Analýza ELISA - od screeningu na HbsAg až po komplexní diagnostiku

Se zavedením moderních technologií v medicíně rostou možnosti imunochemických diagnostických metod, které jsou schopny rychle a přesně rozpoznat nemoc, když jsou jiné metody bezmocné. Pochopení, že virus hepatitidy B je schopen být v těle ve velmi nízké koncentraci, při které nemůže být detekován ani tak spolehlivou metodou, jako je PCR, vyžaduje, aby se znovu podíval na problém diagnostiky této nemoci a ocenil možnosti imunotestu.

V tomto materiálu podrobně analyzujeme vše, co se týká tohoto typu laboratorního výzkumu. Dozvíte se, co je enzymová imunoanalýza a jak se provádí, co je australský antigen a jak se určuje, jaké jsou nesrozumitelné zkratky Hbs ag, Hbcor, v průměru a jejich úloha při rozluštění analýzy a také spoustu užitečných a zajímavých informací.

Obsah článku:

Obecné informace o testu ELISA

ELISA (zkrácená ELISA) je laboratorní diagnostická metoda, která dokáže detekovat jak antigeny, tak protilátky proti širokému spektru infekcí, včetně hepatitidy B. Současná znalost vlastností viru a vlastností imunitní reakce organismu umožňuje nejen detekci infekce, ale také její identifikaci účinnost očkování a hodnotí účinnost léčby.

Podstata enzymového imunotestu

ELISA je založena na reakci „antigen-protilátka“ nebo spíše na jejích vlastnostech.

V odezvě na invazi cizí látky (antigenu), která jsou zejména proteiny viru, produkuje tělo proteiny proteiny - protilátky. Protilátky vstupují do komplexní reakce s antigenem, blokují jeho aktivitu.

Budeme hovořit více o antigenech a protilátkách níže, ale nyní si všimneme, že pro každý antigen jsou přísně individuální nebo jako lékaři říkají homologní protilátky. Pokud tedy chceme detekovat specifický antigen v krvi, použijeme diagnostickou tabletu s protilátkami. Pokud je v krvi antigen, bude reagovat s protilátkami, které mohou být detekovány různými způsoby. A naopak. Pokud chceme najít nějaké protilátky, pak potřebujeme tabletu s příslušným antigenem.

Nejčastěji diagnostická hodnota nese pouze protilátky, se kterými můžete diagnostikovat téměř jakoukoli infekci. Zvláštností viru hepatitidy B je však to, že hlavní úlohu v diagnostice hraje jeden z antigenů - australský antigen.

Jak je IFA

Zvažte typický postup ELISA pro konkrétní příklad, pokud chcete identifikovat protilátky proti patogenu.

Pro diagnostiku se použije tableta s 96 jamkami, které jsou předem nasyceny odpovídajícím antigenem. Postup je následující:

sérum se aplikuje na všechny buňky;

homologní protilátky reagují s antigenem a připojují se k destičce;

tableta promyta, odstraní se nepřipojené protilátky;

pak je do buněk zavedena enzymatická značka - látka, která reaguje s protilátkami a způsobuje zbarvení obsahu buňky.

Jedná se o standardní postup ELISA s barvením, který se používá například v imunochromatografických testovacích proužcích.

ELISA není omezena na kvalitativní stanovení protilátek nebo antigenů patogenu. Čím více protilátek je obsaženo v buňkách tablety, tím intenzivnější je zbarvený roztok. Porovnáním jeho optické hustoty s řízením může moderní zařízení přesně vypočítat koncentraci protilátek na jednotku objemu. Proto se provádí kvantitativní ELISA, míra měření, při které jsou nejčastěji jednotky optické hustoty (EOP).

Imunochemiluminiscenční analýza

Dnes existuje několik desítek typů ELISA, z nichž každá má preferovaný rozsah. Nejoblíbenější v diagnóze hepatitidy B je imunochemiluminiscenční analýza.

Enzymatická značka pro tuto analýzu nejsou chromatiny, jako ve standardní ELISA, ale speciální látky - fosfory, které způsobují, že komplex svítí v ultrafialovém světle.

Pomocí speciálního zařízení - luminometru můžete přesně určit úroveň emisí a tím i koncentraci požadované látky.

Metody ELISA určují téměř všechny existující antigeny viru hepatitidy B a protilátky proti nim.

Antigeny viru hepatitidy B: Hbs, Hbe a Hbc

Termín antigen (antigen) pochází ze dvou anglických slov: protilátka - protilátka a generátor - výrobce. Pod antigenem tedy rozumí jakékoli látce, která jí způsobuje tvorbu protilátek v těle. Nejběžnějšími antigeny jsou proteinové sloučeniny.

Dnes jsou známy tři antigeny viru hepatitidy B: hbsag, hbc a hbe.

Australský antigen

Protein, který je součástí vnějšího obalu patogenní hepatitidy B, byl detekován dlouho před objevením samotného viru. Tento antigen dostal své jméno, protože byl poprvé identifikován od domorodých obyvatel Austrálie. Zpočátku však protein nebyl považován za antigen, ale zcela přirozený prvek krve mezi domorodci a vědomí jeho spojení s onemocněním jater přišlo o něco později.

Dlouhodobá konzervace antigenu v krvi a absence protilátek indikují možnost vzniku chronické hepatitidy B pozitivní na HBeAg.

V odborné literatuře se v současné době název „australský antigen“ prakticky nenachází a byl nahrazen mezinárodní zkratkou - HbsAg (povrchový antigen hepatitidy b - povrchový antigen hepatitidy B). Kromě toho můžete najít zkratky hbs antigen nebo jen hbs. Kterákoli z těchto zkratek je přijatelná a může být doplněna záznamem HBV nebo HBV - viru hepatitidy B (virus hepatitidy b).

Povrchový antigen viru hepatitidy B má jednu pozoruhodnou vlastnost, která z něj činí nepostradatelný diagnostický marker - jeho koncentrace v krvi může dosáhnout velmi vysokých hodnot až do poloviny miligramu na mililitr krve. Je to proto, že pouze malá část nových HBsAg, které vznikají při reprodukci viru hepatitidy B, přechází do konstrukce membrán nových virových částic a zbytek volně cirkuluje v krvi. Výsledkem je, že počet částic hbs v krvi může překročit počet virionů stovek tisíckrát.

Tato vlastnost činí australský antigen hlavním markerem při screeningu diagnózy hepatitidy B, která je detekována v krvi již za 4-6 týdnů po infekci. Jako protilátky se povrchový antigen postupně nahradí. Pokud po 6 měsících HBsAg přetrvává, pak to znamená přechod infekce na chronickou formu.

V nedávné době, kdy bylo možné stanovit koncentraci hbs hbv, jeho úloha v diagnostice vzrostla ještě více, protože spoléhání se na hladinu antigenu může odlišit chronickou hepatitidu B (HBV) od zdravého stavu nosiče a monitorovat účinnost léčby.

Základní antigeny

V jádru viru - nukleokapsid - jsou proteiny, které kontrolují reprodukci viru HBcoreAg a HBeAg.

HBcoreAg, který lze také nazvat HBCore-antigen, hbc nebo jádrový antigen, lze nalézt pouze v tkáních jater, přímo v jádrech hepatocytů. Tento antigen není detekován v krvi a nemá žádnou diagnostickou hodnotu.

Struktura viru hepatitidy

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - naopak hraje důležitou roli v diagnostice. HBeAg a HBcoreAg jsou blízcí příbuzní. Mají velkou podobnost struktury a liší se hlavně v prostorové poloze molekul. Na rozdíl od HBcore není HBe součástí nukleokapsidové stěny a volně cirkuluje v krvi.

Úloha HBe v infekčním procesu není dostatečně jasná, nicméně zvláštnosti jejího chování a jejich vztah k průběhu infekčního procesu již byly dostatečně studovány. HBeAg indikuje aktivní reprodukci viru a umožňuje spolehlivě určit fázi chronického CHB - HBeAg-pozitivního nebo HBeAg-negativního.

HBe lze detekovat v krvi již v inkubační době akutního viru hepatitidy B (HBV), zatímco vysoká koncentrace HBeAg po dobu 3 týdnů s největší pravděpodobností indikuje hrozbu chronického procesu. Koncentrace HBe přímo souvisí s obsahem částic Dane (tzv. Částice viru hepatitidy B) - čím vyšší je množství HBe, tím vyšší je koncentrace HBV DNA v krvi.

HBeAg je hlavním ukazatelem infekčnosti onemocnění. Krev HBeAg-pozitivních pacientů je mnohem nákazlivější než HBeAg-negativní. Například u těhotných žen pozitivních na HBe a Hbs, pravděpodobnost přenosu infekce na dítě dosahuje 50%, zatímco pravděpodobnost takové události u HBe-negativních, ale Hb pozitivních matek je 10-30%.

Hbe určuje průběh chronické hepatitidy. HBeAg-pozitivní chronická hepatitida B má mnohem nepříznivější prognózu z hlediska vývoje cirhózy.

To je asi vše, co potřebujete vědět o HBV antigenech, a my přecházíme k druhé skupině markerů hepatitidy B - protilátek.

Esence a diagnostika hepatitidy B

Jakmile se stádium změní na žloutenku, začnou se žloutnout sliznice a sliznice, stav zdraví se prudce zhoršuje. Je důležité zdůraznit, že játra rostou ve velikosti a vystupují zpod klenby. Postupně dochází k barvení kůže ve žlutém odstínu. Množství jaterních enzymů roste v krvi a vzorek thymolu se nemění.

Diagnostika onemocnění: základní metody a koncepty

Diagnóza hepatitidy B se provádí několika způsoby:

1. Pro začátek musí lékař vzít anamnézu a provést důkladný průzkum osoby. Během průzkumu je kladen velký důraz na tyto momenty:

• zda zavedení léků nebo jiných prostředků intravenózní;
• zda byly krevní transfúze;
• zda byly provedeny chirurgické zákroky;
• zda bylo přítomno poškození integrity kůže;
• jaké jsou sexuální vztahy;
• zda pacient měl kontakt s pacientem s hepatitidou B nebo jejím nosičem.

Pokud se některá z těchto položek vyskytla, je zadána doba trvání. Typicky se infekce vyskytuje při kontaktu od 6 týdnů do šesti měsíců před výskytem prvních příznaků hepatitidy.

2. Laboratorní diagnostika hepatitidy B, analýza ELISA krve na antigeny a protilátky proti hepatitidě B. Tento typ vyšetření je zaměřen na identifikaci 3 antigenů:

• HBsAg (antigen, umístěný povrchově),
• HBcAg (umístěna uvnitř)
• HBeAg (propojený s předchozím antigenem). Onemocnění je charakterizováno včasnou detekcí těchto antigenů v krvi.

Lidé trpící hepatitidou B a obsahující tyto antigeny v krvi jsou velmi nakažliví. Jsou schopni infikovat ostatní lidi. Pokud HBsAg chybí v lidské krvi, znamená to, že je zdravý. Pokud je člověk nemocný, tělo začne vylučovat protilátky proti existujícím antigenům.

3. Diagnostika hepatitidy B pomocí PCR techniky určené k detekci HBV DNA v oběhovém systému. Pokud je výsledek pozitivní, pak má osoba hepatitidu. Analýza DNA HBV se nazývá kvalitativní. Existuje také kvantitativní PCR. Kvantitativní PCR poskytuje příležitost identifikovat zátěž s přítomností viru hepatitidy. Co je virová zátěž? To je počet kopií DNA HBV v 1 ml krve. Kvantitativní analýza hepatitidy ukazuje aktivitu viru.

4. Krevní test pro biochemii. Tato analýza zahrnuje stanovení počtu enzymů produkovaných játry. Tyto enzymy zahrnují ALT, AST. Jsou umístěny uvnitř jaterních buněk - hepatocytů. Pokud jsou jaterní buňky poškozené, enzymy se uvolňují a vstupují do krve. Pozitivní analýza je zvažována jen když počet jaterních enzymů překročí normu. Průzkum ukazuje, zda existují zánětlivé procesy v játrech a jejich aktivita.

5. Ultrazvukové vyšetření, elastometrie atd. Diagnostika hepatitidy může být prováděna i mimo laboratorní metody. Pomocí ultrazvuku se vyšetřují břišní orgány. Ultrazvuk dává jasný obraz o jakémkoliv zánětlivém procesu jater a jeho cév. Efektivní vedení elastometrie jater. Metoda elastometrie poskytuje představu o stupni fibrózy v jaterní tkáni.

6. Nejdůležitější analýzou je přítomnost antigenů hepatitidy B v hmotě červených krvinek, pokud existují, indikuje přítomnost infekce v lidském těle.

7. Laboratorní typ diagnózy hepatitidy zahrnuje stanovení antigenů a protilátek v hmotnosti erytrocytů. Nejběžnější HBsAg se projevuje v oběhové soustavě i v inkubační době hepatitidy. Člověk neví o vývoji své nemoci a v krvi již probíhají změny. Pokud je hepatitida akutní, HBsAg zmizí z krve. Obvykle HBsAg není přítomen během prvního měsíce ikterického období a protilátky proti tomuto antigenu začínají figurovat v oběhovém systému 90 dnů po infekci.

Pozitivní test na protilátky neznamená, že osoba má hepatitidu. Je možné, že dříve trpěl hepatitidou bez D-látky. Není-li v krvi pacienta po léčbě HBsAg, ale existují protilátky, znamená to dobrou prognózu, že pacient se zotavuje. Pokud má pacient chronickou nebo těžkou hepatitidu, pak se protilátky mohou objevit již v prvních dnech ikterického období.

Spolehlivým ekvivalentem je anti-HBc IgM v krvi. Jsou odhaleny na konci precizního období. Jsou přítomny celé období zjevných projevů. Pokud analýza obsahuje anti-HBc IgM, znamená to, že se virus stále množí. Po nástupu uzdravení zmizí anti-HBc IgM. Akutní fáze onemocnění může vyvolat anti-HBc IgG test. Budou detekovány po celý život člověka.

Když je doba inkubace hepatitidy (zejména autoimunní) ukončena, HBeAg se začíná objevovat v krvi. Informují o aktivním dělení a nárůstu infekčních částic. Jakmile začne období ikteriky, NVAAg zmizí. Je nahrazen anti-HBe. Anti-HBe ukazuje, že aktivita infekce je snížena a regenerace brzy přijde. Ale reprodukce viru nekončí!

Akutní hepatitida se může změnit na chronickou. O tom bude hovořit identifikováno v krvi HВеАg. Pokud je přítomen, znamená to, že pravděpodobnost transformace procesu na chronickou formu je vysoká. Přítomnost HeVag označuje vysoce nakažlivý pacient.

Je třeba mít na paměti, že laboratorní diagnostika hepatitidy B, která má negativní výsledek pro HBsAg, nevylučuje samotnou diagnózu. Důležitým klíčovým prvkem je přítomnost anti-HBc IgM v krvi. Tyto protilátky potvrdí přesnost onemocnění. Pokud krevní test neobsahuje anti-HBc IgM, může to znamenat přítomnost HBV a přítomnost těchto protilátek indikuje zesílení infekce.

Detekce hepatitidy B DNA

Nejdůležitější studií pro stanovení přítomnosti DNA viru je PCR. Analýza ukazuje aktivitu infekčního procesu. Pomocí této metody se můžete dozvědět o prognóze onemocnění.

Pokud je hepatitida příznivější, pak HBV DNA zmizí z krve během počátečních období infekce. Laboratorní diagnostika ve formě PCR poskytuje údaje o kvalitě léčby (ovlivňuje účinek konkrétního léčiva).

Abychom pochopili, jaká taktika by měla být přijata pro jmenování terapeutických opatření, je nutné provést kvantitativní metodu PCR. Kvantitativní PCR poskytuje důkaz pozitivní reakce z terapie.

Základ pro diagnostiku

K provedení vhodné diagnózy bude nutné provést následující vyšetření:

1. Denní prohlídka, palpace.
2. Ultrazvuk jater.
3. Biochemická analýza krve (prováděna opakovaně).
4. Vyšetření na HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNA.
5. Markery HBV a HCV (virová hepatitida jsou vyloučeny).
6. Punkci jater.
7. Biopsie jater. Pomocí speciální jehly se břišní stěna propíchne a malý kus jater se odstraní pro histologické vyšetření (kus nemá velikost větší než půl gramu). Biopsie je nejnovější metodou testování hepatitidy. Díky ní můžete nejpřesněji hovořit o stupni aktivity infekčního procesu, jaterní fibróze. Biopsie je chirurgický zákrok. To může vést k komplikacím, takže se často nepoužívá pro diagnostiku.
8. Fibroelastografie. Může být použit pro odhad hustoty jaterní tkáně. Tato technika je podobná ultrazvuku. Studie využívá speciální senzor, který je instalován na kůži v místě promítání jater.
9. Fibrotest. Je založen na počítání některých krevních obrazů.

Chronická hepatitida B

Chronická hepatitida B pokračuje ve fázi:

Fáze 1 - Replikace viru. Virus se zvyšuje se zvýšenou aktivitou.

Fáze 2 - integrace. Virus přestane násobit. Virový genom se začíná integrovat do DNA normálních jaterních buněk, hepatocytů.

Pro stanovení rychlosti progrese viru je důležité pochopit závažnost procesu, výsledek, stupeň narušení jaterních buněk. Laboratorní diagnostika chronické hepatitidy je založena na zjištění:

Pokud je hepatitida HBeAg-pozitivní (pozitivní analýza), pak v hmotnosti erytrocytů bude:

• v chovném stádiu - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (celkem), HBV DNA;
• ve fázi inzerce hepatocytů do DNA - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (celkem), HBV DNA.

Pokud je hepatitida séronegativní, pak HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNA bude přítomna v krvi. Jejich přítomnost v žádném případě nezávisí na stupni infekčního procesu.

Diferenciální diagnostika

Při stanovení diagnózy je lékař povinen rozlišovat hepatitidu B s jinými onemocněními - hepatitidou A, C, E, D. Konečná diagnóza může být provedena pouze po zjištění určitých markerů specifických pro každou z buněk hepatitidy v krevní hmotě.

Hepatitida by měla být diferencována s dalšími závažnými onemocněními: akutními respiračními virovými infekcemi, žlučovými kameny, otravou jídlem, střevní infekcí, chirurgickou patologií břišních orgánů a mnoha dalšími chorobami.

Autoimunní hepatitida

Pro autoimunitní hepatitidu zahrnuje diagnóza následující nejdůležitější vyšetření:

1. Analýza hmotnosti červených krvinek (OAK). Vysvětlení: anémie (normocytová) v krvi je pozorována u autoimunitní hepatitidy, sníženého obsahu leukocytů, krevních destiček a zvýšené ROE. Lze však očekávat vyšší stupeň anémie.
2. Moč. Rozluštění rozboru moči: obsahuje bílkoviny, červené krvinky, bilirubin.
3. Krevní test pro biochemii. Velmi relevantní analýza. Interpretace: zvýšené množství bilirubinu, zvýšená argináza, pokles albuminu, zvýšení γ-globulinů a thymolový test. Sublimační test se sníží. Některé indikátory lze zvýšit dvakrát nebo vícekrát. Jedná se o pozitivní test na autoimunitní hepatitidu.
4. Imunologická analýza. Dekódování: T-lymfocytární supresory se snižují, lupusové buňky se objevují v hmotnosti erytrocytů, zvyšuje se počet imunoglobulinů, protilátky proti erytrocytům.

Pozitivní test na hepatitidu lze zjistit pomocí sérologické metody výzkumu. Autoimunitní hepatitida je heterogenní onemocnění.

ELISA na virovou hepatitidu

9. března 2017, 16:25 Odborné články: Nová Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

K detekci virové hepatitidy v těle, medicína široce používá enzymový imunotest založený na detekci koncentrace a typu antigenů s použitím protilátek a enzymů. Provádí se po etapách laboratorním výzkumem s vysokou přesností indikací. V závislosti na množství a třídě protilátek, barva a koncentrace enzymu, který používá ELISA, a v důsledku toho lékař diagnostikuje onemocnění, změny.

Co je ELISA?

Přítomnost virové hepatitidy v těle pacienta se stanoví sérologickou metodou analýzy krve na přítomnost viru HCV a markerů (těl a protilátek), které jej označují. Test ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) zkoumá různé viry, sloučeniny s nízkou molekulovou hmotností, makromolekuly, jejich kvalitativní a kvantitativní ukazatele s využitím projevu reakce na jejich antigeny. K tomu použijte enzym jako označení pro registraci signálu. Je stále více používán v medicíně, protože ELISA jasně zjistí, že dobře definované antigeny, aniž by je zaměňovaly s ostatními, mají vysokou citlivost na přítomnost invaze ve virové hepatitidě.

Nevýhodou takové diagnózy je neschopnost identifikovat příčinu onemocnění, protože tato metoda pouze indikuje reakci imunitního systému těla. Výsledky analýzy jsou ovlivněny dříve provedeným očkováním. 8 hodin před analýzou se doporučuje zdržet se konzumace nikotinu, alkoholu. Základem testu ELISA je enzymatická a imunitní reakce organismu na virus. Biologické molekuly se váží na buňku a její elementy, mikroorganismy, detekují virus, pak pracují s enzymy, které umožňují vyjádřit imunitní reakci viditelným a měřitelným parametrem.

Indikace pro analýzu

Virová hepatitida v těle může způsobit rakovinu a jaterní cirhózu. Význam včasné diagnózy je nesporný. Primární metodou diagnostiky je test ELISA, který s vysokou přesností určuje přítomnost viru HCV (IgM a IgG) a aktivity jeho stopových prvků. Povinné testy na průchod virové hepatitidy:

1. Lidé s rizikovými skupinami (drogově závislí, lidé s AIDS, zaměstnanci zdravotnických a donucovacích institucí).
2. Lidé s akutní nebo chronickou hepatitidou.
3. Těhotné a plánování těhotenství ženy.

ELISA rozpoznává nemoc v kterémkoli stadiu. Výsledky analýzy jsou v průměru připraveny za 2 dny.

Kritéria, která určují důležitost analýzy

Test ELISA určuje přítomnost protilátek třídy IgG, IgM, IgA. Při diagnóze virové hepatitidy lékař nevěnuje pozornost jejich typu, protože přítomnost jakéhokoli takového projevu viru HCV již indikuje akutní nebo chronické stadium onemocnění. V počátečních stadiích onemocnění se hladina IgM zvyšuje (5 dní po infekci); 15. - 20. den se objevují protilátky IgG a mohou zůstat v lidské krvi po dlouhou dobu i po vyléčení; IgA - objeví se po 10-14 dnech, po léčbě klesá.

Pokud jsou IgG a IgA detekovány po užití léků a jejich hladina zůstává ve stejné míře - nosič má chronickou formu hepatitidy. Důležitým kritériem testu bude jasné vymezení třídy dostupných protilátek a jejich množství. Na základě toho můžete vědět nejen o přítomnosti nemoci, ale také o stadiu jejího vývoje. Detekce takových prvků v krvi pacienta umožňuje předepsat správnou a včasnou léčbu, aby se zabránilo závažnějším následkům.

Jak se to dělá?

Přidělit přímý a nikoli přímý test ELISA. Fáze přímo:

1. Sběr biologického materiálu a jeho umístění do speciálních otvorů.
2. Během 15-30 minut antigeny jsou připojeny k povrchu jamek.
3. Přidání protilátek do jamek k nalezenému antigenu. Vše se nechalo 1-5 hodin.
4. Odstraňte nepřipojené antigeny (nalití obsahu jamek).
5. Jamky opláchněte speciálním roztokem.
6. Do jamek se přidá roztok enzymu. Nechte 30 minut - 1 hodinu.
7. Využití kolorimetrie (detekce barvy a koncentrace barvy obsahu jamky, porovnání s ukazateli, které jsou přímo úměrné koncentraci viru).

Použití pro diagnózu nepřímé ELISA poskytne přesnější výsledek.

Nepřímá metoda ELISA se provádí s použitím neznačených protilátek proti zjištěným antigenům a následnému přidání značených protilátek. Nejprve se pacientovi odebere krev a 15 až 30 minut se rozetře do jamek. (protilátky jsou fixovány otvory). Pak se do nich zavedou neznačené protilátky po dobu 1–5 hodin (vznikne spojení protilátek s antigeny - imunitní komplex). Následně se z jamek nalijí nenavázané mikroelementy a promyjí se speciálním roztokem. V další fázi laboratorní technik přidá značené stopové prvky do jamek po dobu 15-30 minut. (toto se váže neoznačené značením s tvorbou komplexu "protilátka-protilátka-antigen"). Extra (volné) se znovu odstraní během vypouštění a promývání roztokem. Další je enzym, který mění barvu během 5-30 minut. zůstatky v dírách a barevná data jsou porovnána s údaji tabulkových ukazatelů. Nepřímá ELISA je přesnější.

Co ukazuje ELISA na virovou hepatitidu?

Imunotest umožňuje detekci přítomnosti infekce (viry hepatitidy všeho druhu, HIV, herpes, syfilis, cytomegalovirus, spalničky, zarděnka, virus příušnic, virus Epstein-Barr), je markerem autoimunitních onemocnění, rakovinných buněk. Označuje porušování reprodukčních funkcí (změny v testosteronu, prolaktinu, estradiolu a progesteronu), poruchy funkce štítné žlázy, napadení hlísty, chlamydie. Účinný pro detekci ureaplasmózy, černého kašle, viru Dange, viru West Nile, Borrelia. Seznam definic je vysoký, obsahuje mnoho položek.

Potvrzení výsledků

Stanovení antigenu viru HCV metodou ELISA poskytuje 98% přesnost. Používá se také k přezkoušení biologického materiálu s fuzzy předchozími indikátory. Přítomnost IgM antigenů není indikátorem akutní hepatitidy a vyžaduje další výzkum. Při opakovaném testu ELISA se výsledky shodují o 90–100%. V případech minimálního rozdílu se průměrná hodnota bere jako ukazatel. Pro maximální přesnost, pokud jde o lékaře, radí paralelně provádět biochemickou analýzu krve. Pro testování výsledků po enzymové imunoanalýze můžete použít jiné diagnostické metody.

Studie na viru hepatitidy B (ELISA a PCR) t

Antigen „s“ viru hepatitidy B (HBsAg)

Povrchový antigen hepatitidy B v séru obvykle chybí.
Detekce povrchového antigenu hepatitidy B (HBsAg) v séru potvrzuje akutní nebo chronickou infekci virem hepatitidy B.

Při akutním onemocnění je HBsAg detekován v séru v posledních 1-2 týdnech inkubační doby a prvních 2-3 týdnů klinického období. Cirkulace HBsAg v krvi může být omezena na několik dní, proto byste měli usilovat o včasné počáteční vyšetření pacientů. Metoda ELISA umožňuje detekci HBsAg u více než 90% pacientů. Téměř u 5% pacientů nejcitlivější výzkumné metody nedetekují HBsAg, v takových případech je etiologie virové hepatitidy B potvrzena přítomností anti-HBcAg JgM nebo PCR.

Koncentrace HBsAg v séru ve všech formách závažnosti hepatitidy B ve výšce onemocnění má značný rozsah výkyvů, existuje však určitý model: v akutním období existuje inverzní vztah mezi koncentrací séra HBsAg v séru a závažností onemocnění.

Vysoké koncentrace HBsAg jsou častější u mírných a středně závažných forem onemocnění. V těžkých a maligních formách je koncentrace HBsAg v krvi často nízká a u 20% pacientů s těžkou formou a ve 30% s maligním antigenem v krvi nemusí být vůbec detekována. Vzhled na tomto pozadí u pacientů s protilátkami proti HBsAg je považován za nepříznivý diagnostický znak; je stanovena v maligních formách hepatitidy B.

V akutním průběhu hepatitidy B se koncentrace HBsAg v krvi postupně snižuje až do úplného vymizení tohoto antigenu. HBsAg vymizí u většiny pacientů do 3 měsíců od nástupu akutní infekce.

Snížení koncentrace HBsAg o více než 50% do konce třetího týdne akutního období zpravidla indikuje ukončení procesu infekce. Obvykle je u pacientů s vysokou koncentrací HBsAg ve výšce onemocnění zjištěna v krvi několik měsíců.
U pacientů s nízkými koncentracemi HBsAg mizí mnohem dříve (někdy i několik dní po nástupu onemocnění). Obecně je doba detekce HBsAg v rozmezí od několika dnů do 4-5 měsíců. Maximální doba detekce HBsAg s hladkým průběhem akutní hepatitidy B nepřesahuje 6 měsíců od nástupu onemocnění.

HBsAg lze nalézt u zdravých lidí, zpravidla v profylaktických nebo náhodných studiích. V takových případech se vyšetřují další markery virové hepatitidy B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg a studují se jaterní funkce.

V případě negativních výsledků jsou nutné opakované studie na HBsAg.
Pokud opakované krevní testy po dobu delší než 3 měsíce odhalí HBsAg, je tento pacient klasifikován jako chronický pacient s virovou hepatitidou B.
Přítomnost HBsAg je poměrně běžná. Na světě je více než 300 milionů dopravců a v naší zemi je asi 10 milionů dopravců.
Ukončení cirkulace HBsAg s následnou sérokonverzí (tvorba anti-HBs) vždy indikuje regeneraci organismu.

Krevní test na přítomnost HBsAg se používá pro následující účely:

pro diagnostiku akutní hepatitidy B:

• inkubační doba;
• akutní onemocnění;
• včasné uzdravení;
  

pro diagnostiku chronické virové hepatitidy B;

pro nemoci:

• trvalé chronické hepatitidy;
• cirhóza jater;

pro screening a identifikaci pacientů v rizikových skupinách: t

pacienti s častými hemotransfuzemi;

pacienti s chronickým selháním ledvin;

pacienti s vícečetnou hemodialýzou;

pacientů se stavem imunodeficience, včetně AIDS.

Vyhodnocení výsledků výzkumu

Výsledky studie jsou vyjádřeny kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek indikuje nepřítomnost séra HBsAg. Pozitivní výsledek - identifikace HBsAg indikuje inkubaci nebo akutní období akutní virové hepatitidy B, stejně jako chronické virové hepatitidy B.

Protilátky proti jadernému antigenu viru hepatitidy B JgG (anti-HBcAg JgG)

Sérum anti-HBcAg obvykle není přítomno v séru.
U pacientů s anti-HBcAg se JgG objevuje v akutním období virové hepatitidy B a přetrvává po celý život. Anti-HBcAg JgG je hlavním markerem přenesené HBV.

K diagnostice anti-HBcAg JgG se používají krevní testy:

chronická virová hepatitida B v přítomnosti HBs antigenu v séru;

virová hepatitida B.

Vyhodnocení výsledků výzkumu

Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek indikuje nepřítomnost sérového anti-HBcAg JgG. Pozitivní výsledek - identifikace anti-HBcAg JgG indikuje akutní infekci, rekonvalescenci nebo dříve přenesenou virovou hepatitidu B.

"E" antigen viru hepatitidy B (HBeAg)

Normálně HBeAg v séru chybí.
HBeAg lze nalézt v séru většiny pacientů s akutní virovou hepatitidou B. Obvykle zmizí v krvi před antigenem HBs. Vysoká hladina HBeAg v prvních týdnech nemoci nebo její detekce po dobu delší než 8 týdnů je důvodem k podezření na chronickou infekci.

Tento antigen je často detekován při chronické aktivní hepatitidě virové etiologie. Zvláštní význam v definici HBeAg má skutečnost, že její detekce charakterizuje aktivní replikativní fázi infekčního procesu. Bylo zjištěno, že vysoké koncentrace HBeAg odpovídají vysoké aktivitě DNA polymerázy a charakterizují aktivní replikaci viru.

Přítomnost HBeAg v krvi ukazuje jeho vysokou infekčnost, tj. přítomnost aktivní infekce hepatitidy B v těle, která je vyšetřována, a je detekována pouze v přítomnosti antigenu HBs v krvi. U pacientů s chronickou aktivní hepatitidou se antivirotika používají pouze v případě, že je v krvi detekován HBeAg. HBeAg - antigen - marker akutní fáze a replikace viru hepatitidy B.

K diagnóze se používá krevní test na přítomnost antigenu HBe:

inkubační doba virové hepatitidy B;

prodromální období virové hepatitidy B;

akutní období virové hepatitidy B;

chronická perzistující virová hepatitida B.

Vyhodnocení výsledků výzkumu

Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek indikuje nepřítomnost HBeAg v séru. Pozitivní výsledek - detekce HBeAg indikuje inkubaci nebo akutní období akutní virové hepatitidy B nebo pokračující replikaci viru a infekci pacienta.

Protilátky proti antigenu "e" viru hepatitidy B (anti-HBeAg)

Anti-HBeAg v séru obvykle chybí. Vzhled protilátek anti-HBeAg obvykle indikuje intenzivní odstranění viru hepatitidy B z těla a menší infekci pacienta.

Tyto protilátky se objevují v akutním období a přetrvávají až 5 let po infekci. Při chronické perzistující hepatitidě se anti-HBeAg nachází v krvi pacienta spolu s HBsAg. Sérokonverze, tj. přechod HBeAg na anti-HBeAg, s chronickou aktivní hepatitidou, častěji prognosticky příznivý, ale stejná sérokonverze nezlepšuje prognózu těžké cirhotické transformace jater.

Krevní testy na přítomnost anti-HBeAg se používají v následujících případech v diagnostice virové hepatitidy B:

stanovení počáteční fáze onemocnění;

akutní infekce;

včasné uzdravení;

rekonvalescence;

pozdní fáze obnovy.

diagnóza nedávno přenesené virové hepatitidy B;

diagnostika chronické perzistující virové hepatitidy B.

Vyhodnocení výsledků výzkumu

Výsledek studie je vyjádřen kvalitativně - pozitivní nebo negativní. Negativní výsledek ukazuje absenci protilátek proti HBeAg v séru. Pozitivním výsledkem je detekce protilátek proti HBeAg, což může indikovat počáteční stadium akutní virové hepatitidy B, akutní období infekce, časné stadium rekonvalescence, rekonvalescence, nedávno přenesenou virovou hepatitidu B nebo perzistující virovou hepatitidu B.

Kritéria pro přítomnost chronické hepatitidy B jsou:

detekci nebo periodické detekci HBV DNA v krvi;

kontinuální nebo periodické zvyšování aktivity ALT / AST v krvi; t

morfologické příznaky chronické hepatitidy při histologickém vyšetření biopsie jater.

Detekce viru hepatitidy B pomocí PCR (kvalitativně) t

Virus hepatitidy B v krvi obvykle chybí.
Kvalitativní stanovení viru hepatitidy B metodou PCR v krvi umožňuje potvrdit přítomnost viru v těle pacienta, a tím stanovit etiologii onemocnění.

Tato studie poskytuje užitečné informace pro diagnostiku akutní virové hepatitidy B v inkubaci a časných vývojových stadiích onemocnění, kdy hlavní pacientovy sérologické markery v krvi mohou chybět. Sérová virová DNA je detekována u 50% pacientů v nepřítomnosti HBeAg. Analytická citlivost metody PCR není menší než 80 virových částic v 5 μl, poslední vzorek detekce DNA, specificita - 98%.

Tato metoda je důležitá pro diagnostiku a sledování průběhu chronické HBV. Přibližně 5-10% případů cirhózy a dalších chronických onemocnění jater je způsobeno chronickým nosičem viru hepatitidy B. Markery aktivity těchto onemocnění jsou přítomnost HBeAg a DNA viru hepatitidy B v krvi.

Metoda PCR umožňuje stanovit v krvi DNA viru hepatitidy B jak kvalitativně, tak kvantitativně. Stanovený fragment v obou případech je jedinečná DNA sekvence genu strukturního proteinu viru hepatitidy B.

Detekce DNA viru hepatitidy B v biomateriálu pomocí PCR je nezbytná pro:

řešení sporných výsledků sérologických testů;

detekce akutního stadia onemocnění ve srovnání s předchozí infekcí nebo kontaktem;

kontrolovat účinnost antivirové léčby.

Vymizení DNA z hepatitidy B z krve je známkou účinnosti léčby

Detekce viru hepatitidy B pomocí PCR (kvantitativní)

Tato metoda poskytuje důležité informace o intenzitě vývoje onemocnění, účinnosti léčby a rozvoji rezistence na aktivní léčiva.
Pro diagnózu virové hepatitidy pomocí PCR v séru se používají testovací systémy, jejichž citlivost je 50-100 kopií ve vzorku, což umožňuje detekci viru v koncentraci 5 X 103 ^ -104 kopií / ml. PCR při virové hepatitidě B je rozhodně nezbytná pro posouzení virové replikace.

Sérová virová DNA je detekována u 50% pacientů v nepřítomnosti HBeAg. Krevní sérum, lymfocyty a hepatobiopsie mohou sloužit jako materiál pro detekci DNA viru hepatitidy B.

• Hodnocení hladiny virémie je následující:
• méně než 2,10 ^ 5 kopií / ml (méně než 2,10 ^ 5 IU / ml) - nízká virémie;
• od 2,10 ^ 5 kopií / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) do 2,106 6 kopií / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - střední virémie;
• více než 2,10 ^ 6 kopií / ml - vysoká virémie.

Existuje vztah mezi výsledkem akutní virové hepatitidy B a koncentrací DNA HBV v krvi pacienta. S nízkou hladinou virémie se proces chronizace infekce blíží nule, s průměrem, proces je chronizován u 25-30% pacientů as vysokou úrovní virémie se akutní virová hepatitida B nejčastěji stává chronickou.

Indikace pro léčbu chronického HBV interferonu-alfa by měly být považovány za přítomnost markerů aktivní replikace viru (detekce HBV HBV, HBeAg a HBV DNA v krevním séru během předchozích 6 měsíců).

Kritéria pro hodnocení účinnosti léčby jsou vymizení HBEAg a HBV DNA v krvi, která je obvykle doprovázena normalizací hladin transamináz a dlouhodobou remisí onemocnění, DNA HBV zmizí z krve do 5. měsíce léčby u 80% pacientů. Snížení hladiny virémie o 85% nebo více do třetího dne od zahájení léčby ve srovnání s výchozím stavem je rychlé a poměrně přesné kritérium pro predikci účinnosti léčby.

Výzkum virové hepatitidy metodou ife

ELISA v diagnostice virové hepatitidy. Enzymové imunoanalýzy

Specifická laboratorní diagnostika virové hepatitidy je založena na použití imunochemických a molekulárně biologických výzkumných metod. Hlavními imunochemickými metodami jsou radioizotopy nebo radioimunní (RIA) a imunoanalýzy (ELISA). Imunochemické diagnostické metody jsou založeny na specifické interakci antigenu - protilátky s následnou identifikací komplexu pomocí speciálních značek. Nejběžnější enzymový imunotest.

První zprávy o použití enzymového imunotestu. jako metodu pro stanovení všech látek byly v roce 1971 publikovány dvě výzkumné skupiny - B. Van Weemen, A. Schuurs a E. Engvall, P. Perlmann. Enzymová imunoanalýza je založena na následujícím principu: na pevné fázi, která používá hlavně povrch jamek polystyrenové tablety, je fixován antigen infekčního agens nebo protilátky (často směs protilátek) na antigeny, které mají být detekovány. Tento antigen nebo protilátky, které jsou fixovány na pevné fázi, se nazývají imunosorbent.

V důsledku inkubace imunosorbentu a testovaného séra v přítomnosti detekovatelného činidla jsou navázány na komplex antigen - protilátka. Po promývacím postupu, během kterého byly odstraněny nevázané antigeny a protilátky, se provede inkubace s konjugátem. Jako konjugát pro detekci HBsAg se používají anti-HBs, při detekci protilátek proti viru hepatitidy C - protilátky proti lidským imunoglobulinům (konjugát antivirů) značený křenovou peroxidázou. Výsledkem této inkubace je navázání na již existující komplexy antigenů - protilátka dodatečně zavedeného konjugátu. Po odstranění nenavázaného konjugátu (promytí) se substrát zavede do jamek. Pokud se používá peroxidázový konjugát, používá se peroxid vodíku jako substrát v kombinaci s indikátorem, který se nejčastěji používá jako orto-fenylendiamin (OPD) nebo tetramethylbenzidin (TMB). Výsledek se odhaduje fotometricky.

Kvalita a spolehlivost analytických schopností metody enzymového imunoanalýzy je charakterizována řadou kritérií, mezi něž patří citlivost, specificita, přesnost a reprodukovatelnost.

Citlivost je minimální množství látky, které může být detekováno enzymovým imunotestem. V tomto případě je dolní hranicí citlivosti této metody koncentrace zkoušené látky ve vzorku, která odpovídá nejmenšímu pozitivnímu výsledku stanovení, který je statisticky významně odlišný od ukazatelů záměrně negativních vzorků. Citlivost IFTS závisí na řadě okolností, které se týkají jak designu testovacího systému (afinita imunosorbentu, kvality extrakčních a pufrových systémů), tak rozlišení a přesnosti metody registrace.

Specifičnost - schopnost přesně určit složky, pro jejichž stanovení je tento enzymový imunotest určen. Specifičnost ELISA je do značné míry určena zkříženou reakcí protilátek nebo antigenů (tj. Kompozice používaná jako imunosorbent) s blízce příbuznými sloučeninami, jakož i složení inkubačního média (matricový efekt).

Správnost - odpovídá průměrné hodnotě výsledků opakovaných stanovení stejného kontrolního vzorku se skutečnou hodnotou měřeného parametru. Přesnost stanovení v testu ELISA závisí na kvalitě testovacího systému a kontrolního vzorku. U dobrých imunoanalytických testovacích systémů jsou ukazatele správnosti v rozmezí 90-110%. Zvláštností biomedicínského výzkumu v ELISA je nemožnost stanovení přesné hodnoty, a proto se za skutečnou hodnotu považuje průměr několika odborných laboratoří. Statistickým kritériem pro správnost je aritmetický průměr a míra jeho odchylky od skutečné hodnoty vyjádřené v procentech.

Reprodukovatelnost - schopnost zkušebního systému vykazovat stejné hodnoty při opakovaných studiích stejného vzorku. Reprodukovatelnost závisí jak na náhodných chybách (chybách) během postupu reakce, tak na kvalitě testovacích systémů a přesnosti metody zaznamenávání výsledků. Předpokládá se, že reprodukovatelnost stejných kontrolních vzorků stejné společnosti v různých laboratořích by neměla překročit hodnotu variačního koeficientu 15%.

Existuje několik specifických schémat ELISA pro stanovení markerů virové hepatitidy: a) přímý enzymový imunotest; b) nepřímý enzymový imunotest; c) kompetitivní inhibici; c) metoda „trap“ nebo „capture“.

Z molekulárně biologických metod pro diagnostiku virové hepatitidy se běžně používá polymerázová řetězová reakce a hybridizace. Tyto metody, zejména PCR, umožňují detekovat velmi malá množství specifické virové DNA nebo RNA, a tedy replikační aktivitu a v některých případech i replikační aktivitu.

Hepatitida C krevní test

Hepatitida C je jedním z nejčastějších onemocnění jater, která se vyskytují, když jsou infikována virem hepatitidy C (HCV), který vstupuje do těla především při styku s krví infikované osoby. Vyskytuje se chronická a akutní hepatitida C. U 70-80% pacientů s akutní hepatitidou C nejsou příznaky nemoci, pouze v některých případech po určité době po infekci se projevují projevy onemocnění, které jsou vyjádřeny únavou, bolestí břicha, ztrátou chuti k jídlu, ztmavnutím. moč, zvracení, nevolnost, zeslabení výkalů, žloutenka, bolest v kloubech. Příznaky se zpravidla vyskytují 6-7 týdnů po infekci, ale doba trvání příznaků onemocnění se pohybuje od 2 týdnů do šesti měsíců. Pokud se objeví výše uvedené příznaky, musíte se poradit s lékařem infekčních nemocí a provést krevní test na hepatitidu C. Diagnóza hepatitidy, prováděná včas, může detekovat nemoc v raném stádiu a významně zvýšit šance na zotavení.

Když je naplánován test hepatitidy C.

Situace, kdy je vyžadován test hepatitidy C:

• během těhotenství a plánovaného rodičovství;
• pacienti se symptomy chronické nebo akutní hepatitidy;
• osoba je ohrožena. Jedná se o zdravotnické pracovníky, osoby ve vězení, donucovací orgány, osoby, které užívají drogy, mají velký počet sexuálních partnerů, mají AIDS, jsou na hemodialýze a další.

Příprava na analýzu hepatitidy C

Zvláštní příprava na analýzu hepatitidy C není nutná. Pro analýzu se odebírá krev ze žíly na lačný žaludek a současně by mělo uplynout nejméně osm hodin po posledním jídle.

Testy ELISA na hepatitidu C

První analýza, obvykle předepsaná pro diagnózu hepatitidy C - ELISA test (enzymově spojený imunosorbentní test). Testy ELISA na hepatitidu C umožňují detekci přítomnosti protilátek proti viru hepatitidy C (anti-HCVAb) v krvi. Pokud je výsledek testu ELISA pozitivní, znamená to, že je přítomen kontakt těla s virem hepatitidy C. Ale 40% lidí, kteří mají pozitivní ELISA, nedetekují virus v krvi. Tento jev se nazývá falešně pozitivní výsledek. Také pomocí ELISA se kontroluje dárcovská krev.

RIBA pro hepatitidu C

Analýza RIBA pro hepatitidu C se používá k potvrzení pozitivního výsledku ELISA. Metoda rekombinantní imunoblotingu (RIBA) je přesnější studium přítomnosti protilátek proti viru hepatitidy C. Přítomnost viru hepatitidy C v těle také neurčuje pozitivní výsledek, ale pouze potvrzuje přítomnost protilátek.

Testy PCR na hepatitidu C

Za účelem zjištění přítomnosti virů hepatitidy C v krvi (HCV RNA) a stanovení diagnózy nejčastěji používají analýzu metodou polymerázové řetězové reakce (PCR). Tato studie umožňuje s vysokou přesností detekovat přítomnost i malého množství viru v krvi. PCR analýza hepatitidy C může odhalit přítomnost viru již 5 dní po infekci, dlouho před výskytem protilátek. Pokud je výsledek PCR analýzy pozitivní, znamená to přítomnost aktivní infekce.

Existují takové varianty analýzy PCR:

• kvantitativní PCR, která umožňuje určit nejen přítomnost viru, ale také virovou zátěž (množství viru). Tento ukazatel má velký význam pro určení účinnosti léčby;
• genotyp, který určuje genotyp viru hepatitidy C, který je důležitý pro stanovení doby trvání a taktiky léčby. Existuje více než 10 genotypů viru hepatitidy C, ale pro klinickou praxi stačí definovat pět nejběžnějších typů: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Byla provedena kvantitativní analýza PCR:

• kvalitativním pozitivním testem na přítomnost RNA viru hepatitidy C v séru;
• pro přesné posouzení účinnosti léčby;
• stanovit taktiku léčby pacienta.

Neexistuje přímý vztah mezi závažností hepatitidy C a množstvím viru v krvi. Koncentrace viru ovlivňuje infekčnost onemocnění, tj. Čím větší je množství viru v krvi pacienta, tím větší je riziko přenosu viru, například pohlavním stykem nebo z matky na dítě. Účinnost léčby závisí také na koncentraci viru. Během terapie je příznivým faktorem nízká virová zátěž a velmi vysoká je nepříznivá.

Analýza genotypizace se provádí:

• kvalitativním pozitivním testem na přítomnost RNA viru hepatitidy C v séru;
• pro přesné posouzení účinnosti léčby;
• stanovit taktiku léčby pacienta;
• předvídat chronizaci infekčního procesu;
• pro stanovení progrese onemocnění.

Detekce genotypu viru má velký význam pro stanovení délky léčby, což je důležité, protože interferon má široké spektrum vedlejších účinků a nízkou toleranci pacienta.

Dekódovací analýza pro hepatitidu C

Obvykle chybí RNA RNA, protilátky proti nim a antigeny. Přítomnost protilátek v krvi indikuje přítomnost chronické nebo akutní hepatitidy C nebo doby zotavení. Pokud je v krvi přítomna HCV RNA, která je stanovena PCR analýzou, znamená to přítomnost viru v krvi.

Při nesprávné zkušební technice, transportu a abnormalitách krve může analýza PCR někdy vykazovat falešně pozitivní výsledky. Analýzy ELISA a RIBA v raných stadiích onemocnění, kdy tělo dosud nevyprodukovalo dostatečné množství protilátek, mohou vykazovat falešně negativní výsledek.

Pokud se při dešifrování testu na hepatitidu C získají pozitivní výsledky, je nutné kontaktovat lékaře s infekčním onemocněním a gastroenterologa pro další diagnostiku a léčbu.

Segmentované neutrofily se snížily

Dětské destičky jsou normální, zvýšené, snížené

Hormon stimulující štítnou žlázu TGT

Diagnostika hepatitidy

Nelze okamžitě zjistit přítomnost hepatitidy v těle, protože inkubační doba onemocnění může trvat až čtyři týdny. Když se objeví první známky onemocnění, v postiženém organismu dochází k radikálním změnám ve složení krve: biochemická analýza vykazuje závažný zdravotní problém a přítomnost patogenního viru. Abychom však učinili konečnou diagnózu, nestačí darovat krev pro hepatitidu, stejně jako podrobnou diagnózu hepatitidy.

Laboratorní diagnostika hepatitidy

Je žádoucí provést ji po skončení inkubační doby, aby lékař s maximální přesností mohl určit onemocnění jater přítomné v těle. V opačném případě předepsaná léčba neposkytne požadovaný terapeutický účinek a dokonce zhorší převažující klinický obraz.

Diagnostika hepatitidy A

Diagnóza hepatitidy A obvykle začíná podrobným dotazováním pacienta a jmenováním řady testů, které musí být provedeny co nejdříve. To je:

• biochemický krevní test;
• kompletní krevní obraz;
• PCR metoda;
• ELISA;
• coagulogram.

Pokud Botkinova choroba postupuje, pak je pozorován abnormální skok bilirubinu, AlAT a AsAT, vzorku thymolu podle výsledků biochemické analýzy krve. Navíc jsou produkovány specifické anti-HAV IgM, které jsou nezvratnou skutečností o přítomnosti hepatitidy A.
Analýza krve je obecně určena poklesem leukocytů, skokem v ESR a lymfocytózou. A nejspolehlivější je však metoda PCR, která určuje ukazatel RNA patogenního viru.
Kromě toho lékař studuje příznaky onemocnění, po kterém může učinit konečnou diagnózu a prorazit k nejúčinnější terapii. Potřeba instrumentálního vyšetření je velmi vzácná. Po úspěšné konzervativní léčbě v podmínkách hospitalizace a karantény pacienta čeká konečné uzdravení a hepatitida A se znovu nevyskytuje.

Diagnostika hepatitidy B

Stanovení přítomnosti viru hepatitidy B je také možné podle výsledků laboratorních testů, a proto je první věc potřebná k darování krve na hepatitidu. Patogenní virus má přirozeně tři hlavní antigeny - HBsAg, HBcAg a HBeAg, na které se v těle produkují protilátky. Hlavním rysem tohoto klinického obrazu je ELISA - ELISA, která právě odhaluje specifické markery hepatitidy B.
Ihned by mělo být objasněno, že antigen HBsAg se objevuje v krvi ještě před prvními příznaky hepatitidy a je spolehlivě stanoven v období ikteriky. Negativní test však nevylučuje přítomnost hepatitidy B, a proto vyžaduje použití stejně účinné metody polymerázové řetězové reakce (PCR).
Pokud máte podezření, že hepatitida B je povinná, je biochemický krevní test, který se doporučuje projít na prvním místě. Provádění biopsie jater a ultrazvuku peritoneálních orgánů je diskutováno individuálně, ale pokud je historie onemocnění velmi jasná, není třeba používat metody klinického vyšetření.

Jaterní echogram u autoimunitní hepatitidy ve stadiu chronické hepatitidy

Diagnostika hepatitidy C

K tomu, aby se tato diagnóza, nestačí darovat krev na hepatitidu, protože virus může převažovat v těle v latentní formě. Hlavními laboratorními testy jsou však všechny výše uvedené analýzy a také další výkon biopsie jater. Toto mikroskopické vyšetření biologického materiálu (v našem případě kus jaterní tkáně) určuje rozsah patologického procesu a tkáňové fibrózy. Odběr vzorků se provádí za lokálních anestetik, komplikace tohoto postupu jsou v lékařské praxi velmi vzácné.
Pokud je podezření na hepatitidu C, hlavní metodou klinického vyšetření je ultrazvuk peritoneálních orgánů. Důvod je jednoduchý: onemocnění se často projevuje vizuální změnou v postižených játrech, změnami v jeho struktuře a velikosti. Tímto způsobem můžete určit:

• velikost jater, sleziny, slinivky břišní a žlučníku;
• patologické změny v těchto orgánech;
• celkový průtok krve v peritoneálních orgánech;
• optimální prostor pro provádění biopsie jater.

Tato metoda klinického vyšetření určuje všechny fokální patologie orgánu na mikroskopické úrovni. Pokud jsou játra na obrazovce zobrazena v šedé škále, je nutná okamžitá biopsie, protože šedá barva zobrazuje postižené tkáně „lidského filtru“.

Prevence hepatitidy

Vzhledem k tomu, že se choroba neprojevuje okamžitě, není daleko od všech klinických snímků, které se dostanou k okamžité léčbě. Pacient si prostě nemůže být vědom toho, že v těle existuje patogenní virus, který se rychle šíří do krevního oběhu a infikuje zdravé jaterní buňky.
Aby se zabránilo takovému tragickému osudu, doporučuje se dodržovat všechna preventivní opatření. Taková ostražitost významně sníží riziko morbidity a zachrání vás před vážnými zdravotními problémy v budoucnu. Základní pravidla prevence jsou uvedena níže:

• umývej si ruce po ulici;
• vysoce kvalitní zpracování čerstvé zeleniny a ovoce;
• provádět všechna preventivní očkování uvedená v ročním plánu;
• selektivní přístup k sexuálním partnerům;
• vyhnout se kontaktu s nemocnými lidmi;
• používat pouze jednorázové injekční stříkačky a být zvláště ostražitý ve stanicích krevní transfúze.

Doporučuje se také pravidelně (jednou za šest měsíců) darovat krev na hepatitidu, aby se zajistilo, že virus nepronikne do těla a neinfikuje jednou zdravé buňky jater. Je-li stanovena diagnóza, je nutné okamžitě se stát výdejním účtem a dodržovat všechna doporučení specialisty.

Autor publikace:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Vzdělání: Státní lékařská univerzita v Rostově (Rostovská státní lékařská univerzita), Katedra gastroenterologie a endoskopie.
Gastroenterolog
Lékař lékařských věd