzkum hepatitidy C bude přesnější při studiu těchto ukazatelů:
V návaznosti na výsledky těchto ukazatelů a celkový stav těla je zobrazen výsledek ukazující stupeň infekce, tvar a počet buněk hepatitidy C v krvi. To přispívá k procesu hojení a účinnosti antivirové terapie.
Druhy analýzy hepatitidy C
Vícerozměrná řetězová reakce (PCR) poskytuje představu o počtu částic DNA v provedených analýzách pacientů, přičemž správně identifikuje infekční agens.
Mohou se objevit původci infekčních onemocnění. Takové infekční onemocnění jater, jako je hepatitida C, je v současné době léčitelné, pokud je včas detekováno. Pokud je podezření na virus, provede se PCR analýza.
Vzhledem k tomu, že příznaky viru mohou být dlouho maskované, člověk nemusí pociťovat nástup onemocnění. Ale s důkladným vyšetřením v 60–70% případů je detekována hepatitida C, první analýza, kterou je ELISA, pak následuje PCR diagnostika. Analýza se provádí v určitých obdobích, aby se určilo stadium onemocnění a předepsala se příslušná léčba. Bez něj, bez použití všech těchto postupů, je možné očkování proti hepatitidě.
Analýza, včetně PCR diagnostiky, poskytuje obraz onemocnění, jak je virus aktivní v různých obdobích vývoje.
Za prvé, existuje kvalitativní analýza, která pouze potvrzuje hypotézu o infekci, a pak kvantitativní, určující zatížení jater. Ideální volba by byla negativním výsledkem pro hepatitidu C v genetickém materiálu pacienta.
Kvalitativní a kvantitativní analýza
Existují kvalitativní a kvantitativní analýzy. Podstatou první je, že určuje přítomnost infekce v krvi. A to znamená, že virus infikuje zdravé jaterní buňky. Pokud se u pacienta objeví protilátky proti hepatitidě C, provede se kvalitativní test. Míra, že výsledek by měl být "není detekován v krvi". Při určování koncentrace viru je třeba znát citlivost diagnostického systému, protože lidé, kteří podstupují antivirovou léčbu, mohou provést analýzu. Stupeň citlivosti analyzátoru by neměl být menší než 50 IU / ml.
Když je virus detekován, provede se kvantitativní analýza, jinými slovy virová zátěž, která určuje koncentraci viru v krvi a závažnost onemocnění.
Virová RNA, která je v určitém množství krve, je definována jako norma v poměru 1 ml na 1 centimetr krychlový. Po vyčíslení virové zátěže je možné posoudit stupeň infekce dosud neinfikovaného prostředí. Jakmile se v krvi zvýší koncentrace hepatitidy C, je nezbytné izolovat se od životního prostředí.
V počátečních fázích je důležité zjistit stupeň koncentrace hepatitidy, aby se určilo tempo rehabilitace. Pokud je míra hepatitidy C překročena o více než 800 tisíc IU / ml, je to považováno za příliš vysoké, s nárůstem až na jeden milion - kritický. Pokud je kvantitativní rozmezí menší než 400 tisíc IU / ml, má se za to, že infekce těchto pacientů bude méně pravděpodobná. Toto číslo jasně ukazuje, že hepatitida C je v těle přítomna ve velmi malých dávkách. Analýza nemohla určit kvantitativní hodnotu RNA částic viru, takže je několikrát opakovaně označena pro přesnost diagnózy.
Výsledky kvantitativní analýzy
Úkolem stanovení množství virové zátěže v krvi pacienta je identifikace stupně infekce u ostatních.
Analýza hepatitidy C umožňuje vyhodnotit účinnost antivirové terapie, míru infekčnosti a počet infikovaných tkání.
Je důležité zabránit progresi onemocnění, včas přijmout preventivní opatření, předepsat správnou léčbu založenou na diagnostice PCR. Pokud je podle výsledků úroveň virové zátěže nižší než 400 tisíc IU / ml, může být koncentrace minimální, což naznačuje možné úplné zotavení. Norma pro pozitivní výsledek je absence infekce.
- Pozitivní odpověď znamená infekci v biologickém materiálu. Analýza umožňuje stanovit přesný počet infikovaných buněk.
- Negativní odpověď naznačuje absenci infekce, která je v těle pečlivě vyhledávána.
Metoda kvantitativního stanovení hepatitidy C je přesná a informativní, prováděná na zařízeních s vysokou citlivostí. Rozluštění výsledků analýzy vám umožní zjistit, zda je infekce a její specifičnost vidět nejmenší počet infikovaných buněk na vysoce citlivých analyzátorech.
Falešně pozitivní nebo opačné výsledky jsou jen zřídka dané analýzou, častěji se to děje v imunoanalytických studiích.