Játra jsou ústřední laboratoří těla. Syntetizuje proteiny (albumin, protrombin, fibrinogen, další faktory srážení krve), lipidy (cholesterol), lipoproteiny, žlučové kyseliny, bilirubin, tvoří se žluč. Toxické látky, které se vyskytují v těle a vstupují do těla (antitoxická funkce), se používají v játrech. Játra syntetizují glykogen a podílí se na slinivce břišní v regulaci zásob sacharidů v těle. Jeho aktivní role v trávení je ten žluč emulguje tuky a zlepšuje jejich rozpad pankreatickou lipasou. Produkty štěpení potravin (tuky, mastné kyseliny, glycerin, aminokyseliny, sacharidy, minerální látky, voda, vitamíny) vstupují přes portální žilní cévy do jater. V něm jsou částečně uloženy, částečně zpracovány, použity a částečně připraveny pro použití v jiných tkáních.
Onemocnění jater způsobuje poruchy jedné nebo druhé funkce, která se používá pro diagnostické účely. Nejčastěji prováděné v klinických laboratořích zkoumaly poruchy pigmentu, sacharidů, proteinotvorných funkcí. Při akutním zánětlivém a toxickém poškození jater se z jater uvolňuje značné množství intracelulárních enzymů. Diagnostické hodnoty získaly studie aldolasy, alaninu a aspartátových transamináz (aminoferáz), laktátdehydrogenázy a jejích frakcí, cholinesteráz, arginázy a dalších. fosfatázy produkované v kostní tkáni. Indikátory jeho aktivity se používají v diagnostice obstrukční žloutenky. Studium enzymového spektra krve se používá v diferenciální diagnostice různých onemocnění jater, zejména žloutenky.
Níže jsou uvedeny základní informace o diagnostické hodnotě nejznámějších vzorků, které odrážejí stav jater za normálních a patologických podmínek. Metody některých vzorků nebo principy jejich implementace jsou uvedeny v případě, že metody vyžadují podrobný popis. Biochemické metody pro studium funkce jater lze nalézt v následujících publikacích: Pokyny pro použití standardizovaných klinických a laboratorních výzkumných metod.
Funkční testy odrážející úlohu jater v metabolismu sacharidů. U onemocnění jater je hladina cukru v krvi nalačno u většiny pacientů normální - 4,44-6,11 mmol / l (80-110 mg%). Občas se vyskytne hyperglykémie, často způsobená dysfunkcí sympathoadrenálního vegetativního nervového systému. Při cirhóze jater, kdy je narušena syntéza glykogenu a jeho zásoby jsou značně vyčerpány, může dojít k hypoglykémii.
Vzorky pro toleranci ke sacharidům s glukózovou zátěží se provádějí stejným způsobem jako ve studii funkce ostrovního aparátu. Zkouška se používá hlavně s jedním zatížením glukózy (cukr, fruktóza, levulóza).
Galaktosurický test je založen na skutečnosti, že galaktosa je obtížnější než glukóza, promění se na glykogen a v případě onemocnění jater ve větším množství se vylučuje ledvinami. Uvnitř testu se ve 200 ml vody přidá 40 g galaktosy. Poté se každé 2 hodiny každé tři hodiny odebírá moč ve třech oddělených dávkách a po dobu 2 hodin se uvolní 2 až 2,5 g galaktosy. Podle A. I. Chazanova (1968) je u chronické hepatitidy test pozitivní u 4-12% pacientů av případě jaterní cirhózy u 47,1% pacientů.
Galaktosemické křivky jsou citlivější než galaktosurický vzorek. Prázdný žaludek zdravého člověka obsahuje 0,1–0,9 mmol / l v krvi nebo 2–17 mg galaktózy. Po zátěži 40 g galaktosy u zdravého člověka se pozoruje prudký vzestup hladiny galaktózy na 6,6 mmol / l, neboli 120 mg%, po dobu 30–60 minut a poté se po 2–3 hodinách indikátor sníží na 2,20 mmol / l, nebo 40 mg%. U osob s onemocněním jater je hladina galaktózy vyšší, trvá déle a po 3 hodinách se nevrátí do normálu.
Funkční testy odrážející úlohu jater v metabolismu lipidů. Játra se účastní všech fází metabolismu tuků. Pro normální vstřebávání tuku ve střevech je potřeba žluč. Působí jako detergent a emulgátor tuků, usnadňuje práci pankreatické lipázy, zlepšuje vstřebávání tuků ve střevě. V játrech jsou fosfolipidy syntetizovány v přítomnosti lipotropních látek, které působí jako donory lipidových skupin (methionin, cholin) nebo faktor přispívající k syntéze fosfolipidů (vitamin B).12). S nedostatkem lipotropních látek v játrech se akumulují neutrální tuky a snižuje se množství glykogenu. Když onemocnění jater snižuje obsah adenosintrifosfátu, který dodává energii pro syntetické procesy.
Hladina cholesterolu v krvi je nejdůležitějším ukazatelem syntézy lipidů v játrech. Cholesterol je přijímán s jídlem. Jeho absorpce ve střevě probíhá za účasti žlučových kyselin. Nicméně, dietní cholesterol není jediným nebo dokonce hlavním zdrojem cholesterolu v těle. Je neustále syntetizován v játrech z acetylkoenzymu A. Syntéza cholesterolu převyšuje jeho příjem. Přebytek syntetizovaného a dietního cholesterolu se vylučuje z těla střevy. Část je přeměněna v játrech na žlučové kyseliny a je také používána v jiných orgánech (nadledviny, varlata) jako výchozí materiál pro syntézu steroidních hormonů. Část cholesterolu je v játrech kombinována s mastnými kyselinami za vzniku esterů cholesterolu.
Obsah cholesterolu v krvi je určen metodou Ilka. Cholesterol se předem extrahuje chloroformem. V přítomnosti anhydridu kyseliny octové a směsi kyseliny octové a sírové dává roztok zelenou barvu. Koncentrace cholesterolu je stanovena kalorimetrickou metodou na FEC. U zdravých lidí obsahuje sérum 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) cholesterolu. U hepatitidy a cirhózy jater dochází k porušování cholesterolu v krvi: hypercholesterolemii, zjevně spojenou s porušením vylučovací funkce jater, méně často - hypocholesterolemie, spojené s poklesem její syntézy v játrech.
Estery cholesterolu v hepatitidě se tvoří v menších množstvích než je obvyklé a poměr esterů a cholesterolu se ve zdravém stavu snižuje na 0,3-0,4 místo 0,5-0,7.
V játrech je syntéza lipoproteinů také velmi nízká a vysoká hustota. Chylomikrony a malá část lipoproteinů s velmi nízkou hustotou se tvoří v epitelových buňkách tenkého střeva. Syntéza a rozklad lipoproteinů probíhá za účasti lipoproteinové lipázy, která je spojena s heparinem. Je třeba poznamenat, že v případě cirhózy jater klesá obsah heparinu v krvi. Játra se tedy podílejí jak na tvorbě lipoproteinů, tak na jejich destrukci. S onemocněním jater je dyslipoproteinemie, především zvýšená tvorba lipoproteinů (hepatitida, počáteční formy cirhózy jater). Zvýšené hladiny beta-lipoproteinů v krvi jsou zvýšené.
Studium lipoproteinů v krvi se provádí především elektroforetickou metodou.
Intersticiální metabolismus lipoproteinů je narušen při závažných onemocněních jater - jaterní kóma, jaterní cirhóza. V tomto případě je obsah mléčného (norma 0,78–1,2 mmol / l (7–14 mg%) a kyseliny pyrohroznové (norma je 57–136 µmol / l (0,5–1,2 mg%)) vzestup krve.
Při detekci jaterní kómy je zvýšena hladina acetonu v krvi.
Funkční testy odrážející úlohu jater v metabolismu proteinů. Játra transaminují aminokyseliny, oxidují je na kyselinu pyrohroznovou v cyklu trikarboxylové kyseliny (Krebs) a syntézu proteinů. Všechny albuminy, 75–90% alfa globulinů, 50% beta globulinů jsou syntetizovány v játrech. Zdravé játra mohou produkovat 13-18 g albuminu denně. Protrombin, prokonvertin, proaccelerin je syntetizován pouze v játrech. Syntéza proteinů probíhá za účasti energie. Jedním z důvodů snížení syntetické funkce jater je snížení obsahu mikroergických sloučenin v játrech. Při závažném onemocnění jater může celkové množství syrovátkového proteinu klesnout. 40 g / l místo 80 g / l. Obsah albuminu je významně snížen (až 20 g / l místo 40 g / l). Za patologických stavů játra syntetizují globuliny s neobvyklými vlastnostmi (paraproteiny). Je známo, že takový protein je horší barvený biuretovým činidlem, méně stabilním ve fyziologickém roztoku (například chloridem vápenatým) v přítomnosti thymolu. S těmito vlastnostmi byly vytvořeny sedimentární diagnostické vzorky.
Celkový sérový protein se stanoví polarimetrickou metodou nebo reakcí s biuretovým činidlem. Norm - 60-80 g / l. Proteinové frakce se stanoví elektroforézou na papíře nebo v akrylamidovém gelu. Obsah albuminu v krevním séru je podle V. E. Predtechenského 56,5–66,8%, alfarglobulin - 3,0–5,6, alfaglobulin - 6,9—10,5, beta-globulin - 7,3. —12,5 a gama globuliny - 12,8–19,0%. U onemocnění jater dochází ke snížení obsahu albuminu v krvi, zvýšení obsahu gama globulinů. V akutních zánětlivých procesech (hepatitida) se hladina alfa-globulinů zvyšuje 1,5-2krát. Gama globuliny jsou produkovány lymfocyty a buňkami retikuloendoteliálního systému. U chronické hepatitidy vyskytující se s výraznými autoimunitními procesy se významně zvyšuje obsah gama globulinů v krvi (až o 30%). A. I. Khazanov poznamenává, že významný nárůst beta nebo gama globulinu je pozorován u pacientů s cirenózou jater v dekensirovanny a často ukazuje na špatnou prognózu onemocnění. Odráží reorganizaci syntézy proteinů v játrech a zvýšenou tvorbu paraproteinů.
Vzorky sedimentů jsou založeny na změnách koloidní stability krevního séra při interakci s různými elektrolyty. Stabilita koloidního krevního systému je narušena v důsledku dysproteinemie a paraproteinemie.
Sublimatický test (sublimační-sedimentační reakce), reakce Takat-Ara, spočívá ve skutečnosti, že během interakce sublimátu a uhličitanu sodného s bílkovinami krevního séra se sráží a tvoří vločky. V současné době se reakce používá v modifikaci Grinstedt (1948). K 0,5 ml nehemolyzovaného séra zředěného 1 ml fyziologického roztoku se přidá 0,1% roztok sublimovaných kapiček, dokud se neobjeví trvalý zákal, při čtení textu v novinách se stává nemožné prostřednictvím vertikální vrstvy kapaliny. Míra je 1,6–2,2 ml 0,1% roztoku chloridu rtuťnatého. Test je pozitivní při poškození parenchymálních jater, zejména při jaterní cirhóze, akutní a chronické hepatitidě, silikóze a silikotuberkulóze.
Veltmannův test (koagulační test, termokoagulační reakce) byl navržen v roce 1930 k rozlišení fibroproduktivních a nekrotických procesů v játrech. Čerstvé sérum bez stop hemolýzy se nalije do 11 číslovaných 0,1 ml zkumavek. Poté se přidá 5 ml roztoku chloridu vápenatého ve snižujících se koncentracích: 0,1, 0,09, 0,08 atd. Na 0,01%, obsah zkumavek se jemně protřepe a vloží se do vařící vodní lázně po dobu 15 minut, po které se přidá voda. výsledek je označen. Vzorek se považuje za pozitivní v případě srážení proteinu. Počet zkumavek s pozitivním výsledkem se nazývá koagulační pásmo. Normálně je to 6-7 zkumavek. Jeho pokles (posun doleva) je pozorován u zánětlivých procesů v plicích, nádorech, infarktu myokardu; prodloužení (posun doprava) - při zánětlivých procesech v játrech, akutní dystrofii jater, cirhóze, hemolytickém onemocnění, nefróze, fibrózní plicní tuberkulóze. V současné době byl vzorek Veltmann modifikován následujícím způsobem: Do 0,1 ml krevního séra bylo přidáno 4,9 ml vody, poté bylo přidáno 0,1 ml 0,5% roztoku chloridu vápenatého. Směs se zahřeje k varu, v nepřítomnosti sraženiny se nalije dalších 0,1 ml roztoku chloridu vápenatého. Postup se opakuje, dokud se ve zkumavce neobjeví myší protein. Výsledky se vyhodnocují na celkovém množství chloridu vápenatého použitého při reakci. Obvykle je zapotřebí 0,4 až 0,5 ml chloridu vápenatého.
Thymolový test (test turbidity thymolu) v modifikaci Huerg a Popper (test thymol-toner) je založen na tvorbě zákalu testovaného séra v přítomnosti nasyceného roztoku thymolu ve veronálním pufru. Sraženina se vytvoří jako výsledek vzniku komplexu globulin-timolofosfatid s poklesem obsahu albuminu v krvi, zvýšení beta a gama globulinů. Stupeň zákalu závisí na okolní teplotě a pH. Reakce se vyhodnocuje fotokalometrickou metodou při 660 nm proti roztoku thymol-meronalu. Výpočet se provádí podle kalibrační křivky získané ze suspenze síranu barnatého. Normálně je sérová turbidita 0–5 jednotek. M (Maklagana). Zvýšení zákalu (pozitivní test) je pozorováno v podmínkách poškození jater při epidemické hepatitidě (test je pozitivní před vznikem žloutenky), v cirhóze jater, po akutní hepatitidě a tak dále.
Při závažném narušení jater je narušen proces deaminace aminokyselin, což vede ke zvýšení jejich obsahu v krvi a moči. Pokud je u zdravých lidí obsah aminosacharidu v séru 50-80 mg / l, může se při závažných dystrofických procesech v játrech zvýšit na 300 mg / l (300 mg / l odpovídá 30 mg% podílu transferu amino dusíku vyjádřeného v mg%, v mmol / l je 0,7139). A. I. Chazanov poznamenává, že při akutní virové hepatitidě dochází ke zvýšení hladin glutathionu, kyseliny glutamové, methioninu, fenylalaninu, serinu a threoninu v séru. Při chronické hepatitidě byly zjištěny stejné změny v obsahu aminokyselin v krvi, ale vyjádřeny v menší míře.
Během dne se 100-400 mg (v průměru 200 mg) aminokyselin vylučuje do moči zdravého člověka. Aminoazot je mezi nimi 1-2% celkového dusíku moči a při onemocněních jater dosahuje 5-10%. Při akutní jaterní dystrofii je pozorováno zvýšené vylučování leucinu a tyrosinu močí. Normálně se tyrosin uvolňuje v množství 10-20 mg / l, s akutní virovou hepatitidou - až 1000 mg / l (2 g denně). V močovém sedimentu lze nalézt krystaly leucinu a tyrosinu.
Zbytkový dusík a močovina v krevním séru u onemocnění jater se zvyšují, pokud se vyvíjí akutní jaterní selhání nebo závažné akutní poškození jater (akutní dystrofie při akutní hepatitidě, exacerbace chronické hepatitidy, cirhóza jater, rakovina jater, po operaci žlučových cest a ostatní). U zdravých lidí je zbytkový dusík v krvi 14,3–28,6 mmol / l (0,20–0,40 g / l), močovina - 2,5–3,3 mmol / l (0,15–0, 20 g / l). U onemocnění jater mírně stoupá obsah zbytkového dusíku v krvi - až 35,4-64,3 mmol / l (0,50 -; 0,90 g / l). Zvýšení hladiny nad 71,4 mmol / l (1,0 g / l) je pozorováno při poškození ledvin a významně zhoršuje prognózu onemocnění.
Zbytkový dusík v krvi se stanoví několika metodami - po mineralizaci krve přímou reakcí s Nesslerovým činidlem nebo metodou Rappoport-Eichgorn. Močovina v krvi je také stanovena několika metodami: expresní metoda je založena na použití reaktivního papíru „Ureatest“, používá se ureasová metoda s chloridem fenolu, metoda ureasy s Nesslerovým činidlem atd.
Játra a hemostáza úzce souvisí. V játrech jsou syntetizovány proteiny, které se podílejí na srážení krve. Nejdůležitější z nich jsou protrombin a fibrinogen a častější jsou poruchy syntézy těchto proteinů. Je třeba poznamenat, že při akutních zánětlivých onemocněních plic, kloubů, jater se může významně zvýšit obsah fibrinogenu v krvi. Snížení obsahu protrombinu v krvi je zaznamenáno u pacientů s akutní virovou, toxickou, chronickou hepatitidou, cirhózou jater. Nejdůležitějšími klinickými příznaky deficitu protrombinu jsou spontánní krvácení pod kůží, pod sliznicemi, krvácení do ústní dutiny, žaludek.
Syntéza proteinů, které zajišťují proces srážení krve, probíhá za účasti vitaminu K. Vitamin K je rozpustný v tucích a spolu s tuky vstupuje do těla. U onemocnění jater v důsledku poruch tvorby žlučových cest a vylučování žlučových cest v těle dochází k hypovitaminóze K.
Porucha syntézy krevních koagulačních faktorů může být spojena s inhibicí funkce tvorby jater v proteinu. V tomto případě se hypoprotrombinémie vyskytuje s dostatečným zajištěním těla vitaminem K. Na klinice pro diagnostické účely se množství protrombinu v krvi vyšetřuje před a po naplnění přípravkem Vikasol.
Velké množství heparinu je syntetizováno v játrech a plicích.
Otázka možnosti hemoragické diatézy, spojená se zvýšením produkce antikoagulačních faktorů krevního systému při onemocněních jater, není dobře známa.
Aktivita faktorů protrombinového komplexu (prothrombi-nový index) je studována metodou Quick (95–105% norma), koncentrace fibrinogenu v krvi je studována metodou Rutberg (norma je 200–300 mg ve 100 ml plazmy). Podle jednotné gravimetrické metody doporučené V. V. Menshikovem (1987) je rychlost fibrinogenu v krvi 200–400 mg% nebo 2–4 g / l. Metoda stanovení faktorů srážení krve je podrobně popsána v Příručce metod klinického a laboratorního výzkumu.
Funkční testy odrážející úlohu jater v metabolismu pigmentů. Jedná se především o stanovení bilirubinu v séru, studium urobilinu, stercobilinu, žlučových pigmentů v moči. Již jsme se zmínili o studiu obsahu bilirubinu v žluči. Tyto ukazatele přímo nebo nepřímo odrážejí proces přeměny bilirubinu v játrech. Játra hrají důležitou roli v metabolismu pigmentů obsahujících železo - hemoglobin, myoglobin, cytochrom atd.
Výchozí stadium rozpadu hemoglobinu je rozbití methylového mostu a tvorba verdohemoglobinu (verdoglobin), který také obsahuje železo a globin. V budoucnu Verdoglobin ztrácí železo a globin, začíná proces rozkládání porfyrinového kruhu a tvorbu biliverdinu, s jehož obnovou vzniká hlavní žlučový pigment - bilirubin (nepřímý, nevázaný bilirubin). Takový bilirubin je kombinován s Ehrlich diazoreaktivní po léčbě alkoholem nebo kofeinovým činidlem, to znamená, že poskytuje nepřímou barevnou reakci. Aktivně je absorbován hepatocyty a pomocí enzymů jsou glukuronyltransferázy v Golgiho aparátu spojeny s jedním (monoglukuronidem) nebo dvěma (diglukuronidem) molekulami kyseliny glukuronové. Patnáct procent bilirubinu v játrech přes sulfát transferázu s kyselinou sírovou a tvoří fosfoadenosin fosfosulfát. Takový bilirubin rychle reaguje s diazoreaktivní a dává přímou reakci.
U onemocnění jater je zvýšený obsah bilirubinu v krvi určen především tím, že ho hepatocyty vylučují do žlučových a krevních kapilár. Bilirubin se hromadí v krvi, což vede k přímé reakci s diazoreaktivním (přímým nebo vázaným bilirubinem). Menší množství také obsahuje bilirubin v případě závažného poškození jater, což dává nepřímou reakci, která je způsobena snížením aktivity zachycení nekonjugovaného bilirubinu z krve jaterními buňkami a je zřejmě způsobeno porušením mechanismu zachycení bilirubinu a absorpce ve skořápkách hepatocytů.
Když obstrukce žlučníku nebo jaterního kanálu kamenem, nádorem, viskózním hlenem, zúžení jeho lumenu jizvami (například po operaci žlučového traktu) v jaterních žlučových cestách zvyšuje tlak žluči. Pronikne do krevních a lymfatických kapilár. Krev se hromadí hlavně bilirubin, který dává přímou reakci s diazoreactive (subhepatic, nebo mechanický, žloutenka).
Hemolýza erytrocytů je doprovázena uvolňováním velkého množství hemoglobinu, jehož část je vylučována ledvinami, některé jsou zachyceny buňkami retikuloendotelového systému a přeměněny na verdoglobin a bilirubin. Část tohoto bilirubinu je konjugována s kyselinou glukoronovou v játrech a vylučována ve zvýšeném množství žlučem do střeva. Významné množství bilirubinu, které způsobuje nepřímou reakci, však zůstává v krvi. Taková žloutenka se nazývá hemolytická nebo suprahepatická.
S obstrukční žloutenkou, velmi málo žluči (bilirubin) vstupuje do střev nebo nevstoupí vůbec. Barva výkalů závisí na produktech konverze bilirubin - stercobilin, který je tvořen ve střevě od stercobilinogen - intermediární produkt přeměny bilirubin. Pokud žlučové pigmenty nevstoupí do střeva, výkaly se stávají světlými, bílými, acholichny. Reakce na stercobilin a urobilin v takových případech je negativní.
U žloutenky parenchymu pronikají žlučové pigmenty do střeva v menším množství, než je obvyklé, protože obsah bilirubinu v žluči klesá a množství samotné žluči je malé. Bilirubin, který vstupuje do střeva, však postačuje k zbarvení výkalů ve světle hnědé barvě. Část stercobilinu je absorbována a vylučována ledvinami, nejprve ve formě urobilinogenu a pak urobilin. Když je konjugovaný (přímý) bilirubin v krvi nadměrný, část z něj vstupuje do moči, kde může být detekována Rosinem (s alkoholickým roztokem jodu) nebo vzorkem s precipitací bilirubinu solí barya.
S hemolytickou žloutenkou v žluči se zvyšuje hladina bilirubinu. Sterobilin a urobilin se také tvoří v nadbytku - výkaly a moč jsou intenzivně zbarveny. A v krvi se zvyšuje obsah nenavázaného bilirubinu, je špatně rozpustný ve vodě, neproniká do renální bariéry, do tkáně. Proto není v moči žádný bilirubin.
Sérum bilirubinu je určeno metodou Endrašík, Cleghorn a Grof. Tato metoda je založena na kombinaci kyseliny diazofenylsulfonové (tvořené interakcí kyseliny sulfanilové s dusitanem sodným) s bilirubinem v séru, což má za následek zbarvení růžovo-fialové barvy. Intenzita jeho soudě podle koncentrace bilirubinu, vstupující do přímé reakce. Když je do séra přidáno kofeinové činidlo, nekonjugovaný (nepřímý) bilirubin přechází do rozpustného disociovaného stavu a poskytuje diazoreaktivní směs růžově fialovému barvení. Technika je popsána v publikaci V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov; Handbook ed. A. A. Pokrovského; metodické pokyny ed. V. V. Menšikov a další.
Hodnota některých enzymů v diagnostice onemocnění jater. Enzymy jater, stejně jako jiné orgány, se dělí na orgánově specifické a nespecifické. Pro játra jsou orgánově specifické enzymy ornitin karbamyl transferáza, glutamát dehydrogenáza, fosfofruktaldolasa, histidáza, sorbitol dehydrogenáza. Pátá isoenzymová laktátdehydrogenáza je navíc považována za specifickou.
Jaterní buňky jsou bohaté na enzymy. Poškození hepatocytů vede k uvolnění významného množství intracelulárních enzymů a jejich akumulaci v krvi. V tomto ohledu získaly diagnostické hodnoty transaminázy, aldolasy a enzymy nalezené v buňkách jiných orgánů a tkání. Vyhodnotit jejich aktivitu v krvi by měla být srovnána s klinickými příznaky onemocnění.
Aldolase - název skupiny enzymů podílejících se na mechanismech aerobního štěpení sacharidů. Sérum aldolasa katalyzuje reverzní štěpení fruktosa-1,6-difosfátu na dva fosfo-triosefosfoglyceraldehyd a dioxyacetonmonofosfát. Aktivita aldolasy v séru se zvyšuje při akutní epidemické hepatitidě av menší míře i při akutní toxické hepatitidě. U akutní virové hepatitidy je u 90% pacientů pozorováno 5- až 20-násobné zvýšení aktivity fruktóza-difosfát aldolasy. K jeho zvýšení dochází 3-15 dní před výskytem dalších klinických příznaků onemocnění. Po 5 dnech od začátku žloutenky se aktivita aldolasy snižuje. Zvýšení aktivity aldolasy je také zaznamenáno v případě aniakterních forem akutní hepatitidy. U pacientů s chronickými zánětlivými procesy v játrech se aktivita aldolasy mírně zvyšuje, a to v malém počtu z nich.
Studium aktivity aldolasy v séru se provádí podle metody V.I. Tovarnitsky, E.N. Voluyskaya. U zdravých lidí aktivita tohoto enzymu nepřesahuje 3-8 jednotek.
Aminotransferázy (transaminázy) se často používají k diagnostice zánětlivých onemocnění jater. Aminotransferázy v lidském těle provádějí transaminační procesy (reverzní přenos aminoskupin aminokyselin na keto kyseliny). Nejvýznamnější je studium aktivity aspartátaminotransferázy (AST) a alaninaminotransferázy (ALT). Tyto enzymy jsou široce distribuovány v různých orgánech a tkáních - játrech, myokardu, kosterních svalech, ledvinách atd. Zvýšení aktivity aminotransferáz získává diagnostickou hodnotu ve srovnání s klinickými příznaky onemocnění.
Studie se provádí podle metody Reitman a Fraenkel. Norma pro AST je 0,1–0,45 mmol / (h • l) (8–40 jednotek), pro AlT 0,1–0,68 mmol / (h • l) (5–30 jednotek). V současné době se množství substrátu v molech katalyzovaných 1 litry testované kapaliny za 1 hodinu inkubace při 37 ° C (mmol / (h • l)) považuje za jednotku enzymové aktivity, dříve popsané jednotky enzymové aktivity se převedou na uvedené pomocí následujících vzorců: pro AsT - D / 88 pro AlT-D2 / 88, kde D je indikátor aktivity enzymu, vyjádřený ve starém rozměru (jednotky), 88 je konverzní faktor, numericky rovný molekulové hmotnosti kyseliny pyrohroznové.
Při epidemické hepatitidě se aktivita aminotransferáz zvyšuje s velkou konzistencí a v raných stadiích, dokonce ještě před výskytem žloutenky. S toxickou hepatitidou a exacerbací chronické aktivity aminotransferáz vzrůstá 3-5 krát. Změny cirhózy jater nejsou tak pravidelné.
Laktátdehydrogenáza (LDH) je glykolytický enzym, který reverzibilně katalyzuje oxidaci 1-laktátu na kyselinu pyrohroznovou. Pro LDH je jako intermediární akceptor vodíku vyžadován nikotinamidový dinukleotid. V séru bylo detekováno pět izoenzymů LDH. LDH, nalezený v myokardu, LDH5 - v játrech. Pátá frakce enzymu je inhibována močovinou a tato vlastnost enzymu usnadňuje jeho stanovení.
Sérum LDH se stanoví metodou Sevel a Tovarek. Normální hodnoty celkové aktivity LDH v séru jsou 0,8–4,0 mmol kyseliny pyrohroznové na litr séra za 1 hodinu inkubace při 37 ° C. Močovina-LDH tvoří 54-75% celkové LDH.
Používá se také v klinických laboratořích pro stanovení LDH metodou elektroforézy krevního séra v polyakrylamidovém gelu. Metodu stanovení LDH lze nalézt v publikaci V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov. U virové hepatitidy je aktivita LDH4 a LDH5 zvýšena v prvních 10 dnech u všech pacientů, stupeň jejího zvýšení závisí na závažnosti onemocnění.
Cholinesterázy jsou obsaženy v erytrocytech (acetylcholinesteráza) a v séru (acylchlolasin acylcholin). Oba enzymy štěpí cholinové estery na cholin a odpovídající kyseliny a vyznačují se svou specificitou. Acetylcholinesteráza hydrolyzuje pouze acetylcholin (dříve nazývaný pravá cholinesteráza). Sérová cholinesteráza je schopna štěpit se spolu s acetylcholinem a butyrylcholinem (a dvakrát rychleji než acetylcholin). Proto je také znám jako butyrylcholinesteráza nebo falešná cholinesteráza v séru. Je syntetizován v játrech, jeho aktivita je používána jako znak funkční schopnosti jater.
Aktivita sérové cholinesterázy je určena stupněm hydrolýzy acetylcholinchloridu na kyselinu octovou a cholinem. Množství uvolněné kyseliny octové je určeno změnou barvy pufrového roztoku v přítomnosti indikátoru kyselosti na FEC. Standard je 160–340 mmol / (h • l). V případě onemocnění jater (hepatitida, cirhóza) se snižuje syntéza cholinesterázy v séru. U pacientů s obstrukční žloutenkou dochází ke snížení aktivity cholinesterázy pouze v případě, že se objeví známky závažného poškození jater. Snížení jeho aktivity je pozorováno u hypoproteinemie, kachexie, otravy organofosfátovými jedy, svalovými relaxanty. V některých případech (hypertenze, fibroidy dělohy, peptický vřed atd.) Je pozorován nárůst aktivity cholinesterázy.
Gama-glutamyltranspeptidáza (G-GTP) štěpí chromogenní substrát gama-glutamyl-4-nitronylid a usnadňuje přenos gama-glutamylového zbytku na akceptorový dipeptid glycylglycin. Uvolněný 4-nitroanilin se stanoví fotokalometrickou metodou při 410 nm po zastavení enzymatické reakce s kyselinou octovou.
GGTG se nachází ve všech lidských orgánech a tkáních. Aktivita tohoto enzymu v ledvinách, játrech, slinivce břišní, slezině, mozku je nejvyšší (přibližně 220 mmol / h), v jiných orgánech (srdce, kosterní svalstvo, plíce, střeva) - mnohem nižší (0,1 - 18 mmol / l). (h • l) Nejvyšší aktivita G-GTP je pozorována u žluči a v moči, její sérová aktivita je 4-6krát nižší než v moči, u červených krvinek tento enzym chybí G-GTP aktivita v séru zdravých mužů je 0,9–6,3 mmol / (h • l), u žen 0,6–3,96 mmol / (h • l), aktivita G-GTP je zvýšena v jaterní cirhóze u 90% pacientů s t Vládní, v chronické hepatitidy - 75% v chronické cholangiohepatitis -. Téměř enzymaticky aktivované všichni pacienti ethanol Stanovení T-GTP je citlivý test pro diagnostiku onemocnění jater alkoholem toxický..
Alkalická fosfatáza je jednou z hydroláz, které fermentují organické sloučeniny, estery kyseliny fosforečné s eliminací jejích zbytků. Je aktivní v médiu s pH 8,6–10,1 a je silně aktivován vlivem iontů hořčíku. Alkalická fosfatáza se nachází ve všech lidských tkáních a orgánech. Zvláště hodně v kostní tkáni, jaterním parenchymu, ledvinách, prostatě, jiných žlázách, střevní sliznici. Obsah alkalické fosfatázy u dětí je 1,5-3krát vyšší než u dospělých.
V agarovém gelu byla elektroforéza použita k izolaci pěti izoenzymů alkalické fosfatázy. První z nich je považován za specifický pro játra, druhý pro kostní tkáň, pátý pro žlučový trakt. Enzym se vylučuje z jater žlučí.
Aktivita alkalické fosfatázy je detekována použitím fosforečnanu sodného beta-glycerolu, který je hydrolyzován za účelem uvolnění anorganického fosforu. Posledně uvedené je kritériem aktivity enzymu. Enzym se stanoví v séru podle Bodanského metody. Normálně je aktivita alkalické fosfatázy 0,5-1,3 mmol anorganického fosforu na 1 litr séra po dobu 1 hodiny inkubace při 37 ° C.
Zvýšení aktivity alkalické fosfatázy se vyskytuje hlavně ve dvou stavech: onemocnění kostí s proliferací osteoblastů a onemocnění zahrnující cholestázu. Zvýšená aktivita alkalické fosfatázy je pozorována u následujících onemocnění kostí: hyperparatyreóza (Recklinghausenova choroba), kostní sarkom, deformující osteóza nebo fibrózní osteodystrofie (Pagetova choroba) a další formy osteoporózy. kámen, nádor, lymfatické uzliny při rakovině žlučových cest, žaludek, u osob se zánětlivým onemocněním jater a žlučových cest, slinivky břišní, lymfogranulomatózy atd. Zemřel stálý nárůst aktivity alkalické fosfatázy pozorovány nádory jater, chronická hepatitida a cirhóza, akutní hepatitida, žloutenka a to jak bez a s žloutenky. Aktivita enzymu se zvyšuje, pokud se mechanická složka žloutenky spojí (cholangitida, komprese běžného jaterního kanálu regionálními lymfatickými uzlinami, uzly regenerujících jater v oblasti jeho bran). Zvýšení aktivity alkalické fosfatázy v krvi pacientů se žloutenkou tedy indikuje jeho mechanickou povahu.
Test funkce jater
S porážkou jater ne všechny jeho funkce jsou narušeny, ne ve stejnou dobu a ne stejně. Kromě toho, játra mají značné rezervy schopnosti: dost ušetřit 20% fungujícího jaterního parenchymu k udržení aktivity těla. Regenerační schopnost jater je stejně velká. Proto určité snížení funkčnosti jater nemusí ovlivnit stav pacienta, protože játra i v těchto podmínkách poskytuje nezbytnou úroveň životně důležitých procesů.
Podstata většiny funkčních testů (nejen jater, ale i dalších orgánů) spočívá v tom, že testovaný orgán je natolik náročný, aby se s ním nemocný orgán nedokázal vyrovnat (metoda zátěže). Mezi vzorky, kterými jsou vyšetřovány funkce jater, některé odrážejí specifickou aktivitu tohoto orgánu, například pigmentové, neutralizační, protein-tvořící funkce; ostatní vzorky pouze částečně odhalí funkci jater, protože jeho účast na tomto typu metabolismu není izolovaná, ale souvisí s úlohou jiných orgánů. Patří mezi ně například vzorky zkoumající sacharidy, vodu, metabolismus tuků.
Obr. 117. Schéma izolace bilirubinu v normě (/) a v různých typech žloutenky: hemolytické (2), parenchymální (J) a mechanické <4).
Studium metabolismu pigmentů Odraz metabolismu pigmentů v játrech je obsah bilirubinu v krvi (stejně jako ve výkalech a moči) a produkty jeho regenerace. Identifikace poruch metabolismu pigmentů dává představu o funkčním stavu hepatocytů a také pomáhá rozlišovat mezi různými typy žloutenky.
Tvorba bilirubinů se vyskytuje v retikuloendoteliálních buňkách kostní dřeně, lymfatických uzlinách, ale hlavně ve slezině, stejně jako ve stelátových retikuloendoteliálních buňkách jater (obr. 117). Bilirubin je tvořen hemoglobinem, který se uvolňuje během fyziologického rozpadu červených krvinek; současně se hemoglobin rozkládá na proteinové tělo globinu a hem obsahující železo. V buňkách retikuloendoteliálního systému je z uvolněného hemu vytvořen volný bilirubin, který cirkuluje v krvi v nestabilním vztahu s albuminovým proteinem. Obsah volného bilirubinu v krvi je 8,55-20,52 μmol / l (0,5-1,2 mg%). Většina z nich vstupuje do jater, kde je uvolňována ze svého spojení s albuminem, a za účasti jaterních enzymů kombinuje s kyselinou glukuronovou za vzniku ve vodě rozpustné sloučeniny, bily-rubinglucuronidu (mono- a diglukuronidu nebo vázaného bilirubinu), který je vylučován do žlučových cest.
V důsledku toho se játra podílejí na výměně bilirubinu, přičemž plní následující funkce: 1) tvorba bilirubinu ve stelátových retikuloendoteliálních buňkách; 2) zachycení volného bilirubinu z krve; 3) tvorba sloučeniny bilirubinu s kyselinou glukuronovou; 4) bilirubování sekrece glukuronidu do žluči (vázaného bilirubinu).
Na počátku XX století. Van den Berg si všiml jiné interakce séra pacientů se žloutenkou se sulfodiazoreaktivomem s žloutenkou různých etiologií. I když se sérum pacienta s obstrukční žloutenkou ihned po přidání diazoreaktivního činidla okamžitě zčervenalo, tato změna barvy séra pacienta s hemolytickou žloutenkou se objevila až po přidání alkoholu. Reakce v prvním případě byla označena jako přímá, ve druhém - nepřímém. Ukázalo se, že nepřímá reakce je dána volným bilirubinem a přímou reakcí bilirubováním glukuronidu (konjugovaného, tj. Vázaného bilirubinu). V závislosti na přidání jedné nebo dvou molekul kyseliny glukuronové k molekule bilirubinu vzniká mono- nebo diglukuronid bilirubin.
V krvi zdravých lidí je pouze volný pigment. U nemocí, které jsou doprovázeny porušením nebo zkreslením normálního výboje žlučového bilirubinu, vstupuje do krevního oběhu a pak oba pigmenty v něm cirkulují (mohou být stanoveny odděleně).
Kvalitativní vzorek Van den Berg dává orientační informace: pokud se ukáže, že je nepřímý, můžeme předpokládat, že v krvi je pouze volný bilirubin; pokud se ukáže, že je přímý, pak není známo, v jakém poměru jsou oba pigmenty - pozitivní přímá reakce maskuje přítomnost jakéhokoliv množství volného bilirubinu. V současné době využívají především oddělené kvantitativní stanovení frakcí bilirubinu. Ve většině studií provedených pro tento účel se používají stejná diazo činidla jako u kvalitativního vzorku (diazo činidlo I: 5 g kyseliny sulfanilové a 15 ml silné kyseliny chlorovodíkové se rozpustí v destilované vodě a objem se upraví na 1 litr destilovanou vodou; diazoreakt II: 0,5% roztok dusitanu sodného, diazo směs: 10 ml diazoreaktivní I + 0,25 ml diazoreaktivní II).
Kvalitativní test: do 0,5 ml séra se nalije 0,25 ml diazo směsi. V případě zčervenání séra během méně než 1 minuty se reakce považuje za rychlou a indikuje přítomnost sérového vázaného bilirubinu. Pokud se zarudnutí objeví pomalu (během 1–10 minut), ke kterému dochází, když je relativně malé množství vázaného bilirubinu navázáno na volné, reakce se považuje za přímou zpoždění. Není-li zarudnutí po dobu delší než 10 minut, považuje se přímá reakce za negativní. Pokud se chcete ujistit, že žlutá barva takového séra závisí na bilirubinu, přidává se k němu dvojnásobné množství alkoholu, filtruje se a do filtrátu se přidává diazo-směs, v důsledku čehož se kapalina zbarví do růžova (nepřímá reakce). Pro kvantitativní stanovení frakcí bilirubinu existuje mnoho metod. Některé z nich jsou založeny na skutečnosti, že volný bilirubin je ovlivněn látkami, jako je kofein, který se používá v nejběžnější metodě Endrashik, methylalkoholu atd., Působí jako katalyzátor, urychlovač, získává schopnost reagovat s diazoreaktantem. V první části séra ošetřeného urychlovačem je možné stanovit celkový obsah obou frakcí. V jiné části, bez přidání urychlovače, se stanoví pouze vázaný pigment. Při odečtení jeho vázané frakce z celkového množství bilirubinu rozpoznají volnou frakci. Další metody odděleného stanovení frakcí bilirubinu (chemické, chromatografické) jsou složitější.
Volný bilirubin, nerozpustný ve vodě, se nevylučuje ledvinami; po navázání na kyselinu glukuronovou se stává rozpustným ve vodě, když se akumuluje v krvi - se subhepatickou a jaterní žloutenkou, která je detekována v moči. V žlučovém traktu se uvolňuje pouze vázaný bilirubin (bilirubinglukuronid). Ve velkých žlučovodech a žlučníku (zejména během zánětlivých procesů v nich) a dále ve střevě je malá část bilirubinu obnovena na urobilinogen, který je resorbován v horním tenkém střevě a vstupuje do jater krví portální žíly. Zdravá játra ho zcela zachytí a oxiduje, ale nemocný orgán není schopen tuto funkci vykonat, udělinogen přechází do krve a vylučuje se močí jako urobilin. Urobilinurie je velmi jemným a časným příznakem funkčního selhání jater. Zbytek, většina bilirubin ve střevě je obnovena až do stercobilinogen. Hlavní část se vylučuje ve výkalech, proměňuje se v konečník a z něj (ve světle a vzduchu) přechází do stercobilinu, což dává výkaly normální barvu. Malá část sterkobilinogenu, absorbovaná v dolních částech tlustého střeva přes hemoroidní žíly, obchází játra, vstupuje do celkové cirkulace a vylučuje se ledvinami. Normální moč vždy obsahuje stopy sterkobilinogenu, který se působením světla a vzduchu mění na sterkobilin.
Většina reakcí, které detekují produkty redukující bilirubin v moči, poskytuje podobné výsledky jak se urobilinem, tak se stercobilinem, i když se tyto dvě látky liší jak chemickou strukturou, tak fyzikálními vlastnostmi. Metody jejich separace jsou poměrně složité. Proto se v laboratorní praxi otevírají společně a označují se jako urobilinoidy (urobilinová tělesa).
Obsah tělíska urobilinu v moči se zvyšuje nejen při nedostatečné funkci jater, ale také při zvýšení hemolýzy. V těchto případech se v důsledku uvolnění významného množství hemoglobinu vytvoří více bilirubinu a vylučuje se do střeva. Zvýšená produkce sterko-bilinu vede ke zvýšenému vylučování moči. V případě obstrukční žloutenky, když žluč vůbec nevstoupí do střeva, není ve výkalech žádný sterkobilin, v moči nejsou žádná tělesa urobilinu. Když hepatocelulární žloutenka snižuje vylučování bilirubinu ve žluči a množství stercobilinu ve výkalech se snižuje a zvyšuje se počet urobilinických těl v moči. Jejich poměr ve výši 10: 1–20: 1 je signifikantně snížen a dosahuje 1: 1 u závažných jaterních lézí, u hemolytických žloutenek vzrůst stercobilinu ve výkalech výrazně převyšuje zvýšení vylučování urobilinických tělísek močí. Jejich poměr se zvyšuje na 300: 1–500: 1. Poměr produktů regenerace bilirubinu ve výkalech a moči je mnohem významnější při diferenciaci žloutenek než absolutní hodnota každého z nich.
Studium metabolismu sacharidů. V jaterních buňkách za účasti enzymových systémů dochází ke syntéze glykogenu, jeho depozici a glykogenolýze, stejně jako glykoneogenezi. Udržování glukózy v krvi je kromě jater poskytováno také aktivitou jiných orgánů a systémů - slinivky břišní, hypofýzy a nadledviny atd. V této souvislosti dochází ke změnám glykémie nalačno pouze s extrémně závažným poškozením jater a odhalením její nedostatečné účasti na sacharidech výměna je možná pouze za pomoci funkčních vzorků.
Zátěžový test glukózy je neúčinný, protože jeho obsah v krvi, kromě již zmíněných orgánů, je také ovlivněn stavem vegetativní nervové soustavy, zásobami glykogenu v játrech a svalech atd.
Test se zátěží galaktózy má známou hodnotu (galaktosa není absorbována žádnými tkáněmi a orgány, s výjimkou jater a hormony neovlivňují její obsah v krvi). Pacient má možnost vypít roztok 40 g galaktosy ve 200 ml vody a zjistit jeho vylučování v moči. Normálně se vyskytuje ne déle než 4 hodiny a nepřekračuje 3 g. Renální funkce a absorpce střev mohou ovlivnit vylučování galaktózy v moči, proto je stanovení obsahu galaktózy v krvi významnější. Při dobré funkci jater je maximální nárůst obsahu galaktózy v krvi pozorován po 30–60 minutách a nepřesahuje 15% počáteční hladiny; Toho je dosaženo opět o 2 h. Při špatné funkci jater je vzestup hladiny galaktózy vyšší, pokles hladiny galaktózy v krvi probíhá pomaleji.
Studium metabolismu proteinů Úloha jater v metabolismu proteinů je velmi vysoká: proteiny jsou syntetizovány a ukládány v nich, aminokyseliny, potravinové polypeptidy a produkty rozkladu tkáňových proteinů vstupují do krevního oběhu.
Zde se katabolizují, neutralizují a odstraňují nepoužité produkty rozkladu. Některé aminokyseliny podléhají deaminaci a transaminaci. Uvolněný amoniak je játry přeměněn na méně toxickou močovinu, z aminokyselin, které jsou přivedeny zvenčí a syntetizovány v játrech, znovu vytváří vlastní tkáňové proteiny a krevní proteiny; albumin, globuliny (a a p, do určité míry y), fibrinogen, protrombin, heparin, některé enzymy. V játrech se tvoří sloučeniny proteinů s lipidy (lipoproteiny) a sacharidy (glykoproteiny).
Porušení funkce tvorby proteinu v játrech se zjistí vyšetřením proteinů krevní plazmy nebo séra. Toto narušení neovlivňuje tolik celkové množství bílkovin, protože poměr jejich zlomků, jejichž změna - dysproteinémie - je pozorována u většiny jaterních lézí.
Metoda elektroforézy na papíře, nejrozšířenější v současné době v klinické praxi, je založena na skutečnosti, že různé proteiny v elektrickém poli závisí na velikosti, tvaru molekuly, jejím náboji a dalších faktorech při různých rychlostech směrem k pozitivní elektrodě. Během elektroforézy na papíře jsou různé proteinové frakce koncentrovány v různých částech papírového pásu, kde mohou být identifikovány vhodným zbarvením. Velikost frakcí je dána intenzitou barvy každého z nich. Plazmatické proteiny jsou rozděleny do pěti hlavních frakcí - albuminu; a, -, a2-, (5-, stejně jako y-globuliny (tabulka 4). Elektroforéza v jiných médiích (agar, škrobový gel, atd.) Umožňuje dělení proteinů na větší počet frakcí.
U onemocnění jater je nejčastějším poklesem poměru albumin-globulin (A / G), zejména v důsledku poklesu hladiny
Tabulka 4. Normální proteinogram
Zdraví, lékařství, zdravého životního stylu
Kvantitativní test jaterních funkcí
Chronická onemocnění jater jsou charakterizována přítomností dlouhého latentního období s minimálními nespecifickými klinickými symptomy (stadium kompenzace). V terminálním stadiu onemocnění se vyvíjí ascites, žloutenka, encefalopatie a precoma (dekompenzační fáze). Hladina albuminu a protrombinu v séru umožňuje vyhodnotit syntetickou funkci jater, která je ve většině případů po dlouhou dobu normální. Kvantitativní studie funkce jater v raných fázích dynamiky umožňuje sledování účinnosti léčby a posouzení prognózy, ale nemá diagnostickou hodnotu.
Zátěžový test galaktózy
Galaktóza je neškodná látka. Může být podáván intravenózně v dávce dostatečné k saturaci enzymového systému zodpovědného za jeho eliminaci. Rychlost eliminace galaktózy závisí na její fosforylaci galaktokinázou. V tomto případě je nutné vzít v úvahu část podané dávky, která je eliminována extrahepatální cestou. Tento test přesně odráží funkci jaterních buněk, ale vyžaduje opakované stanovení hladiny galaktózy po dobu 2 hodin.
Tabulka 2-2. Kvantitativní test jaterních funkcí
Mikrosomy (systém cytochromu P450)
Glykoprotein s terminálním zbytkem galaktosy
* Při nízké dávce vám umožní posoudit průtok jater.
Dýchací testy
Aminopyrin je transformován N-demethylací cytochromem P450 (umístěným v mikrozomální frakci hepatocytů) na oxid uhličitý. Tato látka ve svých vlastnostech splňuje požadavky na respirační testy při studiu funkce jater. Aminopyrin je značen radioaktivním izotopem 14C a podává se orálně. Vzorky vydechovaného vzduchu jsou odebírány ve dvouhodinových intervalech. Koncentrace 14C ve vydechovaném CO2 korelovala s rychlostí poklesu plazmatické radioaktivity. Vzorek odráží zbývající množství fungujících mikrosomů a životaschopné jaterní tkáně. Výsledky získané v experimentech na potkanech s modelem cirhózy jater, naznačují, že k poklesu N-demethylace dochází v důsledku ztráty funkční hmotnosti hepatocytů; současně zůstává funkční aktivita na hepatocyty nezměněna. Studie má prognostickou hodnotu a umožňuje sledovat účinnost léčby (její úloha v diagnostice je malá). Aminopirinový test lze použít ke studiu účinku léčiv na funkci jaterních mikrozomálních enzymů.
Označeno 14 Při provádění respiračních testů lze kofein a fenacetin použít také. Vzorek se zátěží14C-galaktosy umožňuje hodnocení enzymů lokalizovaných v cytosolu. Všechny respirační testy jsou složité a drahé, takže je nepravděpodobné, že budou v budoucnu široce používány.
Odstranění kofeinu slinnými žlázami
Kofein (1,3,7-trimethylxanthin) je téměř kompletně metabolizován N-demethylací v mikrozomálním systému jater (cytochrom P448). Methylxanthiny se vylučují močí. Hladina kofeinu v séru a slinných žlázách může být vyšetřena enzymatickou imunoanalýzou. Rychlost vylučování kofeinu slinami přes noc dobře koreluje s jeho clearance, stejně jako s výsledky dýchacího testu s aminopyrinem. Studie vylučování kofeinu slinnými žlázami je jednoduchý způsob, jak posoudit dysfunkci jater. Odstranění kofeinu ovlivňují různé faktory: kouření urychluje metabolismus kofeinu indukcí enzymů, některé léky, jako je cimetidin, inhibují rozklad kofeinu; S věkem klesá clearance kofeinu. Při opakovaném stanovení clearance kofeinu u stejného pacienta by měla být dávka kofeinu stejná, protože jeho clearance závisí na dávce.
Test s lidokainem
Lidokain je metabolizován oxidační N-deetylací cytochromem P450; současně se vytvoří monoethylglycen-cenexylidid (MEGE), jehož hladina koreluje s rychlostí clearance lidokainu. Stanovení koncentrace MEGE v séru po intravenózním podání lidokainu umožňuje vyhodnotit funkci jater. Koncentrace MEGE je vystavena výrazným výkyvům u osob se zdravou játrou au pacientů s mírným porušením její funkce. Významný pokles tohoto ukazatele je pozorován u cirhózy jater a stupeň poklesu koreluje s prognózou onemocnění. Při provádění diferenciální diagnózy mezi cirhózou a drobným poškozením jater jsou studie eliminace galaktózy a respiračního testu aminopyrinu informativnější.
Testujte s antipyrinem
Antipyrin má dlouhý poločas rozpadu, který u pacientů s těžkým poškozením jater může překročit 30 hodin, takže vzorky krve a slin pro výzkum musí být odebírány po dlouhou dobu, což omezuje použití tohoto vzorku pro diagnostické účely.
Stanovení asialoglykoproteinových receptorů
Hepatocyty odvodí asialoglykoproteiny (s terminálním zbytkem galaktosy) z vaskulárního lůžka v důsledku přítomnosti specifických receptorů na sinusové membráně hepatocytů. Když jaterní parenchymální léze, počet těchto receptorů klesá. Posuzuje se stupněm zachycení značeného 99mTc galaktosyl-neoglykalbuminu (analog analogu asialoglykoproteinu) játry játry, který se stanoví za použití standardní scintilační komory při jediném vyšetření vzorku krve. Výsledky studie korelují se závažností onemocnění (určeného systémem kritérií dítěte), výsledky respiračního testu s aminopyrinem a clearance indokyaninu. Průměrná koncentrace receptorů v terminálním stadiu cirhózy je 0,35 ± 0,07 µmol / l ve srovnání s 0,83 ± 0,06 µmol / l v kontrolní skupině [9]. Podobné výsledky se získají při použití lidského sérového albuminu značeného99m Tc-diethylenetriamem a npenta-acetát-galaktosylem [5]. S akutní hepatitidou se snižuje počet receptorů a během období zotavení se znovu zvyšuje [12]. I přes slibné výsledky se tento výzkum provádí pouze ve zvláštních případech.
Kapacita vylučování jater (bromsulfaleinový test)
Starý způsob studia rychlosti eliminace intravenózně injikované BS z cévního lůžka umožňuje vyhodnotit absorpční a vylučovací schopnost hepatocytů. Tato metoda nebyla na klinice aplikována kvůli její složitosti, vysokým nákladům a možným komplikacím [4].