Princip Počítání leukocytů během mikroskopie v určitém počtu čtverců počítací komory a výpočet jejich počtu v 1 litru krve, s přihlédnutím k ředění krve a objemu počítací komory.
Činidlo: 3-5% roztok kyseliny octové, zbarvený pro barvení jader leukocytů několika kapkami roztoku methylenové modři. Roztok má modrou barvu, může být skladován po dlouhou dobu.
Průběh odhodlání. V suché zkumavce nalijte 0,4 ml roztoku kyseliny octové. Z prstu se odebere 0,02 ml krve (můžete použít antikoagulačně stabilizovanou žilní krev). Otřete špičku pipety, pak z ní vyfoukejte krev na dno zkumavky, promíchejte, znovu vytřepejte a vyfoukněte směs krve a činidla (pipetování). Trubku označte a nechte ji počítat. Uchovávejte směs krve s roztokem kyseliny octové do 2 - 4 hodin.
Krev naředěná v zkumavce kyselinou octovou, důkladně promíchejte a naplňte ji počítací komorou. Naplněná komora se ponechá v horizontální poloze po dobu 1 minuty, aby se usadily bílé krvinky. Bez změny horizontální polohy kamery ji umístí na stůl mikroskopu a při malém zvětšení (okulár 10 ×, čočka 8 ×) spočítá bílé krvinky ve 100 velkých čtvercích, což odpovídá 1600 malým.
Pro větší přesnost jsou leukocyty počítány napříč mřížkou ve velkých čtvercích, které nejsou rozděleny na malé čtverce a proužky, počínaje levým horním rohem mřížky. Pro lepší kontrast ztmavte zorné pole, upusťte kondenzátor a zavřete clonu. Buňky umístěné uvnitř čtverce a ležící na jakýchkoli dvou řádcích se počítají, aby se nepočítaly stejné buňky dvakrát.
Výpočet počtu buněk se provádí podle vzorce:
kde X je počet leukocytů v 1 μl krve; a - počet leukocytů ve 100 velkých čtvercích; 20 - ředění krve; 100 je počet velkých čtverců; 250 je konverzní faktor na 1 μl, protože objem jednoho velkého čtverce je 1/250 μl (strana čtverce je 1/5 mm, výška je 1/10 mm).
V praxi se pro výpočet počtu leukocytů v 1 μl krve jejich počet ve 100 velkých čtvercích vynásobí 50 a v 1 litru - výsledná hodnota se vynásobí 106.
Poznámka Při počítání leukocytů je chyba nevyhnutelná v 6–8% případů.
- S velkým počtem normocytů v periferní krvi se počítají v počtu leukocytů (jak leukocytů, tak normocytů - nukleových buněk). Aby se správně stanovil počet leukocytů, měl by celkový počet nukleocytů z celkového počtu nukleových buněk odečíst počet normocytů.
- Zbývající chyby jsou podobné chybám, které vznikají při výpočtu počtu červených krvinek v počítací komoře.
Počet leukocytů
Metoda počítání ve fotoaparátu. Odběr a ředění krve vyrobené metodou zkumavky. Do zkumavky se zavede 0,4 ml zřeďovací kapaliny a 0,02 ml kapilární krve (s výhodou Vidalevskaya). Výsledné ředění je prakticky považováno za 1:20 3. Jako ředidlo se obvykle používá 3 - 5% roztok kyseliny octové, tónovaný methylenovou modří, jako ředidlo (kyselina octová lyzuje erytrocyty, methylenová modř barví jádra leukocytů). Před naplněním komory se Goryaeva trubice se zředěnou krví důkladně protřepe. Komora se plní stejným způsobem jako při počítání červených krvinek.
Leukocyty jsou mnohem menší než erytrocyty (1–2 na velký čtverec), proto jsou pro přesnost počítány ve 100 velkých čtvercích (netříděných). Výpočet: 100 velkých čtverců (1600 malých) se spočítá jako leukocyt.
Při zapamatování, že objem malého čtverce je 1/4000 mm3 a krev je 20krát zředěna, je počet leukocytů v 1 μl krve vypočítán: 4000 20 a děleno 1600 = a x 1/2. Pro získání skutečného obsahu leukocytů v 1 μl krve stačí prakticky rozdělit na polovinu počet získaný ve výpočtu a přidat 2 nuly. Průměrná chyba metody je ± 7%.
Přesnější (2-3% chyba) a perfektní je počet leukocytů pomocí elektronických zařízení. Počítání leukocytů v počítačích částic se provádí podle stejného principu jako erytrocyty. Předběžná krev se zředí a smísí s jakýmkoliv činidlem, které rozkládá červené krvinky. V automatickém analyzátoru „Technicon“ se používá roztok kyseliny octové jako takový, v přístrojích „Culter“ a „Celloskop“ - saponin nebo sapoglobin, které se přidají naředěné (1: 500, 1: 700) v isotonickém roztoku chloridu sodného (6 kapek na 20 ml). šlechtění).
Počítání krevních leukocytů se provádí v barvených periferních krevních stěrech.
Je lepší počítat v nejtenčím místě poblíž konce stěrky, nejméně 200 buněk (s výjimkou výrazné leukopenie), a pak odvodit procentuální poměr určitých typů bílých krvinek. Počítání se doporučuje ve stejném pořadí: polovina buněk by se měla počítat nahoře, napůl na konci úderu, aniž by šla na samotný okraj a střed, cikcak (3-4 pole pohledu podél tahu, 3-4 pole v pravém úhlu ke středu tahu, pak 3-4 pole na stranu rovnoběžnou s hranou, opět v pravém úhlu nahoru a tak dále na jednu stranu).
Příprava nátěrů. Pečlivě umyté a odtučněné sklo (jeho okraj) se dotýká kapky krve v místě vpichu injekce. Skvrnu tvoří brusné sklo tak, že je pod úhlem 45 ° k skluzu před kapkou. Poté, co do této kapky přinesli sklenici, čekají, až se krev rozšíří podél jejího okraje, a rychle rychlým pohybem provádějí brousicí sklo dopředu, aniž by ho odnášeli od předmětu předtím, než vyschne celou kapku.
Správně zhotovený nátěr má nažloutlou barvu (tenkou), nedosahuje okrajů skla a končí stopou (knírkem).
Barvení suchých nátěrů po předběžné fixaci. Nejlepší fixace se dosáhne v absolutním methylenalkoholu (3-5 minut) nebo ve směsi Nikiforova o stejných podílech absolutního ethanolu a etheru (30 minut).
Mezi hlavní hematologické barvy patří methylenová modř a její derivát - azurový I (methylen azurový) a azurový II (směs stejných částí azurové I a methylenové modři) až kyselý eozin rozpustný ve vodě.
● Malování Romanovským-Giemsou. Barva Romanovsky-Giemsa (z výroby) má následující složení: Azur II - 3 g, ve vodě rozpustný žlutý eosin - 0,8 g, methylalkohol - 250 ml a glycerin - 250 ml. Pracovní nátěrový roztok se připraví rychlostí 1,5-2 kapek hotové barvy na 1 ml destilované vody. Barva se nalije na nátěr s pravděpodobně vyšší vrstvou; doba barvení - 30-35 minut Po této době se tampony promyjí vodou a suší na vzduchu. Tímto způsobem může být jádro dobře diferencované, ale neutrofilní granularita cytoplazmy je mnohem horší, takže je široce používána pro barvení periferního krevního nátěru.
● Kombinované barvení May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa podle Pappenheima. Hotové barvivo, fixační přípravek May-Grunwald, který je roztokem eosinmethylenové modři v methylenalkoholu, se pipetuje na fixovaný nátěr po dobu 3 minut. Po 3 minutách se do barvy, která pokrývá roztok, přidá stejné množství destilované vody a zbarvení pokračuje další 1 minutu. Poté se barva vymyje a nátěr se vysuší na vzduchu. Poté se vysušený nátěr znovu natírá čerstvě připraveným vodným roztokem Romanovského barvy po dobu 8-15 minut. Tato metoda je považována za nejlepší, zejména u nátěrů punkcí kostní dřeně.
Zvýšení počtu leukocytů v periferní krvi nad normální hladinu se nazývá leukocytóza, pokles se nazývá leukopenie. Leukocytóza (leukopenie) je vzácně charakterizována proporcionálním zvýšením (poklesem) počtu leukocytů všeho druhu, například leukocytózou se zhrubnutím krve. Ve většině případů dochází ke zvýšení počtu (snížení) jednoho typu buňky. Zvýšení nebo snížení počtu jednotlivých typů leukocytů v krvi může být relativní nebo absolutní, v závislosti na celkovém počtu leukocytů - normální, zvýšené nebo snížené. Změna počtu, poměru jednotlivých forem a morfologie leukocytů závisí na typu a virulence patogenu, povaze, průběhu a rozsahu patologického procesu, individuální reakci organismu.
Metoda počítání leukocytů v Goryaevově komoře
Bílé krvinky - bílé krvinky - hrají hlavní roli v antimikrobiální ochraně těla. Granulocyty fagocytují mikroby a ničí je pomocí enzymů uzavřených v granulích, lymfocyty produkují protilátky a poskytují imunitní odezvu na tělo.
Metoda stanovení zkumavky metoda: nalijte do zkumavky 0,4 ml roztoku Trk (Türkova kapalina obsahuje kyselinu octovou k ničení červených krvinek a methylenové modři pro barvení jader leukocytů). Použijte kapilární pipetu k natažení 0,02 ml krve z čerstvé kapky, jemně ji vyfoukněte do zkumavky s činidlem a propláchněte pipetu. Dobře promíchejte. Současně je ředění krve 20krát vyšší. Na konci kulaté skleněné tyčinky se odebere kapka zředěné krve a nanese se na okraj leštěné skleněné komory.
Počítání se provádí ve 100 velkých nepřerušovaných čtvercích, které dohromady tvoří čtyři. Použil se malý nárůst.
Odvození počítadla vzorce 1.
1. 100 čtverců obsahuje 1600 malých čtverců (16x 100)
2. Objem krve nad malým čtvercem 1/4000 mm3
3. Zředění krve 20krát
Počet leukocytů v 1 μl krve = při -4000-20. = Ax 50
Například: 130 leukocytů bylo spočítáno ve 100 velkých čtvercích mřížky Goryaev. V 1 μl krve bude počet leukocytů 130 x 50 = 6500 nebo 6,5-103.
Aby se stanovil obsah leukocytů v 1 litru krve, musí být počet leukocytů vyjádřený v tisících násoben 10,9.
V našem příkladu je počet leukocytů v 1 litru krve 6,5-109.
194.48.155.245 © studopedia.ru není autorem publikovaných materiálů. Ale poskytuje možnost bezplatného použití. Existuje porušení autorských práv? Napište nám Zpětná vazba.
Zakázat adBlock!
a obnovte stránku (F5)
velmi potřebné
Počet leukocytů v krvi
Leukocytóza může být absolutní (pravdivá) a relativní (redistribuční).
Absolutní leukocytóza je pozorována u akutních zánětlivých procesů, nekrózy tkání, akutních bakteriálních infekcí (s výjimkou tyfové horečky, brucelózy, tularemie atd.), Alergických stavů, maligních nádorů (s destrukcí tkání), poranění hlavy a krvácení v mozku, diabetu. uremická kóma, šok, akutní ztráta krve, jako primární reakce - s radiační nemocí. Významný nárůst počtu leukocytů se vyskytuje u leukémie.
Relativní (redistribuční) je důsledkem přijetí leukocytů v krevním oběhu z orgánů, které slouží pro její depot. Vyskytuje se po jídle (leukocytóza potravy), horkých a studených lázních, silných emocích (vegetovaskulární leukocytóza), intenzivní svalové práci (myogenní leukocytóza) atd.
Leukopenie Leukopenie je považována za indikátor inhibice funkční schopnosti kostní dřeně v důsledku expozice toxickým látkám (arsen, benzen atd.), Některým lékům (sulfanilamidy, chloramfenikol, butadion, imuno, cyklofosfamid atd.), Virům (chřipka, virová hepatitida)., spalničky atd.), mikroby (tyfus, brucelóza atd.), ionizující záření, rentgenové paprsky a hypersplenismus (zvýšená funkce sleziny).
Leukocytóza a leukopenie jsou vzácně charakterizovány proporcionálním zvýšením (poklesem) celkového počtu leukocytů všech typů (například leukocytóza se zhrubnutím krve); ve většině případů dochází k nárůstu (poklesu) počtu jakéhokoli typu buněk, proto se používají termíny „neutrofilie“, „neutropenie“, „lymfocytóza“, „lymfopenie“, „eosinofilie“, „eosinopenie“, „monocytóza“, „monocytopenie“., "Basophilia."
Při klinickém hodnocení změn v počtu leukocytů je velký význam přikládán procentuálnímu poměru jednotlivých forem leukocytů, tj. Vzorce leukocytů.
Počet leukocytů v krvi zdravého člověka:
Relativní množství Absolutní množství
Basofily ……………………….0-1% 0-0,0650 x 10 9 / l
Eosinofily …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l
Neutrofily: - myelocyty............ 0% chybí
- bodl... 1 až 6% 0,040 až 0,300 x 10 9 / l
- segmentová….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l
Lymfocyty …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / l
Monocyty ………………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / l
Počítání leukocytů se provádí v obarvených stěrech periferní krve. Pro správnou interpretaci výsledků studia leukocytárního vzorce se doporučuje počítat v absolutních množstvích, nikoli však v relativních. Nejběžnější metody malování stěr Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Při ponoření se počítá nejméně 200 buněk a potom se odvozuje procentuální poměr určitých typů leukocytů. Analýza leukogramu s přihlédnutím k ostatním krevním parametrům a klinickému obrazu je cennou metodou vyšetření, pomáhá při diagnostice a stanovení prognózy onemocnění.
Hlavní příčiny neutrofilie.
Akutní bakteriální infekce - lokalizované a generalizované.
Zánět nebo nekróza tkáně.
Léčivé účinky (kortikosteroidy).
Hlavní příčiny neutropenie.
Infekce - bakteriální (tyfus, brucelóza, tularemie, paratyphoidní horečka) a virové (infekční hepatitida, spalničky, chřipka, rubeola a další).
Myelotoxické účinky a potlačení granulocytopoézy (ionizující záření; chemické látky - benzen, anilin, DDT; léčivé účinky - cytostatika a imunosupresiva; vitamín B)12-anémie z nedostatku kyseliny listové, akutní aleukemická leukémie, aplastická anémie).
Expozice protilátek (imunitní formy) - přecitlivělost na léky, autoimunitní onemocnění (SLE, revmatoidní artritida, chronická lymfatická leukémie), izoimunitní projevy (hemolytické onemocnění novorozence).
Redistribuce a depozice v orgánech - šokové stavy, nemoci se splenomegálií a hypersplenismem.
Dědičné formy (familiární benigní chronická neutropenie).
Hlavní příčiny eosinofilie.
Parazitární invaze (trichinóza).
Chronické kožní léze - lupénka, pemfigus, ekzém.
Nádory (eozinofilní varianty leukémie).
Další onemocnění - fibroplastická endokarditida Lefflera, šarlatová horečka.
Ve fázi zotavení infekcí a zánětlivých onemocnění (příznivý prognostický znak).
Příčiny eosinopenie (aneosinofilie).
Zvýšená aktivita adrenokortikosteroidů v těle.
Hlavní příčiny bazofilie:
Chronická myeloidní leukémie a erytrémie.
Hlavní příčiny monocytózy.
Subakutní a chronické bakteriální infekce.
Parazitární infekce - leishmanióza, malárie.
Hemoblastóza - monocytová leukémie, lymfogranulomatóza, lymfomy.
Dalšími podmínkami jsou SLE, sarkoidóza, revmatoidní artritida, infekční monocytóza; v období zotavení z infekcí, při opuštění agranulocytózy, po splenektomii.
Snížení počtu monocytů je důležité zejména při hodnocení poměru lymfocytů a monocytů u plicní tuberkulózy.
Hlavní příčiny lymfocytózy.
Infekce - akutní virová (infekční mononukleóza, spalničky, rubeola, neštovice), chronická bakteriální (tuberkulóza, syfilis, brucelóza), protozoální (toxoplazmóza).
Hemoblastóza (lymfocytární leukémie, lymfom).
Další nemoci - hypertyreóza, Addisonova choroba, vitamin B12-anémie z nedostatku folikulu, hypo- a aplastická anémie.
Lymfocytopenie je pozorována u SLE, Hodgkinovy choroby, rozšířené tuberkulózy lymfatických uzlin, v terminálním stadiu selhání ledvin, akutní radiační nemoci, stavů imunodeficience, při užívání glukokortikoidů.
Zvýšení nebo snížení počtu určitých typů leukocytů v krvi může být relativní nebo absolutní. Pokud se jedná pouze o procento určitého typu změn bílých krvinek, pak dochází k relativní neutrofilii, relativní eozinopenii atd. Zvýšení nebo snížení absolutního obsahu jakéhokoliv typu leukocytů, tj. Počtu těchto buněk na jednotku objemu krve, se nazývá absolutní neutrofilie, absolutní eozinopenie atd.
Posunutí vzorce doleva (zvýšení počtu mladých forem neutrofilů) je známkou zánětu nebo nekrotického procesu v těle.
Posun vzorce leukocytů doprava je charakteristický pro radiační nemoc a vitamin B12-anémie z nedostatku kyseliny listové.
Absence nebo významné snížení počtu všech typů granulovaných leukocytů - granulocytů (neutrofilů, eozinofilů, bazofilů) je označováno termínem agranulocytóza. V závislosti na mechanismu výskytu se rozlišují myelotoxika (účinky ionizujícího záření, cytostatický příjem) a imunita (hapten a autoimunitní agranulocytóza).
Leukocyty (leukocytus)
Leukocyty. Kvantitativní stanovení leukocytů. Počítání leukocytů pomocí kamery Goryaeva. Kvantitativní obsah leukocytů. Leukocytóza.
Bílé krvinky
Počet leukocytů v krvi závisí jak na rychlosti jejich tvorby, tak na jejich mobilizaci z kostní dřeně, jakož i na jejich využití a migraci do tkání (na léze), zachycení plic a sleziny. Tyto procesy jsou zase ovlivňovány řadou fyziologických faktorů, a proto počet leukocytů v krvi zdravého člověka podléhá výkyvům: stoupá do konce dne, během fyzické námahy, emočního stresu, příjmu potravy bílkovin a prudkých změn teploty okolí.
Kvantitativní stanovení leukocytů
Leukocyty se počítají pomocí kamery Goryaev a pomocí automatických čítačů.
Počítání leukocytů pomocí kamery Goryaeva
In vitro metodou odběru krve do počtu leukocytů:
- Do zkumavky se nalije 0,4 ml 3 až 5% roztoku kyseliny octové s methylenovou modří. Použijte kapilární pipetu k odebrání 20 μl krve z čerstvé kapky (ředění 20krát), opatrně vyfoukněte do zkumavky s činidlem a propláchněte pipetu. Dobře promíchejte;
- čisté a suché krycí sklo se vtírá do komory tak, aby se v místě dotyku vytvořily duhové prstence;
- krev zředěná v zkumavce, dobře promíchejte. Konec kulaté skleněné tyčinky vezme kapku krve a přivede ji na okraj leštěného skla komory;
- po naplnění komory se nechá 1 min v klidu pro sedimentaci leukocytů;
- Leukocyty jsou zvažovány u nízkého zvětšení (cíl × 8 nebo × 9, okulár × 10 nebo × 15) s tmavým zorným polem (se sníženým kondenzátorem nebo zúženou bránicí);
- pro uspokojivé výsledky jsou leukocyty počítány ve 100 velkých čtvercích.
Znáte-li objem velkého čtverce a stupeň ředění krve, zjistěte počet leukocytů v 1 μl a 1 l krve. Strana velkého čtverce je 1/5 mm, plocha je 1/25 mm2, objem prostoru nad tímto čtvercem je 1/250 mm3.
Vzorec pro počítání bílých krvinek:
kde B je počet leukocytů ve 100 velkých čtvercích;
P - stupeň ředění (20).
Počet leukocytů
Norma: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Zvýšení počtu leukocytů nad 9,0 × 10 9 / l se nazývá
leukocytóza, pokles jejich počtu pod 4,0 × 10 9 / l - leukopenie. Normálně však může být i 3,5 × 109 v 1 l leukocytů u řady jedinců. Podle literatury tito lidé mají zvýšenou imunitní odolnost a je méně pravděpodobné, že onemocní, což se zdá být způsobeno potřebou imunitní odpovědi, která má rezervu leukocytů ve tkáních, kde je 50–60krát více než v krevním řečišti. Je zřejmé, že u zdravých jedinců s nízkým počtem bílých krvinek v periferní krvi se jejich zásoby v tkáních odpovídajícím způsobem zvyšují. Tento jev je vysvětlen dědičným a rodinným charakterem nebo zvýšením vlivu parasympatického nervového systému.
Leukopenie může být funkční a organické.
Funkční leukopenie je spojena s dysregulací tvorby krve a je pozorována:
- s některými bakteriálními a virovými infekcemi (tyfová horečka, chřipka, neštovice, rubeola, Botkinova choroba, spalničky);
- působením léků (sulfonamidy, analgetika, antikonvulziva, antithroidní, cytostatická a jiná léčiva);
- během svalové práce, zavedení cizích proteinů, nervových a teplotních efektů, hladovění, hypotonických stavů;
- falešná leukocytopenie může být spojena s agregací leukocytů během dlouhodobého skladování krve při pokojové teplotě (více než 4 hodiny).
Organická leukopenie vyplývající z aplazie kostní dřeně a její nahrazení tukovou tkání nastává, když:
- aplastickou anémii;
- agranulocytóza;
- leukopenickou leukémii;
- některé formy Hodgkinovy choroby;
- ionizující záření;
- hypersplenismus (primární a sekundární);
- onemocnění kolagenu.
Leukocytóza
Leukocytóza je reakce hematopoetického systému na účinky
exogenní a endogenní faktory. Existují fyziologické a patologické leukocytózy.
Fyziologická leukocytóza je:
- zažívací - po jídle, zejména s vysokým obsahem bílkovin; počet leukocytů nepřekračuje 10,0–12,0 × 10 9 / l a po 3–4 hodinách se vrátí do normálu;
- s emocionálním stresem (adrenalin), těžkou fyzickou námahou, ochlazením, nadměrným slunečním zářením (spálení sluncem), podáním řady hormonů (katecholaminů, glukokortikosteroidů atd.), ve druhé polovině těhotenství, během menstruace a v důsledku nerovnoměrné distribuce leukocytů v krvi hlavního proudu.
Patologická leukocytóza je rozdělena na absolutní a relativní.
Absolutní leukocytóza - zvýšení počtu leukocytů v krvi až na několik set tisíc (100,0–600,0 × 10 9 / l a více).
- Nejčastěji pozorované u leukémie: u chronické leukémie - v 98-100% případů, s akutní leukémií - v 50-60%. Změna poměru leukocytových buněk v kostní dřeni a vpichu krve je základem pro diagnostiku leukémie.
Je pozorována relativní leukocytóza:
- akutní zánětlivé a infekční procesy, s výjimkou tyfové horečky, chřipky, neštovic, rubeoly, Botkinovy choroby, spalniček. Největší leukocytóza (až 70,0–80,0 × 10 9 / l) je pozorována při sepse;
- pod vlivem toxických látek (hmyzí jedy, endotoxiny), ionizujícího záření (bezprostředně po ozáření);
- v důsledku působení kortikosteroidů, adrenalinu, histaminu, acetylcholinu a preparátů digitalisu;
- s tkáňovou dezintegrací (nekrózou), infarktem myokardu, trombózou periferních tepen s rozvojem gangrény, popáleninami, exsudativní pohrudnice, perikarditidou, urémií, jaterní kómou;
- významná ztráta krve při poranění, vnitřní, gynekologické a jiné krvácení.
Nárůst počtu leukocytů u infekčních onemocnění je ve většině případů doprovázen posunem vzorce leukocytů doleva.
Počet leukocytů a počet leukocytů.
K počítání leukocytů se krev ředí v mixérech nebo ve zkumavkách. K tomuto účelu použijte 3-5% roztok kyseliny octové (pro destrukci červených krvinek), tónovaný jakýmkoliv barvivem anilinu (pro barvení jader leukocytů). Počítadlo je vyplněno stejným způsobem jako počítání červených krvinek. Leukocyty se počítají ve 100 velkých čtvercích. V mřížce Goryaev je vhodné spočítat je v neporušených čtvercích (na mřížce je jich 100). Vzhledem k ředění krve a objemu tekutiny nad čtverci vypočítejte konstantní násobitel. Při chovu 20 krát to je 50.
Při práci se zkumavkami do nich předem nalijeme 0,38 ml kapaliny a uvolní do ní 0,02 ml krve. Pro výpočet automatického počítání ve zkumavkách se červené krvinky hemolyzují saponinem. Normální počet bílých krvinek je 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l, nebo 4300-11 300 v 1 μl krve.
Počet leukocytů počítaný ve zbarvených stěrech.
Dobrý stěr splňuje následující požadavky: je tenký a tvarované prvky v něm leží v jedné vrstvě; v tomto případě je stěr žlutý a průsvitný. Dobrý stěr je jednotný a buňky nejsou poškozeny rozmazáním. K tomu, aby krev na skle ležela rovnoměrně, je odmaštěna spalováním plynového hořáku nad plamenem nebo uchovávaná ve směsi alkoholu a etheru. S koncem sklenice se dotýkají čerstvě uvolněné malé kapky krve a neprodleně ji rozloží na sklo. Před barvením se stěr fixuje ponořením do methanolu po dobu 3 minut, v ethanolu nebo jeho směsi s etherem po dobu 30 minut. Existuje řada dalších fixátorů. Tampón vysušený po fixaci se naplní barvivem.
Chcete-li rozlišit krevní buňky (definice leukocytů vzorec) uchýlit k diferenciální barvení. Nejrozšířenější barvení Romanovsky-Giemsa. Toto barvivo je směs slabě kyselých (eosin) a slabě alkalických (azure II) barev. Buňky a jejich části, v závislosti na reakci média, vnímají jednu nebo jinou složku barviva v nich: kyselé (basofilní) látky jsou zbarvené azurově modré, alkalické (oxyfilní) barevné eosiny červené; Neutrální vnímání obou barev a fialové.
Vzorec leukocytů označuje procento jednotlivých forem krevních leukocytů.
Pozn.: Pro dostatečně přesný výpočet je nutné vidět nejméně 200 bílých krvinek.
Počítání se provádí pomocí ponorného systému. Vzhledem k tomu, že buňky jsou nerovnoměrně umístěny ve stěrku (větší přecházejí na hrany), je důležité dodržet takový pohyb pohybu na stěru, ve kterém by jeho okraje a střední oblast byly pozorovány stejně. Použije se jedna ze dvou metod pohybu: jedna z nich posouvá tah od horního okraje ke spodnímu, posouvá ho o 2 až 3 zorné pole podél okraje, pak jde opačným směrem k hornímu okraji atd. Ve druhé metodě se pohybují od okraje o 5 - 6 polí do středu mrtvice, pak stejné množství bokem, pak zpět k okraji, pohybovat stranou několik polí na stranu a opakovat pohyb znovu, dokud se nepočítá 50 buněk. Zobrazení 4 z těchto míst ve 4 rozích stěrky. Počítá se 200 buněk, počet se dělí na polovinu a určuje počet každého typu bílých krvinek.
Leukocyty jsou prvky krve, které rychle reagují na různé vnější vlivy a změny uvnitř těla. Stanovení celkového počtu leukocytů může mít velkou diagnostickou hodnotu, protože odhaluje stav orgánů tvořících krev nebo jejich reakci na škodlivé účinky. Zvýšení počtu leukocytů - leukocytóza - je výsledkem aktivace leukopoiesis, snížení jejich počtu - leukopenie - může záviset na inhibici orgánů tvořících krev, jejich depleci a zvýšeném rozpadu leukocytů působením protilátek proti leukocytům 1. Neutrofily. Nejpočetnější skupinou leukocytů jsou neutrofily, jejichž počet se zvyšuje s mnoha infekcemi, intoxikacemi a rozpadem tkáně.
Charakteristickým znakem aktivního neutroposisu není pouze zvýšení celkového počtu neutrofilů v krvi, ale také vznik nezralých forem v něm: počet buněk nesoucích bodnutí se zvyšuje, objevují se mladé neutrofily, někdy i myelocyty. Toto "omlazení" neutrofilní kompozice se nazývá posun leukocytů doleva. Ochranná úloha neutrofilů je dána jejich fagocytární funkcí, baktericidním účinkem a uvolňováním proteolytických enzymů, které podporují resorpci nekrotické tkáně a hojení ran.
Nejčastěji dochází k regeneračnímu posunu v přítomnosti jakéhokoli zánětlivého procesu nebo ohniska nekrózy. Velmi prudký posun doleva k promyelocytům a dokonce myeloblastům s významnou leukocytózou se nazývá leukemoidní reakce. Snížení počtu neutrofilů - absolutní neutropenie - nastane, když kostní dřeň inhibuje expozici toxinům některých mikroorganismů (původci tyfusové horečky, brucelózy atd.) A virů, ionizujícího záření, řady léků.
2. Lymfocyty. Lymfocytóza je pozorována v období zotavení z akutních infekčních onemocnění, s infekční mononukleózou, infekční lymfocytózou, lymfocytární leukémií, zarděnkou, brucelózou, tyreotoxikózou.
Absolutní lymfopenie se vyskytuje při radiační nemoci, systémových lézích lymfatického systému: lymfomu, lymfosarkomu.
3. Eosinofily. Oni jsou nalezeni v krvi v relativně malých množstvích (nalezený hlavně v tkáních), ale jejich počet se zvětší, někdy významně, v alergických procesech (sérová nemoc, bronchiální astma), helminthic invaze, a pruritic dermatoses.
Snížení počtu eosinofilů - eosinopenie - až do jejich úplného vymizení je pozorováno u sepse, těžkých forem tuberkulózy, tyfusu a těžké intoxikace.
4. Basofily. Jsou nositeli důležitých mediátorů tkáňového metabolismu (krevní ekvivalenty buněk tukové tkáně). Když je organismus senzibilizován, jejich počet se zvyšuje, a když je alergen znovu zaveden, v důsledku jejich rozpadu prudce klesá.
5. Monocyty. Zvýšení počtu monocytů - monocytóza - je indikátorem vývoje imunitních procesů. Monocyty jsou rozpoznány jako analogy tkáňových makrofágů. Monocyte se nachází v řadě chronických onemocnění (chroniosepsis, tuberkulóza, syfilis). Monocytopenie je někdy pozorována u těžkých septických, hypertoxických forem tyfusové horečky.
Agranulocyty. Charakteristickým rysem agranulocytů je nesegmentované jádro a bazofilní (modrá) cytoplazma.
Lymfocyt je nejmenší velikost leukocytů. Jádro je kulaté, oválné nebo ve tvaru fazole; zabírá většinu buňky, intenzivně zbarvené. Cytoplazma většiny lymfocytů s úzkým okrajem obklopuje jádro, je zbarvena ve světle modré barvě a je vyčeřena do jádra.
Monocyte je největší z krevních buněk. Velké jádro nepravidelného tvaru a poměrně světlé barvy. Cytoplazma je šedavě modrá, kouřově zbarvená barva, která není do jádra objasněna
Kromě těchto buněk je vzácná v normální krvi a plazmatické buňky se mohou často vyskytovat u onemocnění. Vyznačují se excentricky umístěným hustým jádrem, často ve tvaru kola. Počet těchto buněk se zvyšuje s určitými infekčními chorobami, sepsí ran a mnohočetným myelomem.
Při výpočtu vzorce leukocytů je pozornost věnována nejen kvantitativním posunům v něm, ale i kvalitativním změnám ve formových prvcích. Dříve byly pozorovány degenerativní změny v leukocytech. Při těžké intoxikaci se granularita neutrofilů stává hojnou, velkou, intenzivně zbarvenou a nazývá se toxická (nebo toxogenní). Někdy se v krevních nátěrech objevují šmouhy krve, namalované jako jaderná látka leukocytů. Jedná se o tzv. Botkinovy - Humprechtovy stíny - zbytky jaderného chromatinu, což ukazuje na zvýšenou křehkost leukocytů vedoucí k jejich rozpadu - leukocytolýza
99. Metody stanovení krevní skupiny, koncept faktoru Rh.
1. Stanovení krevní skupiny podle standardních sér:
Vyžaduje se následující vybavení:
o dvě sady standardních skupin hemaglutinujících sér I (0), II (A), III (B) dvou různých sérií a jednu lahvičku séra IV (AB)
• lahvičku s isotonickým roztokem chloridu sodného pipetou
o Vyčistěte promytou suchou desku
o skleněné podložní sklíčka
o sterilní kopí jehly pro propíchnutí masa prstu
o sterilní gázové koule,
Standardní séra pro stanovení krevní skupiny podle systému ABO jsou vyráběna se specifickým barevným označením.: I (0) - bezbarvý, II (A) - modrá, III (B) - červená, IV (AB) - žlutá. Sérum skladováno při teplotě 4 až 10 ° C. Sérum by mělo být lehké a transparentní. Přítomnost vloček, sedimentů, zákalu jsou známkami nevhodné pro sérum. První známky aglutinace by se měly objevit nejpozději do 30 sekund.
Deska je rozdělena do čtyř čtverců barevnou tužkou a ve směru hodinových ručiček jsou označeny čtverce I (0), II (A), III (B). Velká kapka séra dvou skupin I (0), II (A), W (B) se umístí do odpovídajícího čtverce destičky pipetou. Podložka prstu je ošetřena alkoholem a kůže je propíchnuta jehlou. První kapka krve se odstraní gázovou koulí, následné kapky v různých částech sklíčka se postupně aplikují na kapky séra a důkladně se promíchají. Kapka krve by měla být 5-10krát menší než kapka séra. Pak třepáním destičky důkladně promíchejte krev se sérem. Předběžné výsledky se vyhodnotí po 3 minutách, po kterých se přidá kapka isotonického roztoku chloridu sodného, opět se promíchá třepáním destičky a po 5 minutách se provede konečné vyhodnocení aglutinační reakce.
Při pozitivním isohemaglutinačním testu se vločky a jádra z ulpělých červených krvinek nerozlišují při přidávání isotonického roztoku chloridu sodného a míchání.
Když negativní reakce kapky séra na desce transparentní, rovnoměrně růžové, neobsahují vločky a zrna.
Jsou možné následující 4 kombinace aglutinačních reakcí se standardním sérem skupin I (0), II (A), III (B).
v Všechna 3 séra v obou sériích aglutinují. Krevní test -
I skupina.
v Izohemaglutinační reakce negativní se skupinami P (A) v séru, a to jak sérové, tak pozitivní se skupinami I (0) a III (B) v séru. Krevní test -
II (A) skupina.
v Isohemagglutinační reakce je negativní se sérem skupiny III (B) v séru i pozitivním séram skupin I (0) a II (A). Krevní test -
III (B).
v Sérové skupiny I (0), II (A), III (B) poskytují pozitivní reakci v obou sériích. Krev patří do skupiny IV (AB). Než však dojde k takovému závěru, je nezbytné provést isohemaglutinační reakci se standardním sérem IV (AB) skupiny za použití stejného postupu. Negativní test isohemaglutinace umožňuje konečně přiřadit testovanou krev skupině IV (AB).
2. Koncept faktoru Rh.
V erytrocytech byl nalezen další antigen (aglutinogen), který se nazývá Rh faktor. Všichni lidé jsou rozděleni do jedinců s Rh-pozitivní (Rh +) a Rh-negativní (Rh) krví. Bylo zjištěno, že 85% lidí v erytrocytech obsahuje Rh faktor, tj. Jejich krev je Rh-pozitivní a 15% ho neobsahuje, tj. Krev těchto lidí je Rh-negativní. K Rh faktoru (Rh-antigen) obvykle není v krvi žádný anti-Rh-aglutinin (hotové protilátky). Tyto protilátky se objevují v krevním séru pouze v důsledku imunizace osoby s Rh-negativní krví Rh-pozitivními erytrocyty. K takové imunizaci dochází v důsledku opakovaných transfuzí Rh-pozitivní krve Rh-negativnímu příjemci nebo během těhotenství ženy s Rh-negativní Rh-pozitivní krví. Tímto způsobem jsou lidé imunizováni: když jsou transfuzováni Rh-pozitivní krví, vyvine se vážná komplikace - krevní transfuzní šok.
Počítání počtu leukocytů a destiček
Faktory ovlivňující správnost studia bílých krvinek
- dlouhodobé skladování krve při pokojové teplotě
Normy počtu bílých krvinek
Věk Počet leukocytů
- 1 den 11,6 - 22,0
- 1 týden 8.1.- 14.3
- 1 měsíc 7,6 - 12,4
- Dospělí 4,0 - 9,0
Metody stanovení počtu leukocytů v krvi.
- Počítání počtu leukocytů v počítací komoře
- Počítání leukocytů v hematologických analyzátorech
Stanovení počtu leukocytů v počítací komoře.
- Počítání leukocytů pod mikroskopem se provádí po lýze červených krvinek ve 100 velkých čtvercích počítané mřížky a přepočítá se na 1 litr krve na základě objemu čtverců a ředění krve. Počet leukocytů by měl být proveden během 2-4 hodin po odběru krve.
- Jsou-li v periferní krvi nukleované červené krvinky, nejsou lyzovány a spočítány společně s leukocyty. V tomto případě se pro stanovení skutečného počtu leukocytů odečte počet buněk v červené řadě od celkového počtu buněk.
- Například: Celkový počet leukocytů ve výpočtu v komoře (nebo analyzátoru) -45x109 / l. Při výpočtu vzorce leukocytů bylo zjištěno, že na 100 leukocytů je přítomno 50 erytroblastů (normoblastů).
Vypočítáme skutečný počet leukocytů v krvi:
150 buněk - 45 x 109 / l
100 buněk (leukocyty) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 x 10 / l
Skutečný počet leukocytů v krvi je tedy 30 x 109 / l.
Hlavní zdroje chyb při výpočtu leukocytů v komoře:
- Nesprávný poměr objemu krve a kyseliny octové odebrané ve zkumavce.
- Nesprávně připravený roztok kyseliny octové (v koncentraci vyšší než 5%, některé leukocyty mohou lyse, což povede k podhodnocení výsledku).
- Dlouhodobé vystavení vzorku při teplotách nad 28 ° C, které může urychlit lýzu leukocytů ve vzorku a vést k podhodnocení výsledku.
- Nesprávné naplnění komory Goryaev. Stejně jako při výpočtu červených krvinek musí být fotoaparát ponechán po dobu 1 minuty, aby se buňky usadily.
- Fotoaparát Goryaev nebyl po předchozí definici dostatečně umyt. Leukocyty, které zůstaly v komoře, mohou přehodnotit výsledky analýzy.
Metody počítání krevních destiček
- v počítací komoře
Každá skupina metod má své výhody i nevýhody.
- Počítání krevních destiček v komoře je dostatečně přesné, nevyžaduje výpočet počtu červených krvinek. Na druhou stranu je tato metoda pracnější, protože destičky v nativní formě jsou reprezentovány malými a špatně kontrastními prvky. Nevýhodou tohoto způsobu je počítání krevních destiček v následujících hodinách po odběru krve.
- Stanovení počtu krevních destiček v krevních nátěrech je podstatně nižší v přesnosti k komorové metodě nebo automatickým čítačům. Chyby při počítání krevních nátěrů mohou být způsobeny špatnou kvalitou nátěru a souvisejícím nerovnoměrným rozložením krevních destiček, nepřesným stanovením počtu červených krvinek. Významnou nevýhodou tohoto způsobu je nutnost současného počítání krevních destiček a červených krvinek v krvi. Výhodou je schopnost studovat krevní destičky kdykoliv, bez ohledu na dobu odběru krve.
- Metoda stanovení destiček pomocí hematologického analyzátoru umožňuje přesně určit počet destiček, jejich průměrný objem a distribuci podle objemu.
Jednotný způsob počítání počtu krevních leukocytů v počítací komoře;
Způsoby počítání počtu leukocytů v krvi
Sjednocené 2 metody pro stanovení počtu leukocytů v krvi:
- v počítací komoře;
- analyzátory hematologie.
Princip: Leukocyty se počítají pod mikroskopem v určitém objemu počítací komory s konstantním ředěním krve po destrukci červených krvinek.
Činidlo: 3-5% roztok kyseliny octové, tónovaný vodným roztokem methylenové modři pro barvení jader leukocytů a usnadnění jejich počítání. Roztok je modrý, stabilní při skladování.
Speciální vybavení: mikroskop, počítací komora Goryaeva.
Průběh odhodlání. Pomocí měřicí pipety nebo automatického dávkovače se do aglutinační zkumavky nalije přesně 0,4 ml roztoku kyseliny octové a přidá se 0,02 ml (kapiláry Sali) krve. Kapiláru několikrát omyjte roztokem kyseliny a promíchejte obsah zkumavky. Výsledkem je ředění krve 20krát. Ponechte až do počítání, ale ne více než 2-4 hodiny po odběru krve. Komora Goryaev je připravena k práci otřením krycího skla tak, aby se objevily duhové prstence. Opět se důkladně protřepe obsah zkumavky a naplní se směsí Goryaev touto směsí pomocí Pasteurovy pipety nebo skleněné tyčinky s roztaveným koncem. Naplněnou komoru nechte 1 minutu v horizontální poloze pro sedimentaci leukocytů. Leukocyty se počítají ve 100 velkých negrafovaných čtvercích počítací komory za podmínek: kondenzátor se sníží, okulár 10x nebo 15x, čočka 8x. Počítání začíná od levého horního rohu mřížky kamery Goryaev. Při počítání leukocytů se řídí pravidlem: všechny buňky uvnitř čtverce a na demarkačních liniích se počítají, pokud většinou jdou dovnitř čtverce. Buňky protínající se dělící čárou přesně na polovinu se počítají pouze na dvou stranách čtverce (například vlevo a nahoře).
Výpočet Při výpočtu počtu leukocytů v 1 μl krve použijte vzorec:
- počet leukocytů v 1 ml krve;
a - počet leukocytů, vypočtený ve 100 velkých čtvercích;
4000 - objemový konverzní faktor na 1 µl, založený na objemu malého čtverce, který je µl;
1600 - počet počítaných malých čtverců;
20 - ředění krve.
Pro přepočet počtu leukocytů v jednotkách SI (v 1 l krve) se výsledná hodnota vynásobí 10,6.
Prakticky pro stanovení obsahu leukocytů v 1 l krve se počet leukocytů, vypočtený ve 100 velkých čtvercích počítací komory, vynásobí 50, děleno 1000 (tj. Převedeno na čárku 3 znaky vlevo) a vynásobeno 10,9.
Metody počítání leukocytů v Goryaevově komoře, normy ukazatelů a odchylky
Komora Goryaev je přístroj pro měření počtu buněk a částic v určitém objemu kapaliny (krev, moč), který se skládá ze speciálního tlustého předmětu a krycího skla.
Skleněná skluzavka má uprostřed zapuštěnou oblast, na které je nanesena mřížka o rozměrech 225 velkých čtverců. Z těchto čtverců je 25 rovnoměrně rozděleno na 16 menších čtverců. Díky tomuto objemu sítě se výpočet provádí přesněji než v jiných ručních počítačích.
Služba Fotoaparát
Po použití nástroje se sklíčko dezinfikuje ponořením do 4% roztoku formalinu po dobu jedné hodiny nebo v 70% roztoku ethanolu na půl hodiny. Poté se komora důkladně promyje destilovanou vodou. Přebytečná kapalina se odstraní měkkým hadříkem. Stojí za to věnovat pozornost skutečnosti, že kameru nelze otírat vatovým tamponem kvůli vláknům, které k ní přiléhají. Skladované sklo na suchém místě.
Při použití kamery se vypočítávají PE, které jsou umístěny uvnitř čtverce mřížky a na horním a levém řádku jejího obvodu. V tomto případě nejsou zahrnuty částice, které se během výpočtu této buňky dotýkají pravého a spodního řádku obvodu.
Stanovení leukocytů v krvi
Způsob počítání leukocytů
Výpočet počtu leukocytů začíná naředěním krve ve 3-5% roztoku kyseliny ethanové methylovou modří 20krát. Pracovní materiál před použitím otřete do sucha gázou.
Krycí sklo musí být otíráno předtím, než se objeví Newtonovy barevné kroužky. Poté se komora naplní zředěnou krví, zatímco první dvě kapky se uvolní na filtrační papír. Kapalina vstupuje do komory v důsledku kapilární vlastnosti vody. Při plnění je důležité zajistit, aby do drážek nepronikalo nic. Pokud k tomu dojde, kapalina se jemně odstraní filtračním papírem. Chvíli pak nechte mřížku jen minutu a čekejte, až FE zastaví svůj pohyb.
Počet bílých krvinek se provádí v rámci sto velkých čtverců při malém zvětšení, tj. Okulárem 10x a objektivem 8x, podle Egorovova pravidla. Výsledná hodnota se použije ve vzorci.
X = (n × 250 × 20) / 100 nebo X = n × 50
X - počet leukocytů.
n je číslo získané počítáním v komoře.
Stanoví se počet leukocytů s přihlédnutím k počtu velkých čtverců mřížky - 100 a ředění krve - 20.
Jak je počet leukocytů
Rychlost a abnormality leukocytů
Rychlost leukocytů u lidí je 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Nebo jinak, přibližně 6 000 bílých krvinek je umístěno v 1 kubickém mm krve.
Vnější odchylky mohou ovlivnit odchylky od normy:
- příjem potravy před dárcovstvím krve;
- stres;
- těhotenství nebo menstruace u žen;
- hypothermie nebo přehřátí;
- velkou fyzickou námahou před testováním.
Pokud počet bílých krvinek překročí 9,0 × 10⁹ / l (leukocyty jsou zvýšené), tento stav se nazývá leukocytóza. Podobný obraz lze pozorovat u zhoubných krevních onemocnění, infekcí, radiačního poškození a otravy.
Léky mohou také zvýšit počet leukocytů. Nekróza tkání, silné krvácení, včetně následků operací, ledvinová kóma, srdeční onemocnění - to vše může vést k leukocytóze.
Pokles počtu leukocytů pod 3,9 × 10⁹ / l se nazývá leukopenie. U některých lidí je však fixní počet leukocytů stanoven na 3,5 × 10⁹ / l. To je věřil, že tito lidé udržují rezervu těchto buněk v tkáních 50 krát více než v krvi. K dispozici je také funkční leukopenie po podání analgetik, sulfonamidů a dalších léků, po dlouhé svalové práci, v důsledku infekce a virů (tyfus, chřipka a spalničky).
Leukocytární vzorec
Všechny typy leukocytů představují leukocytární vzorec. Na něm můžete identifikovat určité patologie. Normy vzorce se liší podle věku a období života osoby. Posun je jasně viditelný u žen během těhotenství nebo po porodu.
Pro výpočet poměru typů těchto buněk se používají různé metody, ale všechny se vztahují ke skutečnosti, že těžší buňky (například basofily) jsou umístěny blíže k okraji nátěru a lymfocyty, jako jsou například světelné buňky, zůstávají ve středu.
- Metoda Filipchenko. V této metodě se výpočet provádí podél příčné přímky hranice od jednoho konce ke druhému. Zdvih je psychicky rozdělen do tří částí.
- Schillingova metoda. Leukocyty se počítají ve čtyřech oblastech stěrky.
Získaná data jsou zaznamenána do tabulky. Jednotlivě se vypočítá počet každého typu bílých krvinek podle vzorce. Označeny ty prvky, které přišly do zobrazení. Skóre se udržuje až do okamžiku, kdy součet všech počítaných buněk je 100.
Metody počítání leukocytů v moči
V moči se vypočítá počet leukocytů v buňce Goryaeva Nechiporenko. Tato analýza je potřebná pro sledování onemocnění ledvin. Periodické vyšetření moči pomáhá sledovat správnost léčby a účinnost předepsané léčby.
Sběr moči
Ve studii je pouze první ranní moč uprostřed močení. Je důležité, aby pacient dodržoval základní pravidla pro sběr tohoto biomateriálu. Zvláštní studium pro studium není nutné.
Metoda výpočtu
10 ml čerstvě odebrané moči se odstřeďuje po dobu tří minut při 2,5 tisíc otáčkách za minutu. Před tím je nutné zajistit, aby moč, aby se zabránilo částečnému rozkladu buněk, měl slabě kyselou reakci.
Pomocí pipety s úzkým, vytaženým koncem odstraňte horní vrstvu. In vitro ponechte 0,5 ml moči na 1 ml v závislosti na objemu sedimentu.
Sraženina se jemně smísí se supernatantem. Výsledný roztok se používá k naplnění počítací komory Goryaev podle podobného principu, který se používá při výpočtu PV krve. Fotoaparát zůstane sám po dobu 3 až 5 minut.
Bílé krvinky musí být počítány ve velkých čtvercích po celé mřížce s 7x okulárem a 40x čočkou.
Výsledná hodnota je použita ve vzorci:
X = (a / 0,9) × (1000 / V)
X - počet leukocytů v 1 ml moči.
a - vypočtené množství děleno objemem komory v 1 μl močového sedimentu.
v - Množství moči odebrané pro studii.
1000 - množství sedimentu.
To je důležité! Norma pro leukocyty: v 1 ml moči ne více než 2 × 10³ bílých krvinek.
Počet leukocytů v krvi
Laboratorní personál pro detekci krevního obrazu leukocytů nejčastěji používá komoru Goryaev. Počítání leukocytů v komoře Goryaev je méně přesná metoda než stanovení leukocytů pomocí elektronických zařízení. Velikost chyby je ± 7%.
Jak se počítání provádí
- Do zkumavky nalijte 0,4 ml ředicí kapaliny a 0,02 mililitru kapilární krve. Připravený chov je považován za rovný 1:20.
- Jako ředící kapalina se obvykle používá 3 nebo 5% roztok kyseliny octové. Je předbarvena methylenovou modří, která reakcí barví jádra leukocytů.
- Před naplněním komory se trubice Goryaev otřásá co nejúplněji. Naplnění kamery je stejné jako pro počítání červených krvinek.
Funkce výpočtu
Počet leukocytů významně nižší než u červených krvinek je z tohoto důvodu proveden ve 100 velkých čtvercích. Ve 100 čtvercích byl vypočten počet leukocytů.
S objemem malého čtverce o rozměrech 14 000 kubických milimetrů a 20-násobným ředěním krve se počet leukocytů vypočítá následovně: 4000x20 a pak se vydělí 1600. Ukazuje se 1/2 xa.
Aby se počet bílých krvinek dosáhl v 1 µl, vypočítaná hodnota by se měla vydělit 2 a přidat další dvě nuly.
Odchylka leukocytů od hladiny indikuje leukocytózu a leukopenii a vyžaduje okamžité podrobné vyšetření, protože je vysoká pravděpodobnost výskytu tuberkulózy, pneumonie, sepse, tyfusové horečky, radiační nemoci.